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正文內(nèi)容

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2025-08-04 04:32本頁面
  

【正文】 引起乳鼠發(fā)病,??刹《径嘤赡X脊液分離,糞便中不易檢出。腸道病毒型特異性鑒定主要靠血清中和實驗,但是有些毒株的中和作用不穩(wěn)定,仍需由單價血清來鑒定,另一要注意的是病毒顆粒的集聚會影響中和效果,如EV71的中和實驗就需要使用單個分散的病毒。分子生物學檢查 近年來,PCR技術(shù)已成為診斷腸道病毒感染最常用的一村方法。PCR測序技術(shù)則可用于腸道病毒分型。日本學者還提出了一種鑒別CoxAl6與EV71的方法,由病毒分離、RTPCR擴增和限制性內(nèi)切酶酶切3步組成。對需鑒定的毒株,逆轉(zhuǎn)錄和擴增均由引物E31和E33分別進行,CoxACoxAl6和EV71是僅有的可由2/E33引導而不可由2/E31引導的3種病毒,由此區(qū)別于其它腸道病毒;擴增后的產(chǎn)物再分別經(jīng)Taq I、EcoT22 II酶切,CoxAl6被Taq I切成3段、被EcoT22 II切成1段,而EV 71不被這兩種酶所切, 因此迅速地鑒別CoxA16與EV71。此外,熒光斑點雜交法也常于腸道病毒分型檢測。 病毒學檢測注意事項標本采集 腸道病毒可通過消化道感染,有的還可借助呼吸傳播。當人體感染了腸道病毒后,經(jīng)過淋巴組織、咽喉和腸道內(nèi)初次和繼續(xù)繁殖后,便發(fā)生病毒血癥,進而病毒在網(wǎng)狀內(nèi)皮細胞繁殖,最后侵犯靶器官(脊髓、腦、腦膜、心肌、皮膚等)。病人在出現(xiàn)臨床癥狀前數(shù)天,其血液、咽喉和糞便中均存在病毒。咽喉排毒為1—2周,糞便可更長些。但為了提高病毒檢測的陽性率,越早采集標本越好。同時采集二種以上標本,可提高陽性率。在標本采集之前,為了預防細菌或其他病毒感染,一切用具均須高壓滅菌。標本采集后,貼好標簽,置冰壺送至實驗室。1.糞便 一般采集4—8 g,電鏡檢查必須在20 g以上。不必加任何保護液,裝于小瓶送檢或冷凍保存。2.直腸拭子 如糞便標本不能采集,通??捎弥蹦c拭子代替,但陽性率大大降低。3.喉洗液 在取標本之前,讓病人先咳嗽聲,頭向后仰,在咽喉部反復洗漱幾分鐘,把漱口液吐入消毒平皿,裝于消毒試管送至實驗室。4.皰疹液 選擇有混濁皰疹,先進行皮膚消毒,然后用注射針頭抽取皰疹液,置于消毒試管,保持低溫冰箱待檢。5.腦脊液 在無菌條件下采集,置于消毒試管中,立即送檢或凍存。6.尸體組織 尸檢材料應盡可能立即采集,并應備有幾套消毒器械。收集各種組織時,應按順序,避免胃腸內(nèi)容物的污染。體腔外的組織(如中樞神經(jīng)組織、腮腺和淋巴結(jié)),應在體腔打開之前采集;胸腔內(nèi)組織應在腹腔打開前采集;腹腔內(nèi)組織應在腸腔打開前采集。每個組織分別使用一套消毒器械,并分別置于適宜的消毒器皿內(nèi),不必加任何保護液,立刻送到實驗室。7.血液標本 如做抗體測定,必須采集2份血清標本。第1份(急性期)在發(fā)病時盡早采集,第2份在發(fā)病后1個月左右采集。每次采集時,必須空腹,在無菌條件下抽取5m1血液,置于消毒試管。在室溫放置2 h,待凝固后分離血清。
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