【正文】 長(zhǎng)毛在PDA培養(yǎng)基上（反面）生長(zhǎng)情況 長(zhǎng)毛在PDA培養(yǎng)基上（正面）生長(zhǎng)情況 長(zhǎng)毛在PDA培養(yǎng)基上（反面）生長(zhǎng)情況(5)江短毛：在PDA瓊脂培養(yǎng)基上28℃培養(yǎng)，菌落顯白色，菌絲較短，光滑，背面顯紅色。, , 。 江短毛菌株在顯微鏡中的形態(tài)：在400倍電子顯微鏡下觀察所得 短毛霉在PDA培養(yǎng)基上（反面）生長(zhǎng)情況 短毛霉在PDA培養(yǎng)基上（正面）生長(zhǎng)情況(6)江白：在PDA瓊脂培養(yǎng)基上28℃培養(yǎng)，菌落一直為白色，石膏樣，后期中間顯示一圈一圈的黑色，無毛，光滑，背面為白色。菌落呈平面擴(kuò)散，生長(zhǎng)快，扁平，乳白色，短絨狀或近于粉狀，有同心圈可放 射線，中心突起。在液體培養(yǎng)時(shí)生白醭，毛絨狀。在葡萄糖、甘露糖、果糖上能微弱發(fā)酵，能分解果膠。據(jù)此鑒定為白地霉。：在400倍電子顯微鏡下觀察所得 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 通過配制一系列不同濃度的葡萄糖溶液，利用DNS法分別對(duì)它們?cè)?40nm下進(jìn)行了吸光度測(cè)量，： 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線其中葡萄糖量由公式y(tǒng) = = y/，x即為葡萄糖量，單位mg/ml。 各菌的酶活力測(cè)定結(jié)果 ： 菌株的CMC酶活（CMC培養(yǎng)基）測(cè)定結(jié)果菌株紙綠江白江土江長(zhǎng)毛江短毛瘤黑吸光度酶活（U）50吸光度酶活（U） 菌株的FPA酶活（CMC培養(yǎng)基）測(cè)定結(jié)果菌株紙綠江白江土江長(zhǎng)毛江短毛瘤黑吸光度 酶活（U）吸光度酶活（U） 菌株的FPA酶活（FPA培養(yǎng)基）測(cè)定結(jié)果菌株紙綠江白江土江長(zhǎng)毛江短毛瘤黑吸光度 酶活（U）吸光度酶活（U）各菌的酶活性和各個(gè)菌株的產(chǎn)酶能力有一定的差異，說明各個(gè)菌株間的產(chǎn)酶能力有顯著性差異。在CMC培養(yǎng)基中，紙綠這種菌株產(chǎn)酶能力最強(qiáng)，江白菌株產(chǎn)酶能力次之，最弱的是瘤黑。又在實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，紙綠的總量遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于江白，所以后者的產(chǎn)酶能力實(shí)際上更強(qiáng)。在FPA培養(yǎng)基中，所有菌株的產(chǎn)酶能力差距不是十分明顯，但總的來說江白的產(chǎn)酶能力依然最強(qiáng)。但是是什么原因影響了在FPA培養(yǎng)基中培養(yǎng)的菌株的產(chǎn)酶能力還有待研究。 菌株的生理生化特征 明膠液化，淀粉水解，硝酸還原，硫化氫產(chǎn)生菌株紙綠江白江土江長(zhǎng)毛江短毛瘤黑明膠液化是是是是 是是淀粉水解否否否是是是硝酸還原是是是是是是硫化氫產(chǎn)生是否否是否否 碳源利用菌株紙綠江白江土江長(zhǎng)毛江短毛瘤黑葡萄糖是是是是是是蔗糖是是是是是是木糖是否是是是是D甘露糖是是否是是否L肌醇否否是是是否L阿拉伯糖是否是是是是鼠李糖是否是是是是 討論 (1)通過生理生化實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)江長(zhǎng)毛，江短毛可以利用所有的碳源，紙綠不可以利用L肌醇；江土不能利用D甘露醇；瘤黑不能利用D甘露醇，L肌醇；江白僅能利用葡萄糖，蔗糖，D甘露醇。篩選所得菌株都可以使明膠液化，使硝酸還原，其中江短毛還原能力最強(qiáng)；江長(zhǎng)毛，江短毛，以及瘤黑可以水解淀粉；江長(zhǎng)毛可以產(chǎn)生硫化氫，兩管紙綠試管中有一管能產(chǎn)生硫化氫，另一管沒有現(xiàn)象。(2)由于幾乎所有的真菌類鑒定均采用18rsDNA鑒定，僅僅利用形態(tài)學(xué)以及生理生化鑒定的文獻(xiàn)少之又少，這個(gè)鑒定帶來了很大的困難。鑒于此，本文僅僅鑒別出了深綠木霉，白地霉，黑曲霉。其他三種尚且不能做出鑒定。4 結(jié)論(1)利用初篩培養(yǎng)基CMC培養(yǎng)基，從土壤中分離到6株降解纖維素真菌，且都具有較強(qiáng)的纖維素降解能力。(2)通過本實(shí)驗(yàn)的研究發(fā)現(xiàn)初篩不需要稀釋后再純化接種，可以直接稀釋后直接劃線接種于培養(yǎng)基上，且長(zhǎng)勢(shì)良好。(3)通過發(fā)酵培養(yǎng)和纖維素CMC酶活以及FPA酶活測(cè)定，江白（即白地霉）產(chǎn)酶能力最強(qiáng)，在CMC培養(yǎng)條件下達(dá)到40U,。(4)由于瘤胃中篩得的菌株應(yīng)該是厭氧菌，而不應(yīng)該是好氧的黑曲霉，所以可能是意外所得。參考文獻(xiàn)[1] 、鑒定及其生長(zhǎng)條件和產(chǎn)酶活性的研究[D].山東農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文, 2009.[2] 韓立榮，張雙璽，祝傳書，[J]. 西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版),2008,0~174.[3] 汪金萍,徐爾尼,[J].食品科技,2007(2)：73~76.[4] Wang J P, Xu E N, Shi L K，et a1．Study on the method of increasing cellulose production[J]．Food Science and Technology, 2007(2): 7376．(in Chinese)[5] [D].,5~8.[6] Woodward J,M．Lirna39。M,Lee, . 1988, 255: 898899.[7] 張樹政主編，酶制劑工業(yè)，科學(xué)出版社，北京,1984.[8] M．P．Coughlan著，[J]. 國(guó)外畜牧科學(xué), 1991, 18(6), 2831.[9] 袁勤生現(xiàn)代酶學(xué), 第一版. 上海：華東理工大學(xué)出版社, 2001.[10] 張壯志. 高效纖維素分解菌的篩選、鑒定及其生長(zhǎng)條件和產(chǎn)酶活性的研究[D]. 山東農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文, 2009, 7~13[11] Toyama H. Construction of cellulase hype producers of Trichoderma reesei Rut C30 for utilization of waste paper using colchicines and buxomly[J]．Journal of Molecular Catalysis B: Enzymic, 2002, 17(3/5): 175~178.[12] 韓峰，孫彩云，宋小焱．?dāng)M康氏木霉UVIII纖維素酶合成的誘導(dǎo)與阻遏[J]. 工業(yè)微生物, 2003, 33(1): 23~26.[13] PRABAVATHY V R,MATHIVANAN N, SAGADEVAN E．Intra strain protoplasfusion enhances carboxymethyl cellulase activity in Trichoderma reesei[J]. Enzyme and Microbial Technology,2006, 38(5)：719—723．[14] 張壯志. 高效纖維素分解菌的篩選、鑒定及其生長(zhǎng)條件和產(chǎn)酶活性的研究[D]. 山東農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文, 2009.[15] 高倫江, 董全, 唐春紅. 纖維素酶的研究進(jìn)展及前景展望[J]. 江蘇食品與發(fā)酵, 2007(4): 6~9.[16] 崔宗均, 李美丹, 樸哲, 黃志勇. 一組高效穩(wěn)定纖維素分解菌復(fù)合系MCI的篩選及功能[J].環(huán)境科學(xué)，2002, 23(3)：36~139. [17] 韓紹印, 席宇, 翁海波, 朱大恒, 高建民, 楊德梁等. 一株高環(huán)境適應(yīng)性纖維素降解菌的篩選及鑒定[J]. 河南農(nóng)業(yè)科學(xué), 2007(12): 51~54[18] 張紀(jì)中主編. 微生物分類學(xué)[M]. 上海, 復(fù)旦大學(xué)出版社, 1990 [19] 文成敬, 陶家鳳, 陳文瑞. 中國(guó)西南地區(qū)木霉屬分類研究[N].真菌學(xué)報(bào), 12(2): 118~130,1993.致 謝本文從選題的確定，論文的寫作、修改到最后定稿得到了我最敬愛的老師楊忠華老師的悉心指導(dǎo)。授人以魚不如授人以漁，置身其間，耳濡目染，潛移默化，使我深深地收到了熏陶和感染，楊忠華老師嚴(yán)謹(jǐn)?shù)闹螌W(xué)態(tài)度和精益求精的工作作風(fēng)深深地感染和激勵(lì)著我。楊忠華老師對(duì)我們的嚴(yán)格要求體現(xiàn)了他作為一名老師的高度責(zé)任心，同時(shí)也使我深深受益，在實(shí)驗(yàn)室每天的簽到工作使我慢慢改掉了以前的惰性，剛開始時(shí)我偶爾遲到，可后來幾乎沒有遲到過，讓我有了更強(qiáng)的時(shí)間觀念。每周的例會(huì)讓我學(xué)會(huì)了總結(jié)和獨(dú)立思考。在楊忠華老師的諄諄教導(dǎo)下，通過這次本科畢業(yè)實(shí)驗(yàn)，我的學(xué)習(xí)和生活態(tài)度有了很大的轉(zhuǎn)變，我的理論知識(shí)和實(shí)驗(yàn)操作能力都有了很大的提升，這將對(duì)自己以后的學(xué)習(xí)和生活大有裨益。在此，謹(jǐn)向楊忠華老師致以誠摯的謝意和崇高的敬意！感謝趙燕師姐，以及楊芳芳師姐，蘿莉師姐，和常煦師兄，在實(shí)驗(yàn)室的時(shí)候，他們總是友好耐心地為我講解一些疑難問題，給了我很大的幫助。特別要感謝趙燕師姐，從查文獻(xiàn)，開題到做實(shí)驗(yàn)，從修改翻譯到寫論文她都給了我巨大的幫助，而我不辜負(fù)她的希望最終順利的完成了任務(wù)。在此對(duì)他們的善心幫助表示誠摯的謝意！感謝我的爸爸媽媽，感謝他們對(duì)我的無私奉獻(xiàn)和深切的關(guān)心，沒有他們對(duì)我學(xué)業(yè)的支持和為人處事的教育，就沒有今天的我，在這兒請(qǐng)讓我說一句，爸媽你們辛苦了！你們永遠(yuǎn)的健康和快樂是我最大的心愿！此外，還要感謝在大學(xué)四年中幫助過我的人，同時(shí)也感謝學(xué)院為我提供良好的做畢業(yè)論文的環(huán)境。同時(shí),也要感謝在論文寫作過程中，幫助過我、并且共同奮斗四年的大學(xué)同學(xué)們，能夠順利完成論文，是因?yàn)橐宦飞嫌心銈兊膸椭俅沃孕牡馗兄x所有在我論文寫作過程中給予過我?guī)椭娜藗?，謝謝你們