傳染病實習(xí)報告doc-資料下載頁
2025-07-17 16:53本頁面
【正文】 PCR和PCR產(chǎn)物的電泳圖像中均無HPS陽性條帶，可判斷沒有病毒。 RTPCR和PCR電泳結(jié)果圖（7）細(xì)胞病變情況①正常細(xì)胞，細(xì)胞大小基本相等，均勻平鋪生長（圖一）；②接毒24h后有出現(xiàn)細(xì)胞病變，部分細(xì)胞聚集成團(tuán)塊狀（圖二）； ③接毒48h后細(xì)胞聚集成團(tuán)塊狀，相較于第二天聚集更明顯，因為一般要盲傳三代才可出現(xiàn)明顯的CPE，此次實驗一代在顯微鏡下已有病變，因此可確認(rèn)有病毒增殖（圖三）。 圖一 圖二 圖三五、討論1. 實驗無菌意識不足：應(yīng)在酒精燈15cm范圍內(nèi)操作，不可將平板蓋子完全打開接種，要注意規(guī)范操作，取用無菌實驗物品，勿碰觸槍頭尖頭部或是容器瓶口等。2. 觸片：制作觸片時,沾一下即可，不要涂布，在開放環(huán)境下即可進(jìn)行操作。3. 涂片：涂片操作時，先滴加生理鹽水，生理鹽水要適量，涂布均勻后在酒精燈上間斷過幾下，不可太燙，以不燙手背為原則。4. 染色：HE染色時需注意每一步的染色時間，用蒸餾水沖洗時要將載玻片傾斜，從一頭緩緩沖洗，以防將樣品洗脫，每次加試劑時要完全覆蓋樣品表面，使其充分染色。5. 倒平板：需注意要灼燒瓶口，倒1520ml瓊脂，在酒精燈無菌范圍內(nèi)操作，平板開口不要太大，以免細(xì)菌污染。本次實習(xí)過程中很多制作好的平板第二天就長了雜菌，證明大家的無菌操作還是不夠規(guī)范。6. 油鏡：使用前后都要用二甲苯涂抹擦鏡紙將油鏡擦干凈，以免影響下次使用。7. 細(xì)菌劃線接種：要先將平板周圍在酒精燈外焰下燒一圈，然后左手抓緊TSA平板，用手掌將平皿的底固定，用拇指和食指將平皿的蓋略抬起一些，然后右手持接種環(huán)，接種環(huán)也要先燒一下，然后接觸病料，再與平板平面呈30176。輕輕劃線，一定要利用腕力，避免將平板劃破，劃線時盡量靠近酒精燈；接種環(huán)灼燒消毒后要冷卻后再接種。8. 藍(lán)耳病毒的細(xì)胞病變是形成空斑，但不是所有的病毒病變都一樣，也有形成合胞體胞漿顆粒化或產(chǎn)生輕微病變等等，在臨床試驗中注意區(qū)別，真正判定病毒種類還是得做PCR檢測。9. 細(xì)胞脫落原因：孵育的時間太長；實驗過程中過度搖動；細(xì)胞老化；沒有在CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)；有細(xì)菌污染。10. 判定細(xì)胞污染：?細(xì)胞營養(yǎng)液渾濁（對光有顆粒非污染） ?支原體污染：營養(yǎng)液變黃 ?營養(yǎng)液沒有超過1/1011. 提取RNA后要立即進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄操作，如果不立即實驗，需70℃保存材料。12. 做DNA的PCR加樣時，需在正常環(huán)境下進(jìn)行，不可有風(fēng)，否則影響結(jié)果（在本次試驗中因為重點在于熟悉操作，同學(xué)太多加上天氣炎熱故沒有關(guān)閉風(fēng)扇）。13. 原定于周五參觀江浦農(nóng)場的計劃最終改為下周二（6月10日）參觀。 自我鑒定：經(jīng)過本次實習(xí)，我不但了解了整個傳染病的診斷流程，也對不同實驗室檢測手法有了一定的認(rèn)識，基本掌握了一些常用實驗室診斷試驗的操作方法及注意事項。綜合近幾年學(xué)習(xí)的相關(guān)試驗方法，對傳染病的診斷有了系統(tǒng)的認(rèn)知和理論的融合。同時在此過程中也發(fā)現(xiàn)了很多需要規(guī)范的地方，這非常有利于自己操作手法的改進(jìn)和錯誤的糾正。雖然由于時間和條件有限，不能很好地獲得滿意的實驗結(jié)果，但還是很好地學(xué)習(xí)了相關(guān)的實驗室操作技術(shù)，鍛煉了我的專業(yè)技術(shù)能力，為以后的學(xué)習(xí)和工作奠定了良好地實踐基礎(chǔ)。整個實習(xí)過程中小組團(tuán)結(jié)合作，分工明確，很大效率的提高了試驗進(jìn)度，總的來說還是受益匪淺的！實習(xí)單位考核意見評語（在校內(nèi)實習(xí)本欄不用填）：考核等級（五級記分制）：實習(xí)單位指導(dǎo)教師（簽名）：實習(xí)單位（蓋章）年 月 日指導(dǎo)教師考核意見評語：考核等級（五級記分制）：指導(dǎo)教師（簽名）：年 月 日備注
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