【正文】 體積大小信息；中高角度(10176。~20176。)散射光可反映細(xì)胞顆粒的復(fù)雜性信息。綜合這兩個(gè)角度散射光的信息，結(jié)合其他特殊技術(shù)來(lái)完成白細(xì)胞的五分類(lèi)測(cè)定。標(biāo)本在鞘流的帶動(dòng)下進(jìn)入儀器的檢測(cè)區(qū)域后，激光照射于細(xì)胞之上所發(fā)射出的低角度和中高角度散射光信號(hào)可表現(xiàn)出細(xì)胞大小和內(nèi)容物復(fù)雜程度（包括細(xì)胞內(nèi)顆粒等）的特性信息，經(jīng)儀器檢測(cè)分析，將其分布在一個(gè)二維空間的散點(diǎn)圖中，可區(qū)分淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞、中性粒細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞。而化學(xué)染色技術(shù)可進(jìn)一步實(shí)現(xiàn)對(duì)嗜酸性粒細(xì)胞的準(zhǔn)確判定。在WBC/BASO通道中通過(guò)強(qiáng)溶型試劑和特異性染色技術(shù)，可保留完整的嗜堿性粒細(xì)胞，并對(duì)其進(jìn)行特異性修飾，同時(shí)破壞其它四類(lèi)白細(xì)胞，使之形成膜包核狀態(tài)，在激光的照射下同樣形成兩個(gè)角度的散射光，完整的嗜堿性粒細(xì)胞體積偏大，其他類(lèi)別白細(xì)胞體積變小，通過(guò)激光信號(hào)的強(qiáng)弱來(lái)計(jì)數(shù)嗜堿性粒細(xì)胞并在該通道中計(jì)數(shù)白細(xì)胞總數(shù)。該方法可以有效排除難溶性紅細(xì)胞、巨大血小板、血小板聚集及其它非細(xì)胞顆粒等因素對(duì)計(jì)數(shù)的影響，保證嗜堿性粒細(xì)胞及WBC總數(shù)的精確分類(lèi)和計(jì)數(shù)。圖15 邁瑞五分類(lèi)血細(xì)胞分析儀散點(diǎn)圖特征三 圖像分析法白細(xì)胞分類(lèi)儀器文章開(kāi)始部分已經(jīng)提到在1982年日本日立公司生產(chǎn)的8200型白細(xì)胞圖像分析系統(tǒng)，應(yīng)該是此類(lèi)儀器的原始機(jī)型。而作者在1984年也曾經(jīng)參與過(guò)中科院某研究所的一個(gè)關(guān)于血細(xì)胞形態(tài)特征數(shù)字化的研究工作，其目的是將5類(lèi)白細(xì)胞基本信息在顯微鏡下掃描后形成數(shù)據(jù)模型，可惜這項(xiàng)工作因?yàn)楫?dāng)時(shí)技術(shù)條件的限制而沒(méi)有取得預(yù)想的結(jié)果。近年來(lái)瑞典CellaVision AB公司開(kāi)發(fā)出一種新型自動(dòng)影像血細(xì)胞形態(tài)分析系統(tǒng)CellaVision已經(jīng)投入臨床應(yīng)用，該產(chǎn)品2005年3月在歐洲開(kāi)始投放市場(chǎng),已經(jīng)有許多實(shí)驗(yàn)室配備了該系統(tǒng)，用于進(jìn)行血涂片的過(guò)篩檢查，該產(chǎn)品2007年進(jìn)入中國(guó)市場(chǎng)，正處于推廣中。該系統(tǒng)目前有兩款機(jī)型，CellaVision DM96和CellaVision DM8。該系統(tǒng)是以染色后的血涂片為標(biāo)本，以最接近傳統(tǒng)顯微鏡觀察法的技術(shù)對(duì)血液中的白細(xì)胞、紅細(xì)胞進(jìn)行初步分類(lèi)的儀器，該儀器采用先進(jìn)的人工智能神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)系統(tǒng)和全自動(dòng)的操作程序，可使血細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢驗(yàn)在自動(dòng)化、標(biāo)準(zhǔn)化、智能化方面達(dá)到一定的目的和水準(zhǔn)，在強(qiáng)調(diào)形態(tài)學(xué)檢驗(yàn)重要性的背景下有良好的發(fā)展前景。圖 16檢驗(yàn)醫(yī)師在Cellavision顯示屏前審查白細(xì)胞分類(lèi)結(jié)果該儀器的組成可分為五大部分1 血片自動(dòng)傳輸系統(tǒng) 將染色后的標(biāo)準(zhǔn)血涂片放在片盒內(nèi)。該系統(tǒng)不具染色功能，需先將血片用瑞氏或瑞氏姬姆薩染液染色。血片可按照順序被儀器傳輸系統(tǒng)傳送到顯微鏡載物臺(tái)上。2 血片自動(dòng)傳輸系統(tǒng) 將血片從片盒內(nèi)取出并通過(guò)掃描條碼記錄標(biāo)本編號(hào)，然后將標(biāo)本送到自動(dòng)顯微鏡的載物臺(tái)上。3 自動(dòng)加油系統(tǒng) 自動(dòng)吸取適量的顯微鏡油，滴加到血涂片適當(dāng)?shù)奈恢?，用于油鏡頭下的細(xì)胞觀察和分類(lèi)。其感應(yīng)器能提示加油的狀態(tài)和加油的量。4 自動(dòng)血涂片掃描系統(tǒng) 包括一臺(tái)具有物鏡頭自動(dòng)轉(zhuǎn)換、血涂片可三維方向移動(dòng)的自動(dòng)顯微鏡和一臺(tái)具有自動(dòng)調(diào)焦能力的數(shù)碼照相機(jī)。物鏡頭可根據(jù)要求自動(dòng)轉(zhuǎn)換100倍鏡頭；載物臺(tái)可水平上下左右移動(dòng)，并可按照Z(yǔ)字型路線(xiàn)移動(dòng)血片，供照相機(jī)攝取不同部位的細(xì)胞形態(tài)圖像。5 數(shù)據(jù)光電轉(zhuǎn)換系統(tǒng) 數(shù)碼相機(jī)拍攝后的數(shù)字圖像信息，將光學(xué)信號(hào)轉(zhuǎn)變成數(shù)字信號(hào)，然后對(duì)每個(gè)視野下的圖像進(jìn)行分析，辨識(shí)單細(xì)胞層，白細(xì)胞定位點(diǎn)，從而為軟件系統(tǒng)的白細(xì)胞分類(lèi)提供源數(shù)據(jù)。儀器分析原理：首先在10倍物鏡頭下搜索單細(xì)胞層，轉(zhuǎn)換40倍物鏡頭后拍攝紅細(xì)胞圖像，再轉(zhuǎn)換100倍油鏡頭后，在鏡油加入后，在單細(xì)胞層掃描拍攝有核的白細(xì)胞，其所搜尋拍攝的白細(xì)胞數(shù)量可自行定義。獲得細(xì)胞數(shù)碼圖像后，通過(guò)軟件系統(tǒng)提取細(xì)胞特征，例如紅細(xì)胞，需提取紅細(xì)胞直徑、顏色、色素含量、對(duì)比度等特征性信息；白細(xì)胞需提取白細(xì)胞形狀、大小、紋理、顏色、空隙、細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)比例關(guān)系等360個(gè)信息參數(shù)。將所提取的特征信息轉(zhuǎn)化為數(shù)字信號(hào)，然后通過(guò)人工智能神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)系統(tǒng)（ANN）進(jìn)行形態(tài)學(xué)分析。這種人工神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)系統(tǒng)是根據(jù)大型細(xì)胞數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行制作的。圖17 Cellavision拍攝的中性粒細(xì)胞圖片圖18 Cellavision拍攝的中性桿狀核粒細(xì)胞、嗜酸粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞和幼稚細(xì)胞圖片儀器顯示屏上可提供白細(xì)胞分類(lèi)的結(jié)果和分割成單細(xì)胞的圖片，在一般情況下操作者只需要確認(rèn)分類(lèi)結(jié)果，以及側(cè)重于那些處于邊緣的細(xì)胞分類(lèi)即可。對(duì)儀器不能確認(rèn)的細(xì)胞，可通過(guò)屏幕調(diào)出，放大觀察，再確認(rèn)類(lèi)別。操作者還可建立自己的參考細(xì)胞圖庫(kù)，并可對(duì)細(xì)胞形態(tài)和報(bào)告添加備注。系統(tǒng)還可與血細(xì)胞分析儀連接，獲取血細(xì)胞計(jì)數(shù)的結(jié)果，形成血細(xì)胞自動(dòng)化分析+形態(tài)學(xué)報(bào)告的更加完美的結(jié)果。該系統(tǒng)可給出白細(xì)胞17個(gè)類(lèi)別，除了五分類(lèi)結(jié)果外，還有早幼粒細(xì)胞、晚幼粒細(xì)胞、原始細(xì)胞、異型淋巴細(xì)胞等類(lèi)別；紅細(xì)胞分析上可得到大小不均、小型紅細(xì)胞、巨紅細(xì)胞、低色素紅細(xì)胞、多色性紅細(xì)胞、異型紅細(xì)胞等信息；在血小板上可觀察到血小板聚集情況，以及根據(jù)圖像中血小板數(shù)量判斷核實(shí)血小板數(shù)量，與血細(xì)胞分析儀計(jì)數(shù)的血小板數(shù)量相互比對(duì)核實(shí)?？尚纬蓭в邪准?xì)胞分類(lèi)圖的結(jié)果報(bào)告。儀器涂片和染色可通過(guò)手工方式操作，但需要較好的技術(shù)水平，薄血片，并有一定數(shù)量的單細(xì)胞層，染色顏色保持穩(wěn)定。也可配置自動(dòng)涂片和自動(dòng)染色機(jī)完成血涂片的前期預(yù)備性工作。該儀器可與全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀測(cè)定數(shù)據(jù)進(jìn)行連接，可以將具有形態(tài)學(xué)特點(diǎn)的分類(lèi)結(jié)果與儀器分析結(jié)果進(jìn)行合并，得到更加可靠的血細(xì)胞分析數(shù)據(jù)。小結(jié)：本文從全自動(dòng)五分類(lèi)式血細(xì)胞分析儀談起，主要介紹各種品牌和代表類(lèi)型的儀器在白細(xì)胞分析和分類(lèi)上的不同原理和散點(diǎn)圖特征，這些儀器應(yīng)該是目前國(guó)內(nèi)在應(yīng)用五分類(lèi)血細(xì)胞分析儀上有代表性的儀器。文中材料來(lái)自教材、圖書(shū)、文獻(xiàn)報(bào)道和廠家宣傳資料。如有不妥或錯(cuò)誤請(qǐng)大家指正。參考文獻(xiàn)1 張時(shí)民. 血細(xì)胞分析儀50年的發(fā)展歷史和展望.臨床檢驗(yàn)及實(shí)驗(yàn)室設(shè)備， 2004，6（4）：27362 張時(shí)民. ，2005，14(特刊)：13233 張時(shí)民，李曉京. , 2007,16(6):1523 周建山 蘭亞婷 ，2004，27（3）：205208 ，（4）：3653706 張旭凱，陸海峰 五分類(lèi)血液細(xì)胞分析儀的原理及應(yīng)用，中國(guó)醫(yī)療器械信息，2006，12（10）：5256