【正文】 18001800合　計3900031500 飼養(yǎng)生產(chǎn)區(qū)飼養(yǎng)生產(chǎn)區(qū)是項目的核心區(qū)，將嚴格按照農(nóng)業(yè)部2008年頒布試行的《奶牛標準化規(guī)模養(yǎng)殖生產(chǎn)技術規(guī)范（試行）》要求高標準進行規(guī)劃建設。建筑及構(gòu)筑物建筑面積占地面積備注牛舍及涼棚2700027000奶牛運動場7500075000擠奶廳36003600分割車間精室24002400干草庫21002100飼料庫15001500飼料加工調(diào)制車間32003200青貯窖70007000消毒室800800更衣室800800車輛消毒池400400區(qū)間潔道1600016000區(qū)間污道40504050防護林草帶2800028000其它15001500合　計173350產(chǎn)區(qū)主要包括牛舍、擠奶廳、人工授精室等生產(chǎn)性建筑。應設在場區(qū)的下風位置，入口處設人員消毒室、更衣室和車輛消毒池。生產(chǎn)區(qū)奶牛舍要合理布局，能夠滿足奶牛分階段、分群飼養(yǎng)的要求，泌乳牛舍應靠近擠奶廳，各牛舍之間要保持適當距離，布局整齊，以便防疫和防火。并建設輔助生產(chǎn)區(qū)域，包括輔助生產(chǎn)區(qū)主要包括供水、供電、供熱、維修、草料庫等設施，要緊靠生產(chǎn)區(qū)布置。同時包括干草庫、飼料庫、飼料加工調(diào)制車間、青貯窖等必備的生產(chǎn)輔助設施。規(guī)劃總面積173350平方米。占整個場地面積的52%左右。 防疫與污水處理區(qū)主要包括大型沼氣工程、污水處理生物塘、防疫室、病牛舍、焚燒室。占地面積20畝左右。其中沼氣工程的污水凈化池、沉淀池、氧化塘、沼氣池等占地10畝左右。 防護林帶在場區(qū)的四周，特別是東北、西北方向種植30米的森林防護林帶，防護大風對場內(nèi)的影響，同時增加場內(nèi)綠地面積，減少輻射，為場內(nèi)提供充足的天然氧氣來源。第7章 生產(chǎn)技術方案 技術來源項目采用的技術主要來自金華新駿奶牛技術研究所、金華市生物工程學院和江西省農(nóng)林科學院等農(nóng)業(yè)技術推廣單位和科研院所。這些單位具有豐富的生產(chǎn)實踐經(jīng)驗和理論基礎，擁有多項科研成果和技術可用于項目的建設和生產(chǎn)。 總流程與技術構(gòu)成飼料有機肥廠農(nóng)田沼氣池養(yǎng)牛場農(nóng)戶秸桿廢料沼渣糞便沼氣沼液廢棄物尿糞便有機肥奶牛牛奶 總流程圖71 項目總流程圖 抗熱高產(chǎn)奶牛繁育本項目的主要產(chǎn)品是**抗熱抗?jié)窀弋a(chǎn)奶牛Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型和綠色生鮮牛乳。**抗熱抗?jié)窀弋a(chǎn)奶牛Ⅰ型，娟姍牛遺傳基因達75%，其產(chǎn)奶量達7500公斤，%，%，具有雜交優(yōu)勢和抗熱應激性能強等優(yōu)點； **抗熱抗?jié)窀弋a(chǎn)奶牛Ⅱ型，荷斯坦奶遺傳基因達75%，乳脂率、－%，比常規(guī)荷斯坦奶牛有更強的抗熱應激能力，產(chǎn)奶量8500公斤。**抗熱抗?jié)窀弋a(chǎn)奶牛Ⅲ型，利用瑞士褐鈀牛凍精培育而成，毛色褐白花，蹄黑色，體高133cm，體重450－500kg , %，%，產(chǎn)奶量8000公斤，具有耐高熱、耐高濕、抗病國強等特點。 抗熱奶牛生產(chǎn)工藝流程 娟姍?！幔▋鼍┖伤固古！狻　　　　　　　　　　　　1♀娟姍?！幔▋鼍　　　　　　　　　　　∧膛＂裥秃伤固埂幔▋鼍┚陫櫯！狻　　　　　　　　　　　　1♀荷斯坦牛♂（凍精）　　　　　　　　　　　 奶牛Ⅱ型奶牛Ⅰ型♂ 奶牛Ⅰ型♀　　　　　　　　　　　　　F1♀瑞士褐鈀牛?！幔▋鼍　　　　　　　　　? 奶牛Ⅲ型4次采集胚胎/年 奶牛胚胎移植工藝流程6枚胚胎抗熱高產(chǎn)奶?！　　　　　　　　　　　　】刹?年50%成功率　　　供體牛50%50%　　　　　　　　　　　　　　♀　　　　　　　　♂高產(chǎn)公胚胎高產(chǎn)母胚胎　　　　　　　　　　　　受體牛高產(chǎn)母牛犢 主要技術措施改進超數(shù)排卵技術，把重復超排間隔周期由三個月降低至25天－28天，且重復處理次數(shù)達10次，每頭供體牛年獲胚胎總數(shù)升至50枚以上；采用乙二醇作為冷凍保護劑，大大簡化了胚胎冷凍的操作程序，便于現(xiàn)場移植操作；采用體外胚胎生產(chǎn)技術，縮短采卵周期，擴大卵母細胞來源，提高優(yōu)質(zhì)胚胎數(shù)量，實現(xiàn)胚胎工廠化生產(chǎn)，降低胚胎成本；引進LAMP法（基因擴增法）鑒定奶牛胚胎性別，快速、準確，技術實用。 胚胎移植技術（一）、胚胎的冷凍保存胚胎冷凍保存的成功使奶牛的胚胎移植不再受時間和空間的限制，完全可以根據(jù)受體母牛的發(fā)情情況人為確定胚胎移植的時間。其次，使胚胎的國際、國內(nèi)交換以及長期保存成為可能，大大推動了胚胎移植產(chǎn)業(yè)化的進程。目前常用的胚胎冷凍方法主要有兩種： 慢性冷凍保存。此法是將胚胎置于抗凍保護劑溶液中，經(jīng)緩慢降溫，一般降溫速度為1每分鐘攝氏度到3每分鐘攝氏度，達到一定的溫度后投入液氮（196攝氏度），即可長期保存。經(jīng)冷凍保存的胚胎在移植前經(jīng)解凍進行移植。這種方法由于降溫速度慢，可在胚胎完全凍結(jié)前脫出細胞內(nèi)的水分，防止冰晶形成對胚胎的傷害。整個冷凍過程需要24小時，比較費時。目前已有各種類型的胚胎冷凍儀，可以進行電腦程序控制，保證了每一批的冷凍質(zhì)量。該法已在國內(nèi)外廣泛應用，成為一種常規(guī)的胚胎冷凍保存方法。玻璃化冷凍保存。此法是將胚胎置于特制的高濃度的冷凍保護液中，只需要幾分鐘的平衡時間即投入液氮中完成冷凍保存過程。胚胎解凍后的生存能力不低于慢速冷凍保存。此法不需冷凍儀和特殊設備，在沒有實驗室的現(xiàn)場條件下即可操作。由于整個冷凍過程只需幾分種的時間，縮短了操作的時間，具有很好的推廣和應用前景。 胚胎的性別控制奶牛的性別控制是指采用某些人為的技術方法控制受精后胚胎性別，這是從根本上控制后代的性別比例，又稱性比控制。目前，人們將奶牛早期胚胎在移植前進行性別鑒定，以達到按生產(chǎn)需要獲得單一性別犢牛的需要的方法也納入奶牛性別控制內(nèi)容。奶牛只有母牛產(chǎn)奶，一般情況下，非超群公、母牛所生的公犢生產(chǎn)價值極低。項目擬兩種奶牛性別控制的方法。 (一）、X和Y精子的分離目前，X和Y精子的分離的準確而有效的方法是流式細胞器分離。其理論根據(jù)是X精子是DNA的含量比Y精子高34%。具體的方法是：用特異的染料對精子進行染色，隨后將精子連同少量稀釋液逐一通過流式細胞器的激光束，其探測器可感知精子染色后的發(fā)光強度并將這一信息傳遞給計算機，經(jīng)分辨后計算機令液晶充電器使發(fā)光較強的精子分離，進入兩個不同的收集容器。這樣，正電荷收集器容器得到的是X精子，負電荷收集器容器則為Y精子。用分離后的精子進行人工受精、體外受精或是顯微受精就可以得到單一性別率高的胚胎或犢牛。國外此法已開始用于商業(yè)化的運作，分離的準確率達90%以上。每小時可得到一個輸精劑量的分離精子。（二）、SRY片段PCR擴增胚胎性別鑒定法最近10年來發(fā)展的用公牛特異性DNA探針和PCR（聚合酶鏈式反應）擴增技術對奶牛早期胚胎進行性別鑒定的一種準確有效的方法。其主要操作步驟是：從被測胚胎取部分卵裂球用以提取DNA，再用SRY基因的片段作引物，以所取的胚胎細胞DNA為模板進行PCR擴增，最后用SRY特異探針對擴增的產(chǎn)物進行檢測。雄性胚胎顯示呈陽性，雌性胚胎為陰性。也可對擴增產(chǎn)物進行電泳，根據(jù)SRY條帶的有無判斷胚胎為雄、雌。隨著這項技術的深入研究和進展，目前只需幾個卵裂球即可完成檢測的取樣，減少了對胚胎的傷害。經(jīng)鑒定的胚胎，移植后產(chǎn)犢性別的準確率可達95%以上。此法整個操作只需幾十分鐘，有較好的應用前景，已開始了商業(yè)運作。 胚胎移植的技術程序包括超數(shù)排卵、供體母牛的配種、胚胎的收集、胚胎的檢查、胚胎的保存和胚胎的移植等技術程序。其主要的幾個技術環(huán)節(jié)如下：①超數(shù)排卵。在母牛發(fā)情周期的適當時間，注射促性腺激素，使卵巢中有較多的卵胞發(fā)育和排卵，這種方法稱為超數(shù)排卵。在進行胚胎移植時要對供體母牛作超數(shù)排卵處理，以便一次取得多枚胚胎。一般認為超排量最好是10個左右，太少會降低胚胎移植的意義，同時胚胎的收集也有困難，超排過多會降低卵子的受精率和收集率。超排處理一般方法為在預計發(fā)情到來之前4天， 即發(fā)情周期的第16天注射促卵泡素或孕馬血清促性腺激素，在出現(xiàn)發(fā)情的當天注射絨毛膜激素。為了使排出的卵子有較多的受精機會，一般在發(fā)情后輸精23次，每次間隔812小時。母牛對超排處理的個體反應差異較大，其原因可能與母牛的品種、年齡、體況、生理狀態(tài)、制劑質(zhì)量、投藥方法和劑量等各因素有關。②胚胎的收集。采用非手術法進行胚胎的收集。非手術法是在輸精后57天進行?？刹捎枚坊蛉穼Ч艿臎_卵器。 二路式?jīng)_卵器。二路式?jīng)_卵器由帶氣囊的導管與單路管組成。導管中一路為注入和回收沖洗液用。導管用直腸把握法從子宮頸導入子宮角。通過氣囊導管打入空氣，使氣囊膨脹以固定導管在子宮角內(nèi)的位置和防止沖洗液倒流。沖洗液經(jīng)單路管注入子宮角，每次1550毫升，然后將沖洗液收集在漏斗形容器內(nèi)。 沖洗56次。為更多地回收沖洗液，可在直腸內(nèi)輕輕按摩子宮角。沖洗液多數(shù)為組織培養(yǎng)液， 如林格氏液、杜氏磷酸緩沖液、布林斯特氏液（BMOC3）和TCM199等。常用的為杜氏磷酸緩沖液（PBS）， %的牛血清蛋白或110%小牛血清。布林斯特氏液效果也較好。這兩個培養(yǎng)液的成分見下表。（克/100毫升雙蒸餾水）成分PBSBMOC3成分PBSBMOC3氯化鈉磷酸氫二鈉　氯化鉀硫酸鎂　氯化鈣葡萄糖　碳酸氫鈉　牛血清白蛋白　氯化鎂　乳酸鈉　磷酸二氫鉀丙酮酸鈉　沖洗液使用時溫度應為3570℃， 每毫升要加入青霉素1000單位，鏈霉素5001000微克，以防止生殖道感染。把上述方法所回收的沖洗液于室溫或37℃溫箱內(nèi)靜置10分鐘。待胚胎下沉后，移去上層液，取底部少量液體移至平皿內(nèi)，先在1020倍的解剖鏡下檢查胚胎數(shù)量， 然后在較大倍數(shù)（50100倍）下觀察胚胎發(fā)育情況。把正常發(fā)育的胚胎收集于帶有密閉蓋的玻璃容器內(nèi)備用貯存。正常發(fā)育的胚胎，其中細胞（卵裂球）外形整齊，大小一致，分布均勻，外膜完整。無卵裂現(xiàn)象（未受精）和異常卵（外膜破裂，卵裂球破裂等）都不能用于胚胎移植。 ③胚胎的移植。采用非手術法移植是用人工授精輸精器（卡蘇槍）或?qū)Ｓ靡坡哑靼凑罩蹦c把握輸精方法插入非排卵側(cè)子宮角深部，注入胚胎。非手術法的移植在發(fā)情周期的69天進行（即胚泡階段），效果較好。非手術法不損害受體的健康，操作簡便，但是還需要克服所注入胚胎易被排出的問題。非手術法移植時要嚴格遵守無菌操作規(guī)程，以防止生殖道感染。供體和受體的發(fā)情期應相同或前后相差不超過24小時，否則，將會影響成功率。所以在胚胎體外保存方法沒有得到較好的解決之前，必須對供體和受體同時進行同期發(fā)情處理，使兩者性腺和生殖道處于相同的生理狀態(tài)，　以提高移植成活率。對供體和受體于術后要注意觀察是否發(fā)情。供體發(fā)情時即可正常配種，或經(jīng)過4080天再重復作為供體。受體母牛如未發(fā)情，在適當時間進行妊娠檢查。若確已妊娠，應加強飼養(yǎng)管理。誘產(chǎn)雙胎的受體母牛以成年母牛較好，可以減少分娩困難。④胚胎的保存。如果胚胎能在體外較長期的保存，并使它保持于取卵時狀態(tài)，對胚胎移植的實際應用有很大的意義。這樣就可以免去移植時要求的同期發(fā)情處理?？梢圆皇軙r間、地點和選定受體母牛的限制，隨時隨地可以進行胚胎移植。胚胎保存的研究近年來發(fā)展很快，并已取得了一定的進展。在前述培養(yǎng)液中， 如在室溫或體溫條件下， 胚胎只能存活1020小時。 當溫度降至20℃以下時，胚胎即停止發(fā)育，存活時間可以延長。在10℃以下可以存活數(shù)日。將牛的胚胎在兔的輸卵管內(nèi)可保存34天。據(jù)報道，將曾在母兔輸卵管內(nèi)保存34天的牛胚胎移植到同期化受體青年母牛，胚胎成活率可達73%。但是上述方法在時間上是短暫的，受胎率也不高。目前冷凍保存胚胎的研究已取得了成果。用于冷凍保存的胚胎以67日齡胚胎，即桑椹期至胚泡開始出現(xiàn)時的胚胎效果較好。胚胎冷凍前必須使其脫水，進行冷凍保護劑二甲基亞礬（DMSO）的滲透處理。在室溫下（20℃）， 、 、%牛血清白蛋白的PBS溶液（磷酸緩沖液）。將胚胎依次浸入上述不同DMSO濃度的溶液中進行滲透處理，在每個濃度溶液中分別停留510分鐘。，并將口封好。以上操作均在解剖鏡下進行，然后將安瓿置于14℃的水浴中。胚胎冷凍以液氮為冷源。在可控制溫度的液氮冷凍箱內(nèi)進行。冷凍速率以英國為例：14℃至7℃每分鐘下降1℃，于7℃時用在液氮中浸過的金屬鑷子夾一下有胚胎的安瓿，使之誘導結(jié)晶，胚胎迅速被玻璃化凍結(jié)，而不致產(chǎn)生有害的冰結(jié)晶。7℃至36℃，36℃至60℃℃，60℃時直接投入液氮中保存。胚胎的解凍比冷凍速度快，196℃至50℃（干冰酒精溶液中），50℃至14℃每分鐘升溫4℃。解凍后，通常在室溫下將安瓿打開，脫去冷凍保護劑DMSO。 、在每種濃度溶液中各停留510分鐘， ，最后移入不含DMSO的磷酸緩沖溶液中停留10分鐘。 再用磷酸緩沖液沖洗二次，取出后檢查即可用于移植，也可以培養(yǎng)1小時（在37℃培養(yǎng)液中），將其中死的胚胎去掉，效果更好。從以上情況看，冷凍保存胚胎雖然凍后成活率和受胎率還很低，還需要在培養(yǎng)液、防凍保護劑、降溫和升溫速率等問題進行深入的研究。但是這確是胚胎保存技術的重大突破。⑤胚胎移植的效果。據(jù)移植實驗，胚胎移植的成功率，即受體妊娠率，鮮胚移植達6070%，凍胚也達到4550%，%。 奶牛飼養(yǎng)技術 泌乳母牛的飼養(yǎng)泌乳階段的劃分：泌乳母牛分四個階段進行飼養(yǎng)管理，分娩至分娩后第15天為泌乳初期，每16天至100天為泌乳前期，第101天至210天為泌乳中期，第211天至干乳為泌乳后期。泌乳母牛的營養(yǎng)需要。泌乳母牛的營養(yǎng)需要分維持的營養(yǎng)需要、產(chǎn)乳的營養(yǎng)需要和妊