搖床培養(yǎng)確定酵母菌的培養(yǎng)條件或營養(yǎng)條件-資料下載頁
2025-06-26 19:38本頁面
【正文】 （1）實(shí)驗(yàn)操作由于酵母在液體搖床發(fā)酵培養(yǎng)過程中是以均一性的混濁液狀態(tài)存在的，所以可以利用紫外分光光度計(jì)進(jìn)行直接比色法來測(cè)定其生物量。但是由于實(shí)驗(yàn)室每個(gè)組的營養(yǎng)條件不同，因此培養(yǎng)基的組成也是不相同的。在進(jìn)行紫外分光光度法測(cè)定酵母菌的OD值時(shí)，可以選用離心之后的酵母菌重懸液進(jìn)行測(cè)定。酵母菌的吸光波長(zhǎng)一般為560nm。提示：但所測(cè)得的吸光值大于1時(shí)，需要對(duì)測(cè)量液體進(jìn)行稀釋，然后再進(jìn)行測(cè)定，以保證數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確。選擇離心后的第二組重懸液進(jìn)行OD值的測(cè)定。測(cè)定之前，將菌懸液稀釋2倍，在以蒸餾水為空白組，測(cè)定不同培養(yǎng)條件下酵母菌的OD值。將紫外分光光度法測(cè)定的結(jié)果對(duì)應(yīng)填入下面的表格（表2）中。六、實(shí)驗(yàn)結(jié)果及分析酵母菌計(jì)數(shù)結(jié)果分析（1）實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)處理：血球計(jì)數(shù)板規(guī)格為25格16格。（2）計(jì)算公式:酵母細(xì)胞數(shù)/ml=80小格內(nèi)酵母細(xì)胞個(gè)數(shù)/80400104稀釋倍數(shù)。（3）記錄數(shù)據(jù)：計(jì)數(shù)結(jié)果填入下表（表1）中，并求出各個(gè)處理?xiàng)l件下每毫升酵母菌的濃度（單位：個(gè)/ml），分析酵母菌的最適培養(yǎng)條件和營養(yǎng)條件。表1 計(jì)數(shù)法測(cè)得不同培養(yǎng)條件下酵母菌的數(shù)量統(tǒng)計(jì)表（單位：個(gè)）組別數(shù)據(jù)（1）（2）（3）（4）（5）（6）（7）（8）（9）第一次第二次第三次平均值比濁法結(jié)果分析表2 不同培養(yǎng)條件下酵母菌的OD值組別空白（1） （2）（3）（4）（5）（6）（7）（8）（9）OD值整理數(shù)據(jù)后，以酵母菌的吸光值為指標(biāo)檢測(cè)不同培養(yǎng)條件下酵母菌的生物量，最終分析得出不同因素的最優(yōu)水平，以及最優(yōu)的組合條件。最終分析得出不同因素的最適條件。七、實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)酵母菌搖床培養(yǎng)過程中，除了碳源、pH和培養(yǎng)時(shí)間三個(gè)應(yīng)訴外的其他培養(yǎng)條件和營養(yǎng)條件均瑤保持在最適條件下。注意高速冷凍離心機(jī)的使用安全，離心前一定要進(jìn)行配平并對(duì)稱放置。酵母菌的活化及擴(kuò)大培養(yǎng)盡量在無菌條件下進(jìn)行，一面雜菌污染，影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。八、思考題正交試驗(yàn)是設(shè)計(jì)的原理是什么？正交試驗(yàn)的檢測(cè)指標(biāo)除了通過測(cè)定菌體濃度和OD值外，還有哪些方法？本實(shí)驗(yàn)為什么采用560nm波長(zhǎng)測(cè)定酵母菌懸液的光密度？如果在實(shí)驗(yàn)中需要測(cè)定大腸桿菌生長(zhǎng)的OD值，如何選擇波長(zhǎng)?
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