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細(xì)菌和病毒的遺傳作-資料下載頁(yè)

2025-05-26 18:08本頁(yè)面
  

【正文】 間的合轉(zhuǎn)導(dǎo)頻率,就可以確定三個(gè)或三個(gè)以上基因在染色體上的排列順序 . 例如: a基因和 b基因的合轉(zhuǎn)導(dǎo)頻率很高, a和 c基因的合轉(zhuǎn)導(dǎo)頻率也很高,而 b和 c很少或完全不在一起轉(zhuǎn)導(dǎo),這三個(gè)基因的次序就應(yīng)為: bac Ⅱ 、作圖方法 以 P1噬菌體進(jìn)行下列轉(zhuǎn)導(dǎo): 供體 thr+ leu+ azir 受體 thr- leu- azis 先用 P1 噬菌體感染供體菌株,再用來(lái)自供體的新一代 P1噬菌體感染受體菌株。 然后檢測(cè)受體菌基因型。 檢測(cè)結(jié)果: 選擇標(biāo)記 非選擇標(biāo)記 1 leu+ 50% azir , 2% thr+ 2 thr+ 3% leu+ , 0% azir 3 thr+leu+ 0% azir 課后 17題: (自學(xué)) 實(shí)驗(yàn) 選擇的標(biāo)記基因 未選擇的標(biāo)記基因 1 pur+ pro- his- 87% pro+ his- 0% pro- his+ 10% pro+ his+ 3% 2 pro+ pur- his- 43% pur+ his- 0% pur- his+ 55% pur+ his+ 2% 3 his+ pur- pro- 21% pur+ pro- 15% pur- pro+ 60% pur+ pro+ 4% 實(shí)驗(yàn) 1: pur+與 his+近、與 pro+遠(yuǎn) pur+ his+ pro+ 或 pur+ his+ pro+ 實(shí)驗(yàn) 2: pro+與 his+、與 pur+遠(yuǎn) pro+ pro+ his+ his+ pur+ pur+ 綜合實(shí)驗(yàn) 實(shí)驗(yàn) 2,三者之間的順序如下: pur+ his+ pro+ 實(shí)驗(yàn) 3: his+與 pur+較近、與 pro+更近。進(jìn)一步說(shuō)明上面的結(jié)果是正確的。 B、 三因子轉(zhuǎn)導(dǎo) :只需分析一個(gè)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果就可以推出三個(gè)基因的次序 最少的一類轉(zhuǎn)導(dǎo)體應(yīng)代表最難于轉(zhuǎn)導(dǎo)的情況,這種轉(zhuǎn)導(dǎo)體是同時(shí)發(fā)生交換次數(shù)最多的一類。這種轉(zhuǎn)導(dǎo)體的兩邊應(yīng)為供體基因,而中間為受體基因,如正確次序?yàn)?abc,就應(yīng)為 a+b?c+。 例如:供體大腸桿菌具有基因型 a+b+c+,受體的基因型為 a?b?c?。 a+ b+ c+ a- b- c- ① 、 a+ b- c- ② 、 a- b+ c- ③ 、 a- b- c+ 雙交換 a+ b+ c+ a- b- c- ④ 、 a+ b+ c- ⑤ 、 a- b+ c+ ⑥ 、 a+ b+ c+ a+ b+ c+ a- b- c- 四交換 a+ b- c+ 假定由實(shí)驗(yàn)得到的最少的轉(zhuǎn)導(dǎo)體類別為 a+b+c?,那么就可以確定,這三個(gè)基因的正確次序應(yīng)當(dāng)是 acb或 bca。 a c b 例:課后 16題 供體菌: pur+ nad+ pdx-;受體菌: pur- nad- pdx+ 選擇基因 基因型 菌落數(shù) pur+ nad+ pdx+ nad+ pdx- nad- pdx+ nad- pdx- 3 10 24 13 數(shù)量最少的菌落基因型為: pur+ nad+ pdx+ 供體菌: pur+ nad+ pdx- 受體菌: pur- nad- pdx+ 基因的順序?yàn)椋? pur+ pdx- nad+ pur、 nad并發(fā)轉(zhuǎn)導(dǎo)頻率= X100%= 26% 3+ 10 50 pur、 pdx并發(fā)轉(zhuǎn)導(dǎo)頻率= X100%= 54% 3+ 24 50 ④ 、基因之間物理圖距的計(jì)算 d =L(1 3 X ) X=( 1- d/L) 3 X=兩個(gè)基因合轉(zhuǎn)導(dǎo)的頻率 d=同一染色體上兩基因之間的物理距離 L=轉(zhuǎn)導(dǎo) DNA的平均長(zhǎng)度= , 2min遺傳圖距或 2X20%= 40%遺傳圖距 例:課后 14題, thr和 leu相距 2% X=( 1- d/L) =( 1- 2% /40%) =% 3 3 ⑤ 、 流產(chǎn)轉(zhuǎn)導(dǎo)( abortive transduction) :指轉(zhuǎn)導(dǎo) DNA分子進(jìn)入受體細(xì)胞后,既不與受體基因組發(fā)生交換,又不隨宿主 DNA復(fù)制而復(fù)制,而是很穩(wěn)定地存在于細(xì)胞之中,由于細(xì)菌不斷增殖,故該轉(zhuǎn)導(dǎo)類型的細(xì)菌所占比例越來(lái)越少,以至最終消失,故稱為 流產(chǎn)轉(zhuǎn)導(dǎo) 。 例:以 P22為媒體的沙門(mén)氏菌的轉(zhuǎn)導(dǎo)中,在基本培養(yǎng)基上除了正常大小的菌落外,還有一些微小的菌落。小菌落中的細(xì)胞能再產(chǎn)生一個(gè)原養(yǎng)型小菌落。 + - + - + - + - - - - - - - - - - ⑵ 、 局限轉(zhuǎn)導(dǎo) ① 、概念: 由溫和噬菌體(如 λ )介導(dǎo)的轉(zhuǎn)導(dǎo)類型。原噬菌體離開(kāi)細(xì)菌染色體時(shí),偶爾可將噬菌體插入位點(diǎn)兩邊的細(xì)菌基因一起環(huán)落下來(lái)而形成混雜的 DNA片段,該DNA片段由噬菌體蛋白質(zhì)衣殼包裹,再去侵染其他宿主細(xì)菌,可將 特定的細(xì)菌基因 帶入新的受體菌,進(jìn)而重組整合,這種轉(zhuǎn)導(dǎo)稱為 局限性轉(zhuǎn)導(dǎo) 。 ② 、轉(zhuǎn)導(dǎo)噬菌體的形成 att att bio gal bio gal att att bio gal att bio gal aat λpbio λdgal ③ 、低頻轉(zhuǎn)導(dǎo):用誘導(dǎo) λ溶原性菌株得來(lái)的噬菌體進(jìn)行轉(zhuǎn)導(dǎo)時(shí)轉(zhuǎn)導(dǎo)頻率不高,稱為低頻轉(zhuǎn)導(dǎo)。 ④ 、高頻轉(zhuǎn)導(dǎo)( high- frequency transduction, HFT): 如果 λdgal 與正常 λ 噬菌體同時(shí)感染一個(gè)受菌體,可誘導(dǎo)產(chǎn) 生 λ/ λdgal 雙重溶原菌。這種雙重溶原菌不穩(wěn)定,經(jīng)紫外 線誘導(dǎo)可產(chǎn)生大約半數(shù)的轉(zhuǎn)導(dǎo)噬菌體。用這樣得來(lái)的噬菌體 進(jìn)行的轉(zhuǎn)導(dǎo)稱為高頻轉(zhuǎn)導(dǎo)。 bio gal- att att att gal+ gal- gal+ att att bio att
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