【導(dǎo)讀】為確保檢驗(yàn)科、輸血科員工熟悉生物安全法律、法規(guī)，建立生物安全意識(shí)，故，特制定此手冊(cè)。對(duì)本院操作生物因子的生物危險(xiǎn)程度評(píng)估，審查和批準(zhǔn)開展的實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目。審查操作程序，監(jiān)督和檢查有關(guān)法規(guī)和操作規(guī)程的執(zhí)行。審查突發(fā)事故應(yīng)急預(yù)案，對(duì)事故進(jìn)行評(píng)估，提出處理和改進(jìn)意見(jiàn)。對(duì)人員實(shí)施義務(wù)監(jiān)督等。負(fù)責(zé)人為生物安全的第一責(zé)任人，負(fù)責(zé)日?；顒?dòng)的生物安全管理。全面負(fù)責(zé)科內(nèi)生物安全管理文件的制定。督促、檢查各個(gè)專業(yè)組遵守、落實(shí)生物安全情況。設(shè)立生物安全監(jiān)督員二名。全面?zhèn)鬟_(dá)相關(guān)會(huì)議內(nèi)容，在本組內(nèi)要達(dá)到知曉率100%。全，確保檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確可靠。適用于生物安全二級(jí)實(shí)驗(yàn)室安全運(yùn)轉(zhuǎn)及在此環(huán)境下的所有檢測(cè)工作。經(jīng)許可禁止進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室。生的各項(xiàng)結(jié)果和數(shù)據(jù)，必須準(zhǔn)確可靠；實(shí)驗(yàn)室出具的檢驗(yàn)報(bào)告，必須明確完整。材料飛濺的操作時(shí)，需加戴防護(hù)面罩。嚴(yán)格按照試劑使用說(shuō)明進(jìn)行操作。確保不含感染性的實(shí)驗(yàn)材料，才可以從實(shí)驗(yàn)室攜出。

　　

【正文】 (燃點(diǎn)高于 38℃ 低于 60℃ )可分為以下幾個(gè)級(jí)別 : IIIA 級(jí) ： 燃點(diǎn)高于 60℃低于 94℃。 HIH 級(jí) ： 燃點(diǎn)高于 94℃。 易爆化學(xué)物品 :易爆化學(xué)物品是指能迅速發(fā) 生劇烈化學(xué)變化的不穩(wěn)定物質(zhì)。爆炸性分解可在正常溫度和壓力下發(fā)生， 例如 :肪 。 材料安全數(shù) 據(jù)表及標(biāo)簽購(gòu)進(jìn)可能有危害的化學(xué)物品都必須附有材料安全數(shù)據(jù)表。所有危險(xiǎn)化學(xué)品都需要以易于識(shí)別的形式進(jìn)行標(biāo)記，使專業(yè)和非專業(yè)人員很容易警覺(jué)其潛在的危險(xiǎn)性。標(biāo)記可以是文字、圖標(biāo)、標(biāo)準(zhǔn)化代碼或多種形式并存 。 化學(xué)危險(xiǎn)物的管理與使用 腐蝕品應(yīng)在近離地面處儲(chǔ)存以減小掉下的危險(xiǎn)。 搬運(yùn)體積超過(guò) 500l 的濃酸試劑時(shí)，必須用推車運(yùn)載。 嚴(yán)禁氧化劑與易燃劑存放在一起。腐蝕性化學(xué)品耍單獨(dú)存放。例如 :乙酸或乙酸配等有機(jī)酸應(yīng)與硫酸、硝酸或高氯酸等強(qiáng)氧化劑分開儲(chǔ)存 。 個(gè)人防護(hù)裝備 ： 在使用腐蝕性物品場(chǎng)所的工作 人員，應(yīng)該穿戴圍裙、手套和其它個(gè)人防護(hù)裝備。 急救設(shè)備 ： 使用腐蝕性物品的場(chǎng)所，應(yīng)設(shè)有合適的急救沐浴設(shè)施和洗眼裝置 。 化學(xué)通風(fēng)櫥 ： 所有揮發(fā)性腐蝕物品的操作，都必須在化學(xué)通風(fēng)櫥中進(jìn)行。 易燃易爆液體應(yīng)在合格的容器里儲(chǔ)存。分裝時(shí)應(yīng)有明確的易燃和可燃性標(biāo) 記，工作儲(chǔ)備量控制在最低限度。 易嫩或可嫩性液體的儲(chǔ)量超過(guò) 1000 升，至少應(yīng)有 1 間專用儲(chǔ)藏室 。 儲(chǔ)存可燃性液體的倉(cāng)庫(kù)應(yīng)遠(yuǎn)離明火和其它熱源 。 可燃性液體如需要在冰箱內(nèi)存放，該冰箱的設(shè)計(jì)必須符合避免產(chǎn)生蒸汽燃燒的要求。所有的冰箱門都 應(yīng)標(biāo)明可否用于存放易燃、可燃性液體 。 污染物的清除和處理 每個(gè)都應(yīng)負(fù)責(zé)日常的清污工作。在結(jié)束常規(guī)工作時(shí)、工作交班、發(fā)生緊急事件如清除濺溢物后，都需要進(jìn)行清污工作。需外送維修的設(shè)備，只有在管理人員確認(rèn)沒(méi)有化學(xué)危險(xiǎn)物品污染時(shí)，才能外送維修。 廢棄化學(xué)物品 ： 所有廢棄化學(xué)物品都應(yīng)接危險(xiǎn)物品處理，除非能夠確定它們的性質(zhì)。清潔濺溢有害物質(zhì)的所用材料，包括吸附物和中和物，都被認(rèn)為是有害廢棄物。 專職人員 ： 應(yīng)指定專人協(xié)調(diào)和負(fù)責(zé)處理有害化學(xué)廢棄物，并將其放置在指定的廢棄物堆放場(chǎng)所。 容器 ： 化學(xué)廢棄 物應(yīng)放置在密閉、有蓋的容器中 。 標(biāo)簽 ： 化學(xué)廢棄物的 包裝應(yīng)有標(biāo)簽，標(biāo)簽應(yīng)包含以下內(nèi)容 ： 日期 、 來(lái)源 、 成份 、 物理性質(zhì) (氣體、液體等 )、 體積 、 危險(xiǎn)性 (易燃或易爆 )。 八、 微生物安全準(zhǔn)則 在臨床檢驗(yàn)工作人員在接觸標(biāo)本和操作過(guò)程中，可能被感染。臨床檢驗(yàn)可能接觸的微生物可分為三類 :1 病毒，如 ： 病毒性肝炎，特別 是乙型及丙型肝炎和獲得性免疫缺陷綜合癥 (AIDS)； 2 細(xì)菌，包括 ： 細(xì)菌、分枝桿菌、真菌 ； 3 其他具有高毒力的病原體，如出血熱病毒和立克次體 。 因?yàn)閺牟∈泛腕w檢不能可靠地鑒定所有病人的病原體，所以當(dāng)接觸和處理所有的 體液時(shí)，均應(yīng)執(zhí)行 標(biāo)準(zhǔn)預(yù)防措施 。 感染途徑 空氣傳播 ： 在取下裝有標(biāo)本試管的塞子時(shí)、溶液灑落在堅(jiān)硬的表面上、用未加塞子的試管進(jìn)行離心或溶液 (包括接種環(huán)內(nèi)的溶液 )加熱太急時(shí)，具有傳染性的溶液在上述各種情況下，可能形成氣煙霧散布在空氣中 。 經(jīng)口傳播 ： 用口吸移液可能導(dǎo)致微生物入人體引起傳染。傳染也可通過(guò)間接途徑，如飲食或吸煙前沒(méi)有徹底洗手引起“手一口”傳染 。 直接接種 ： 偶然的針刺、碎玻璃劃傷和動(dòng)物咬傷均可通過(guò)直接接種引起傳染。臨床標(biāo)本中的感染源也可通過(guò)被輕微劃傷的手指、很輕的擦傷或損傷的表皮進(jìn)入人體造成感染 . 粘膜接觸 ： 一些病原體，包括肝炎病毒和人類免疫缺陷病毒，能夠通過(guò)與粘膜 (如眼結(jié)膜 )的直接接觸進(jìn)入人體，所以在擦拭眼睛、更換隱形眼鏡或使用化妝品前應(yīng)徹底洗手。 標(biāo)準(zhǔn)預(yù)防措施 來(lái)自所有病人的血液和體液都被認(rèn)為是具有傳染性的。所有血液和體液的標(biāo)本都應(yīng)放置于具有安全蓋的結(jié)構(gòu)優(yōu)良的專用容器里，以防在運(yùn)輸過(guò)程中發(fā)生泄漏。采集標(biāo)本時(shí)應(yīng)防止污染容器的外表或隨標(biāo)本的檢驗(yàn)單。如果存在潛在的或?qū)嶋H的污染，則應(yīng)再加一層包裝 (例如 ： 包裝袋 )。 所有處理血液和體液 (例如 ： 取下真空試管的塞子 )的工作人 員都應(yīng)戴上手套。如果有可能發(fā)生血液或體液的噴濺，則應(yīng)使用面部防護(hù)裝備 。 對(duì)于組織學(xué)和病理學(xué)檢查、微生物培養(yǎng)之類的常規(guī)操作，并不需要在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行。但是，如果操作過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生氣煙霧或飛沫，則應(yīng)使用生物安全柜，這些操作包括混勻、超聲霧化和劇烈攪拌。 應(yīng)使用機(jī)械移液裝置 .絕對(duì)禁止用口吸移液。 使用注射器和針具時(shí)應(yīng)防止受傷。禁止用手將針套重新套在針頭上、禁止故意將針頭彎曲或折斷、將針頭從一次性注射器上取下、或?qū)︶橆^進(jìn)行其它操作。所有銳利物品在使用后都應(yīng)放入專用銳器盒內(nèi)，然后運(yùn)至處理場(chǎng)所。廢棄銳 利物品的容器應(yīng)就近放在便于操作的地方。應(yīng)在未完全裝滿前或 48 小時(shí)之內(nèi)及時(shí)更換 。 血液或其他體液發(fā)生泄漏或工作結(jié)束后，均應(yīng)使用合適的化學(xué)殺菌劑對(duì)工作區(qū)進(jìn)行表面消毒，可使用 2: 100 84消毒液消毒。 實(shí)驗(yàn)中用過(guò)的污染物品在重復(fù)使用前或裝入容器中按傳染性廢棄物進(jìn)行處理前，應(yīng)先進(jìn)行去污處理。 被血液或其他體液污染的設(shè)備在內(nèi)或外送商家進(jìn)行維修之前，應(yīng)先進(jìn)行清潔 和消毒。無(wú)法徹底消毒的設(shè)備必須貼上生物危害的標(biāo)簽 。 手或其他部位的皮膚在接觸血液或其他體液后必須立即徹底清洗。在實(shí)驗(yàn)工作結(jié)束后或 取下手套后應(yīng)立即洗手。在離開之前應(yīng)脫下所有的個(gè)人防護(hù)裝備 。 如果檢驗(yàn)人員工作時(shí)有可能接觸到血液、其它可能具傳染性的物質(zhì)、病人的粘膜或要損傷的皮膚、或在處理污染的物品或表面時(shí)，都應(yīng)戴上手套。在進(jìn)行血管穿刺時(shí)，包括靜脈采血、手指或腳背穿刺，也應(yīng)戴上手套。如果手套破損、刺破、或失去其屏障功能，則應(yīng)盡快更換。清洗或消毒會(huì)損害一次性手套的質(zhì)量，故不得重復(fù)使用一次性手套，在接觸病員后應(yīng)更換手套 。 工作區(qū)應(yīng)使用吸收性強(qiáng)的紙張覆蓋。在移液、混合、振蕩、攪拌或離心時(shí)，必須防止發(fā)生氣煙霧。 患有滲出性病 變或濕疹的醫(yī)務(wù)人員在痊愈前不得直接接觸病人，也不得接觸醫(yī)療設(shè)備 。 九、消毒及廢棄物處理制度 醫(yī)務(wù)人員要求 工作人員應(yīng)穿戴整潔，工作服一般每周更換 2 次 。 實(shí)驗(yàn)室接觸標(biāo)本均為可疑污染物，操作前均應(yīng)戴好乳膠手套，手套破損要及時(shí)更換，工作后脫手套用手消毒液消毒雙手，用流動(dòng)水洗凈 。 做血常規(guī)檢查的操作者必須做到一人一消毒，消毒液為“杰雪”消毒液、碘酒或酒精 。 離開的工作人員必須脫掉手套 ； 不能穿工作服到外活動(dòng) 。 病人手指消毒 做血常規(guī)檢查應(yīng)選取病人無(wú)紅腫、破損、傷痕的手指部位 。 用 75%酒精消毒針刺部位，干后針刺取血，做到一人一針一消毒一吸管 。 推片不得直接接觸創(chuàng)口皮膚取血。 廢棄物的消毒及處理 廢棄物是指將要丟棄的所有物品。在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)，廢棄物最終的處理方式與其污染被清除的情況緊密相關(guān)。廢棄物處理的首要原則是所有感染性材料必須在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)清除污染、高壓滅菌或焚燒。 醫(yī)用垃圾與生活垃圾嚴(yán)格分開。黑色垃圾袋裝生活垃圾，黃色垃圾袋裝醫(yī)療垃圾 。 裝盛垃圾的垃圾桶應(yīng)用腳踏式，標(biāo)識(shí)清楚。 固體醫(yī)療垃圾套雙層垃圾袋，防止泄露，定時(shí)或在裝滿時(shí)及時(shí)清理，由后勤及時(shí)運(yùn)送 到指定地點(diǎn)，集中焚燒 ； 轉(zhuǎn)運(yùn)時(shí)應(yīng)有防止鋒利物刺破垃圾袋遺灑的防護(hù)措施 。 液體垃圾如病人尿液、胸腹水、嘔吐物按 加漂白粉 5g，充分?jǐn)嚢枳饔?4 小時(shí)后，直接倒入醫(yī)院污水處理系統(tǒng) ： 痰、膿、血、糞便 (包括動(dòng)物糞便 )及其固形標(biāo)本，采取焚燒或加 2 倍量 4: 10084消毒液，拌勻后作用， 4 小時(shí)直接倒入醫(yī)院污水處理系統(tǒng)。 銳利物應(yīng)及時(shí)投入專用銳器盒，在裝滿前或 48 小時(shí)之內(nèi)及時(shí)更換。 一般的化學(xué)廢棄物可直接排入下水道 ； 血球分析儀廢液應(yīng)放入 1: 100 84,消毒液作用 30 分鐘后到入下水道。 重復(fù)使用檢驗(yàn)器材處理 重復(fù)使用檢驗(yàn)器材處理原則 ； 任何需要重復(fù)使用的污染 (有潛在感染性 )材料不應(yīng)事先清洗，任何必要的清洗、修復(fù)必須在高壓滅菌或消毒后進(jìn)行。消毒方法首選高壓蒸汽滅菌，其次為 20203000mg/1 有效氯消毒液浸泡消毒 。 具體處理措施 ： 重復(fù)使用的器材用后應(yīng)浸入含有效氯 10002020mg/1(2:1004:10084)消毒液 4 小時(shí)，再清洗干凈 ； 浸入重絡(luò)酸鉀 (50 克溶于 100 毫升水 )濃硫酸 (1000 毫升 )溶液， 24 小時(shí) 。 取出，蒸餾水沖洗 。 烘干，備用 。 各種物面及地面消毒 各種物表及臺(tái)面每日用 300500mg/1 含氯消毒劑 ((1: 100 84 )擦拭 ： 用紫外線消毒時(shí)，燈管離臺(tái)面不宜超過(guò) 1 米，消毒有效區(qū)域?yàn)闊艄苤車?米，每次時(shí)間不少于 30 分鐘 。 地面用浸有 500mg/1 有效氯消毒液 (1: 100 84)拖把拖地 。 如具有傳染性的標(biāo)本或培養(yǎng)皿 外溢、濺潑或器皿打破灑落于物表或地面，應(yīng) 立即用 2: 100 84消毒液灑于污染表明，并使消毒液浸沒(méi)污染物表明，保持3060 分鐘，拖把用后浸于 2: 100 84”消毒液內(nèi) 1 小時(shí)。 空氣消毒 應(yīng)開窗通風(fēng)，保證持空氣流通、清新 。 空氣消毒用紫外線燈照射，每次時(shí)間均應(yīng)大于 30 分鐘，每天不少于 1 小時(shí) 。 有條件的可采用靜電吸附式空氣凈化器持續(xù)消毒 。 化驗(yàn)單消毒 要保持化驗(yàn)單干凈，避免被檢驗(yàn)材料污染 。 盡可能使用電子報(bào)告單 。 門急診未被污染的化驗(yàn)單，可隨時(shí)發(fā)出。凡有可能被污染的化驗(yàn)單，均須經(jīng)消毒后方可發(fā)出。 消毒液配制 正在使用的消毒液應(yīng)有標(biāo)識(shí) 。 84”消毒劑含有效氯 5%配比 :1: 20 有效氯 一 :100 有效 氯圭。1: 200 有效氯圭 250mW1 消毒管理按照 2020 年修訂的《醫(yī)院工作制度與工作人員職責(zé)》中《消毒隔離制度》相關(guān)要求認(rèn)真執(zhí)行 ； 醫(yī)療垃圾的管理嚴(yán)格按照《 昊江市第一人民醫(yī)院 醫(yī)療廢物管理辦法》的相關(guān)規(guī)定執(zhí)行。 十、實(shí)驗(yàn)活動(dòng)生物安全標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 (一 )艾滋病初篩檢測(cè)實(shí)驗(yàn)操作規(guī)程 目的 保證艾滋病病毒抗體 ELISA 實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性 。 適用范圍 艾滋病病毒抗體 ELISA 實(shí)驗(yàn)。 具體要求 樣品采集 樣品采集安試劑盒要求采集。采血時(shí)注意安全，用一次性注射器謹(jǐn)慎操作，防止發(fā)生刺傷和造 成外界污染。血樣如即時(shí)用可存于普通冰箱，如要長(zhǎng)期保存， 分離血清置于 20℃ 及以下。同時(shí)做好記錄。 樣品運(yùn)送 樣品轉(zhuǎn)送，除特殊需要外，必須是血清或血漿，置于帶有蓋帽的試管內(nèi)，或?qū)⑺芰显嚬苡镁凭珶舴馑?，防止樣品流出。試管上?biāo)明姓名、時(shí)間、編號(hào)，將試管放入專門帶蓋的容器內(nèi)，容器的材料要易于消毒處理，在所放試管周圍上下墊有軟性物質(zhì)，以免碰碎，容器外標(biāo)有 E 四檢測(cè)專用字樣和生物危害標(biāo)志。路途較遠(yuǎn)或氣候炎熱時(shí)，容器應(yīng)置于 4℃ 以下運(yùn)送。這樣同時(shí)附送檢單 。 樣品登記和處理 收到樣品后，及時(shí)填寫標(biāo)本登記記 錄表，送樣人、收樣人簽字，如已進(jìn)行過(guò)初檢，登記初檢結(jié)果和實(shí)驗(yàn)方法及所用試劑情況 。 對(duì)從其他實(shí)驗(yàn)室送來(lái)的樣品，檢查并注明送檢單與標(biāo)本記錄的符合、樣品管破損、溢漏等情況。如有溢漏應(yīng)立即將尚存的血樣移出，并對(duì)管壁和盛器消毒。檢查并記錄樣品的質(zhì)量有無(wú)嚴(yán)重溶血、細(xì)菌污染、血脂過(guò)多以及黃疽等情況 。 對(duì)實(shí)驗(yàn)室自采的樣品，最好將血液先放置 12 個(gè)小時(shí)，再用 3000 轉(zhuǎn) 離心15 分鐘，吸出上清液備用，如在幾天內(nèi)檢測(cè)可放在 28℃ 冰箱中，如要貯存，置于 20℃ 冰箱 。 實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備 將試劑從冰箱中取出 ，按試劑盒要求時(shí)間恢復(fù)室溫 。 檢查并記錄冰箱、溫箱溫度。 按照試劑盒要求準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)原始記錄表，標(biāo)明空白、陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照、外部質(zhì)控血清以及檢測(cè)樣本的位置 ： 登記日期和實(shí)驗(yàn)起止時(shí)間，記錄環(huán)境條件及試劑盒廠家、批號(hào)、效期 ： 整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中每一步操作都要在原始記錄表上詳細(xì)登記 。 按照試劑盒的要求配置洗液及其他所需要的試劑。 加樣和稀釋 根據(jù)樣品數(shù)量將合適數(shù)量的酶標(biāo)板條固定在板架上，為了不損壞洗扳機(jī)，每道上的酶標(biāo)板條必須保持完整 (不足部分可用廢棄的微孔添充 )，檢查加樣器加樣刻度是否與 試劑盒要求的加樣量相符，按照原始記錄表表明的位置加入各種質(zhì)控品和檢測(cè)樣品，注意 ： 空白只加標(biāo)本稀釋液。加樣量和稀釋度嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō) 明書規(guī)定的操作，一般先加樣品稀釋液后再加入樣品。加樣要準(zhǔn)確，小心不要使吸頭碰著酶標(biāo)板空上是包被抗原 。 為保證加樣的準(zhǔn)確，最好使用多孔道加樣器，使用時(shí)注意防止吸頭間的交叉污染。 溫育貼好封板膜，按照試劑盒要求的溫度和時(shí)間進(jìn)行溫育，最好選擇濕育方法 。 洗板 開啟洗板機(jī)前，先檢查洗板機(jī)廢液瓶是否已排空，開啟后先用蒸餾水沖洗管道，再換上洗液瓶。按照試劑盒的耍求，選擇、修改洗扳方 式、洗滌次數(shù)和浸飽時(shí)間根 據(jù)所用酶標(biāo)板的條數(shù)確定洗板道數(shù)，根據(jù)酶標(biāo)板的位置調(diào)節(jié)洗頭的位置，然后開始洗板，洗板結(jié)束后用蒸餾水沖洗管道 。 加酶結(jié)合物對(duì)于二步法 ELISA 實(shí)驗(yàn)需加酶結(jié)合物，按試劑盒要求完成 。 加底物洗好板后應(yīng)立即加底物，需加自配的底物應(yīng)現(xiàn)配現(xiàn)用 。 終止反應(yīng)在規(guī)定的