【正文】 炎癥有較好的療效，部分藥物對(duì)免疫性炎癥有一定的治療作用。炎癥早期主要表現(xiàn)為毛細(xì)血管擴(kuò)張、通透性亢進(jìn)、滲出和水腫；中期主要是白細(xì)胞向炎灶聚集和血小板聚集；常用毛細(xì)血管通透性測(cè)定、鼠耳腫脹法、大鼠足腫脹法、胸膜炎試驗(yàn)及大鼠氣囊滑膜炎等炎癥模型，觀察清熱藥物的抗炎作用。也可根據(jù)臨床治療疾病的不同選用其它炎癥模型，如小鼠流感病毒性肺炎、大鼠大腸桿菌性腹膜炎、家兔肺炎球菌性角膜炎等。免疫性炎癥可選用小鼠遲發(fā)行超敏反應(yīng)、小鼠耳接觸性皮炎、大鼠佐劑性關(guān)節(jié)炎、大鼠PCA試驗(yàn)等等。 機(jī)體免疫功能對(duì)感染過(guò)程有重要的影響，尤其在感染發(fā)病和轉(zhuǎn)歸上，免疫包括特異性免疫和非特異性免疫。用于篩選免疫藥物常喲的試驗(yàn)方法有：（1） 非特異性免疫功能測(cè)定：最常用的方法有免疫器官稱重法和細(xì)胞吐噬功能測(cè)定法兩種，前者是在給藥一定時(shí)間后觀察給藥組和為給藥組動(dòng)物免疫器官（胸鮮、甲狀腺、脾臟淋巴結(jié)等）重量的差異，后者主要是用藥后計(jì)算吐噬雞紅細(xì)胞和羊紅細(xì)胞膠體炭粒、剛果紅染料炭粒、標(biāo)記51Cr紅細(xì)胞等數(shù)量來(lái)判斷免疫功能是提高或抑制。（2） 特異性細(xì)胞免疫功能測(cè)定：常用的試驗(yàn)方法有玫瑰花環(huán)形成試驗(yàn)、淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)、皮膚遲發(fā)型過(guò)敏反應(yīng)試驗(yàn)等。（3） 特異性體液免疫功能測(cè)定：常用試驗(yàn)方法有單向免疫擴(kuò)散法、溶血空斑測(cè)定、血清溶血素測(cè)定、血清凝集素測(cè)定等。 根據(jù)清熱藥個(gè)體性味、功效、主治的不同，可以進(jìn)行其它相關(guān)實(shí)驗(yàn)的研究，如抗過(guò)氧化損傷、保護(hù)細(xì)胞器、抗腫瘤、降壓、保肝等。此外，由于清熱方藥在臨床上主要用于里熱證的治療，研究時(shí)應(yīng)根據(jù)傳統(tǒng)的中醫(yī)藥理論并結(jié)合現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對(duì)該病的病因、發(fā)病機(jī)制的認(rèn)識(shí)，合理設(shè)計(jì)研究?jī)?nèi)容。現(xiàn)以牙周炎（里實(shí)熱證）為例作一說(shuō)明。 牙周炎（實(shí)熱型）屬于里證、熱證，其發(fā)病中醫(yī)認(rèn)為是胃腸積熱，火熱上沖所致，西醫(yī)認(rèn)為是菌斑細(xì)菌及其產(chǎn)物刺激所導(dǎo)致的牙周炎癥反應(yīng)，臨床見(jiàn)牙齦出血、疼痛、甚至糜爛滲出等。牙周炎的發(fā)病不僅與牙周局部感染有關(guān)，亦與機(jī)體免疫功能有關(guān)。因此研究清熱方藥（清解胃腸積熱）應(yīng)該從以下幾個(gè)方面著手：（1）驅(qū)邪：即抗病原體試驗(yàn)。牙周炎是一種感染性疾病，細(xì)菌感染是牙周炎的始動(dòng)因素。細(xì)菌附著牙齒或軟組織，形成菌斑，從而引起牙齦紅腫、出血、牙槽骨破壞等，齦下菌斑的形成是牙周炎發(fā)生的基本條件，齦下菌斑主要是革蘭氏陰性厭氧菌。因此研究藥物對(duì)牙周炎是否有治療作用首先要考慮藥物是否有抗革蘭氏陰性厭氧菌的作用，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)并確定與牙周炎有關(guān)的細(xì)菌如伴放線放線桿菌和牙齦卟啉單胞菌，可以采用體外和體內(nèi)抗菌相結(jié)合的方法進(jìn)行研究。（2）緩解癥狀：①抗炎：牙周炎是一種炎癥，因此考慮設(shè)計(jì)抗炎試驗(yàn)，如滲出相炎癥和增殖相炎癥模型，特異性炎癥模型，即牙周炎模型（如經(jīng)口腔接種特異菌形成的牙周炎模型）；此外研究表明多種炎性細(xì)胞因子與牙周炎的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)，如ILILIL8等，應(yīng)該設(shè)計(jì)針對(duì)針對(duì)此類炎性因子的試驗(yàn)研究；②牙周炎伴有疼痛癥狀，對(duì)患者生活質(zhì)量有較大的影響，故鎮(zhèn)痛試驗(yàn)亦是考慮設(shè)計(jì)的內(nèi)容之一；③牙周炎多伴有牙齦出血，針對(duì)出血可以設(shè)計(jì)止血試驗(yàn)，如凝血酶時(shí)間測(cè)定、出血時(shí)間測(cè)定、纖維蛋白溶解功能測(cè)定等。（3）扶正：“正氣存內(nèi)，邪不可干”，免疫功能，尤其是牙周局部粘膜免疫功能的正常與否，對(duì)牙周炎的發(fā)生發(fā)展有重要意義。尤其是現(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn)牙周病原菌含有非特異引起B(yǎng)淋巴細(xì)胞大量增殖和分化的成分，因此針對(duì)牙周局部粘膜免疫和B細(xì)胞細(xì)胞的免疫功能測(cè)定也是必不可少的一個(gè)設(shè)計(jì)內(nèi)容。當(dāng)然具體研究中，不同藥物針對(duì)的重點(diǎn)不同，研究并不是要面面俱到，但根據(jù)研究方藥的功能主治和現(xiàn)代藥理研究成果進(jìn)行合理設(shè)計(jì)是必須而且必要的。 魚腥草對(duì)發(fā)熱家兔的解熱作用 [目的] 觀察柴胡對(duì)家兔體溫的影響；了解柴胡解熱作用的特點(diǎn) [原理] 本實(shí)驗(yàn)采用傷寒、副傷寒甲乙三聯(lián)菌苗作為致熱原，此三聯(lián)菌苗注射家兔機(jī)體后很快誘生內(nèi)生性致熱原，內(nèi)熱原可能是發(fā)熱的信息分子，把信息傳遞到視前區(qū)丘腦下部的前部體溫調(diào)節(jié)中樞，使機(jī)體體溫調(diào)節(jié)中樞對(duì)體溫的調(diào)節(jié)功能失常，產(chǎn)熱大于散熱，體溫調(diào)定點(diǎn)上移，導(dǎo)致家兔體溫升高，從而造成家兔發(fā)熱模型。實(shí)驗(yàn)以正常兔作為對(duì)照，觀察魚腥草的解熱作用及其解熱特點(diǎn)。 [器材] 數(shù)字顯示測(cè)溫計(jì)、磅秤、家兔固定架、注射器[藥品] 傷寒、副傷寒甲乙三聯(lián)菌、魚腥草注射液（2g/ml , 10ml/支, 雅安三九藥業(yè)有限公司）、氨基比林注射液（2ml/支）、生理鹽水，液體石蠟，苦味酸 [動(dòng)物] 家兔 [方法] 1. 取健康家兔4只，稱重后用苦味酸標(biāo)記，隨機(jī)分為4組，每組1只，兔架上固定。2. 分別測(cè)肛溫2次，以均值作為正常體溫3. 甲、乙、丙3只家兔耳緣靜脈注射傷寒、～，每隔30min測(cè)體溫一次。待體溫升高超過(guò)1℃后，分別按步驟4安排給藥。 4. 甲組兔（發(fā)熱兔）：耳緣靜脈注射生理鹽水2ml/kg乙組兔（發(fā)熱兔）：耳緣靜脈注射魚腥草注射液2ml/kg丙組兔（發(fā)熱兔）：耳緣靜脈注射氨基比林注射液60mg/kg丁組兔（未發(fā)熱兔）：耳緣靜脈注射魚腥草注射液2ml/kg5. 給藥后60、90、120min分別測(cè)試肛溫一次。結(jié)果記入表1。表1 柴胡對(duì)家兔體溫的影響(177。SD)組別N(只)正常（℃）致熱后1h給藥后不同時(shí)間點(diǎn)家兔的體溫（℃）306090120甲組1乙組1丙組1丁組1[注意]1. 家兔健康，雌性未孕，體溫正常（～℃）。2. 每次測(cè)肛溫前測(cè)溫計(jì)前部涂少量液體石蠟，測(cè)溫時(shí)操作盡量輕柔。3. 測(cè)溫計(jì)前部3～，保證每次測(cè)肛溫的位置盡可能恒定。4. 使用測(cè)溫計(jì)時(shí)先按下開(kāi)關(guān)，插入肛門深處。當(dāng)顯示器上的“℃”標(biāo)志停止閃爍時(shí)（1min左右）取出。記錄體溫后關(guān)閉開(kāi)關(guān)。注意勿使任何液體接觸顯示器和開(kāi)關(guān)等部位，防治損壞。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后用中性洗滌劑浸過(guò)的抹布拭凈感溫探頭。待溫度計(jì)干燥后在放回盒內(nèi)保存。5. ℃以下。三連菌苗用量不要過(guò)大（）；冬季時(shí)三連菌苗用量不宜過(guò)?。ā缁靹蚝蟛拍苁褂?，否則均會(huì)影響升溫。[思考]1. 根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果，試分析魚腥草解熱作用的特點(diǎn)？試分析其解熱的作用機(jī)理？2. 解表藥和清熱藥解熱各有什么特點(diǎn)，為什么？3. 魚腥草與氨基比林解熱有何異同？第五章 瀉下藥凡能引起腹瀉或滑利大腸，促進(jìn)排便的藥物稱瀉下藥。祖國(guó)醫(yī)學(xué)根據(jù)其作用和應(yīng)用范圍的不同，可分為瀉下藥、攻下藥和峻下逐水藥三類?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)按瀉下作用機(jī)理，將它們分為刺激性瀉藥、容積性瀉藥(機(jī)械刺激性瀉藥)和滑潤(rùn)性瀉藥。瀉下藥主要研究藥物的功效和導(dǎo)瀉機(jī)理(作用方式)以及致瀉作用成份，同時(shí)也應(yīng)研究其毒性反應(yīng)。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，多采用小鼠，大鼠，亦可采用家兔或豚鼠。一般不宜用貓和狗，因貓易發(fā)生嘔吐，狗對(duì)瀉藥反應(yīng)遲鈍。瀉下藥研究方法主要有以下幾方面，可根據(jù)需要選用。瀉下藥主要藥理作用為瀉下、利尿、抗感染等。其研究方法主要有以下幾方面：（一）腸管運(yùn)動(dòng)在體實(shí)驗(yàn)法 觀察瀉下藥對(duì)動(dòng)物排便活動(dòng)的影響。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：多用小動(dòng)物（尤其以小鼠為常用）。指示劑：炭末或墨汁。用含有指示劑的瀉下藥給動(dòng)物灌服，觀察瀉下藥起效時(shí)間（即排出含指示劑糞便的時(shí)間），糞便性狀，排便數(shù)量，并與對(duì)照組相互比較，判斷瀉下藥的藥效。 以色素為標(biāo)志，用含有色素（炭末或墨汁）的瀉下藥給動(dòng)物灌服或結(jié)腸給藥，觀察色素在腸道推進(jìn)的距離，反映瀉下藥對(duì)腸道運(yùn)動(dòng)的影響判斷其對(duì)小腸和大腸的作用。常用方法有：小腸推進(jìn)實(shí)驗(yàn)、大腸推進(jìn)實(shí)驗(yàn)和酚紅排空定量測(cè)定實(shí)驗(yàn)。，觀察瀉下藥對(duì)其運(yùn)動(dòng)的影響。通常有腸管懸吊法、腸內(nèi)壓測(cè)定法、壓敏傳感器貼壁法和腸生物電測(cè)定法。（二）腸管運(yùn)動(dòng)離體實(shí)驗(yàn)法（離體腸管法） 記錄腸平滑肌活動(dòng)情況，觀察瀉下藥對(duì)腸肌的作用。實(shí)驗(yàn)常采用豚鼠、大鼠、家兔的離體腸管作材料，其中，十二指腸興奮性、自律性較高，對(duì)藥物反應(yīng)比較敏感；回腸（特別是豚鼠回腸）自發(fā)活動(dòng)少，易獲得穩(wěn)定的基線。 此外，瀉下方藥攻里通下，在臨床上有多方面應(yīng)用，特別對(duì)于急腹癥的治療，如急性腸梗阻、急性梗阻性膽管炎、急性闌尾炎、急性胰腺炎等，只要用藥得當(dāng)，每獲療效。提示攻下方藥不僅可明顯增強(qiáng)腸蠕動(dòng)，還可以改善腸缺血、抗病原微生物、抗炎解熱等，可進(jìn)一步加強(qiáng)其機(jī)理研究，更好地應(yīng)用于臨床治療。 生大黃、制大黃和大承氣湯對(duì)小白鼠排便時(shí)間和數(shù)量的影響（炭末法）[目的] 觀察生大黃、制大黃和大承氣湯對(duì)小鼠腸道炭末推進(jìn)時(shí)間、數(shù)量的影響。[原理] 中藥不同制劑和配伍，其作用往往有不同。生大黃可使腸蠕動(dòng)加速，糞便排出快，成形差；制大黃因其致瀉成分分解破壞，作用較弱，因而糞便排出慢、少而成形；大承氣湯所含芒硝軟堅(jiān)潤(rùn)燥，枳實(shí)、厚樸行氣散結(jié)，有助硝、黃加速積滯排泄之功效。運(yùn)用色素流動(dòng)法，以黑色炭末為指示劑，以排黑糞時(shí)間，糞便性狀和數(shù)量為指標(biāo)，即可直接反應(yīng)不同大黃制劑和復(fù)發(fā)瀉下作用的強(qiáng)弱。[器材]小鼠灌胃針頭，1ml注射器、鐘罩，濾紙，鼠籠，臺(tái)秤、棉簽、記時(shí)鐘、鑷子。[藥品]生大黃水煎液1g/ml()， 制大黃水煎液1g/ml(，大承氣湯水初煎液1g/ml()，苦味酸。[動(dòng)物]小自鼠。[方法] 取禁食20h體重相近的小白鼠12只(腹瀉者剔去)， 隨機(jī)分成4組．沒(méi)組3只，苦味酸標(biāo)記。各鼠分置于鋪有濾紙的鐘罩內(nèi)進(jìn)行觀察，記錄小鼠排黑便的時(shí)間、性狀和數(shù)目，以及糞便沾染肛門情況。連續(xù)觀察6~8h，每組3只小白鼠取平均值，然后綜臺(tái)全實(shí)驗(yàn)室結(jié)果，進(jìn)行比較。[結(jié)果]按結(jié)果記錄分析并填表。表 生大黃、制大黃和大承氣湯對(duì)小白鼠排便時(shí)間和數(shù)量的影響（X177。SD）組別動(dòng)物數(shù)（只）劑量（g/kg）開(kāi)始排黑便時(shí)間（min）6小時(shí)內(nèi)排黑便數(shù)黑便性狀生理鹽水生大黃制大黃大承氣湯[注意] （1）吸藥液前，應(yīng)將藥液搖勻，以保證藥量及炭末量準(zhǔn)確。（2）排黑便的計(jì)數(shù)和計(jì)時(shí)，以開(kāi)始排出黑便為準(zhǔn)。（3）計(jì)數(shù)黑便時(shí)，應(yīng)隨時(shí)將小鼠排出的已計(jì)數(shù)的黑便清除，以免影響記數(shù)的準(zhǔn)確性。 （4）實(shí)驗(yàn)小鼠在禁食與實(shí)驗(yàn)過(guò)程中應(yīng)讓其飲水，否則影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。[附] （1）生大黃制劑的制備：取生大黃100g，砸成小塊后，以水浸沒(méi)。冷浸24h后．過(guò)濾，40℃水浴濃縮至1g/ml。（2）制大黃制劑的制備：取制大黃l00g，過(guò)濾，藥液水浴濃縮至1g/ml。（3）大承氣湯制劑的制備：取枳實(shí)30g、厚樸30g，加水煎沸30min后，加入大黃24g，再煎沸10~15min，過(guò)濾，棄渣。濾液溶人芒硝18g，微沸，40℃水浴濃縮至102mI，即坨1g/ml。[思考題] （1）為何不同制劑的大黃使小鼠排便時(shí)間和排便數(shù)不同？臨床應(yīng)用大黃致瀉應(yīng)注意什么？（2）比較大黃和大承氣湯的瀉下作用，并解釋導(dǎo)致的結(jié)果。 生大黃、制大黃以及大黃、芒硝配伍對(duì)小白鼠小腸運(yùn)動(dòng)的影響（炭末法）[目的]了解生大黃、制大黃對(duì)腸蠕動(dòng)的影響以及大黃與芒硝配伍的藥理意義。[原理] 利用黑色炭末作為指示劑，觀察炭末在腸道的推進(jìn)距離?？诜簏S可刺激腸蠕動(dòng)加速，有瀉下作用，故對(duì)胃腸實(shí)熱有“釜底抽薪”之功。大黃久煎或炮制之后，致瀉成份分解，作用減弱，而芒硝在腸內(nèi)不易被吸收，使腸內(nèi)滲透壓升高，大量水分保留在腸腔，機(jī)械性刺激腸壁而致瀉。故生大黃與芒硝配伍有“增水行舟，潤(rùn)燥軟堅(jiān)”之功效，致瀉作用增強(qiáng)。[器材] 手術(shù)剪、眼科鑷、直尺、注射器、灌胃針頭、天平，燒杯．搪瓷盤或蛙板。[藥品] （炭末為活性炭），生大黃水煎液1g/ml()， 制大黃水煎液1g/ml(，生大黃水煎液加芒硝（生大黃1g/ml++)，苦味酸。[動(dòng)物] 小白鼠。[方法]取禁食20~24h成年、體重相近的12只小白鼠，隨機(jī)分為4組，每組3只，用苦味酸標(biāo)記。給藥30min后脫頸椎處死，打開(kāi)腹腔分離腸系膜，剪取上端至幽門，下端至回盲部的腸管，置于托盤上。輕輕將小腸拉成直線，測(cè)量腸管長(zhǎng)度作為“小腸總長(zhǎng)度”。從幽門至炭末前沿的距離作為“炭末在腸內(nèi)推進(jìn)距離”。取各組3只小自鼠平均值，用公式汁算炭末推進(jìn)百分率，并注意觀察各組小腸容積是否增大。 炭末在腸內(nèi)推進(jìn)距離（cm）炭末推進(jìn)率= 100% 小腸全長(zhǎng)（cm）[結(jié)果]按結(jié)果記錄分析并填表。表 生大黃、制大黃及大黃加芒硝對(duì)小白鼠腸蠕動(dòng)的影響（X177。SD）組別動(dòng)物數(shù)（只）劑量（g/kg）小腸總長(zhǎng)度（cm）炭末推進(jìn)距離（cm）炭末推進(jìn)l率（%）腸容積變化生理鹽水生大黃制大黃生大黃加芒硝[注意]（1）開(kāi)始給藥至處死動(dòng)物的時(shí)間必須準(zhǔn)確，以免時(shí)間不同造成實(shí)驗(yàn)誤差。（2）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體重越接近越好，平均體重最好用23~25g小鼠，腸管比較粗大，易于操作。（3）腸容積變化可以上下端接扎，稱取重量，以定量化。[思考題] （1）大黃致瀉的主要成分及作用機(jī)理是什么？（2）大黃加芒硝為何致瀉作用增強(qiáng)？有哪些主要方劑有大黃與芒硝配伍使用？第六章 祛風(fēng)濕藥?kù)铒L(fēng)濕藥是一類能祛除風(fēng)濕、解除痹痛的藥物。傳統(tǒng)常用的祛風(fēng)濕藥有秦艽、清風(fēng)藤、漢防己、獨(dú)活、五加皮、木瓜、雷公藤等以及它們所組成的各種復(fù)方?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究結(jié)果證明，這類藥物多具有抗炎、鎮(zhèn)痛、免疫調(diào)節(jié)作用，尚有鎮(zhèn)靜、降壓、抗過(guò)敏及抗菌等作用。在研究祛風(fēng)濕藥時(shí)，一般從抗炎、鎮(zhèn)痛、免疫調(diào)節(jié)、抗過(guò)敏等方面設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)指標(biāo)，并結(jié)合藥物的具體功效和臨床應(yīng)用選擇其他項(xiàng)目和指標(biāo)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。常用的實(shí)驗(yàn)方法如下：1．非特異性炎癥模型 包括急性和亞急性時(shí)相的實(shí)驗(yàn)和增殖時(shí)相的實(shí)驗(yàn)。（1） 急性和亞急性時(shí)相實(shí)驗(yàn)：常用毛細(xì)血管通透性測(cè)定、鼠耳腫脹法、大鼠足腫脹法、胸膜炎試驗(yàn)及大鼠氣囊滑膜炎等炎癥模型，觀察藥物對(duì)炎癥反應(yīng)中血管通透性增高、炎性滲出、腫脹、白細(xì)胞游走聚集的作用。（2） 增殖相的實(shí)驗(yàn)：