【導讀】估，確定相應的生物安全防護水平等級。實驗室生物危害評估結果應由中心的法定代表人簽字認可，并歸檔保存。特定的實驗開始前需要預先進行登記和通過生物安全負責人的批準。Pathogen病原體–危險的生物因子。Procedures規(guī)程–推薦的實驗操作和安全的操作規(guī)范。Personnel人員–相應的培訓與技能。Place地點–實驗室所在位置。實驗室工作的每一方面都應考慮風險評估和風險管理的5個“P”。風險評估能幫助免受生物危害的暴露，以及最大程度減少實驗室受到感染的可能性。感染性疾病發(fā)生過程。建立一套結合安全使用的標準操作。遵守基本的生物安全規(guī)則。年齡、種族、性別、妊娠。調查/核實事件/飛濺等，以防止再。年齡、免疫狀況、職業(yè)、物理或地理環(huán)境等因素會導致個體對疾病的不同易感性。在涉及生物危害時，確定其最低感染量是很困難的。同一病原體相同劑量在一個。人身上可能無癥狀，而在另一人身上可能導致嚴重的癥狀甚至致命。

　　

【正文】 菌和廢棄物的處理過程 11－ 29 標本容器 標本容器可以是玻璃的，但最好使用塑料制品。標本容器應當堅固，正確地蓋子或塞子蓋好后應無泄漏。在容器外部不能有殘留物。容器上應當正確的粘貼標簽以便于識別。標本的要求或說明書不能夠卷在容器外面，而是要分開放置，最好放置在防水的袋子里。 標本的收集、接受和標記 需要接受大量標本的實驗室應當安排專門的房間或空間并： 1． 始終遵循標準防護方法，所有操作均 要戴手套。 2． 應當由受過培訓的人員來采集病人或動物的血樣。 3． 在靜脈抽血時，應當使用一次性的安全真空采血管取代傳統(tǒng)的針頭和注射器，因為這樣可以使血液直接采集到帶塞的運輸管和 /或培養(yǎng)管中。用完后自動廢棄針頭。 4． 對每個標本作唯一性標識。 5． 裝有標本的試管應置于適當容器中運至實驗室，在實驗室內部轉運也應這樣。檢驗申請單應當分開放置在防水袋或信封內。 6． 接受人員不應打開這些袋子。 標本在設施內的傳遞 為了避免意外泄漏或溢出，應當使用盒子等二級容器，并將其固定在架子上使裝有標本的容器保持直立。二級容器可以是金屬或塑 料制品，應該可以耐高壓滅菌或耐受化學消毒劑的作用。密封口最好有一個墊圈，要定期清除污染。 打開標本及處理 接受和打開標本的人員應當了解標本對身體健康的潛在危害，并接受過如何采用標準防護方法的培訓，尤其是處理破碎或泄漏的容器時更應如此。標本的內層容器要在生物安全柜內打開，并準備好消毒劑。 標本打開處理時： 1． 應當在生物安全柜內打開標本管。 2． 必須戴手套，并建議對眼睛和黏膜進行保護（護目鏡或面罩）。 3． 打開標本管時，應用紙或紗布抓住塞子以防止噴濺。 消毒、滅菌和廢棄物的處理過程 11－ 30 避免感染性物質的注入 1． 通過認真練習和仔細操作，可 以避免破損玻璃器皿的刺傷所引起的接種感染。應盡可能用塑料制品代替玻璃制品。 2． 銳器損傷（如通過皮下注射針頭、巴斯德玻璃吸管以及破碎的玻璃）可能引起意外注入感染性物質。 3． 以下兩點可以減少針刺損傷：（ a）減少注射器和針頭的使用（可用一些簡單的工具來打開瓶塞，然后使用吸管取樣而不用注射器和針頭）；（ b）在必須使用注射器和針頭時，采取銳器安全裝置。 4． 不要重新給用過的注射器針頭戴護套。一次性物品應丟棄在防 /耐穿透的帶蓋容器中。 血清的分離 1． 只有經(jīng)過嚴格培訓的人員才能進行這項工作。 2． 操作時應戴手套以及眼睛和黏膜 的保護裝置。 3． 規(guī)范的實驗操作技術可以避免或盡量減少噴濺和氣溶膠的產(chǎn)生。血液和血清應當小心吸取，而不能傾倒。嚴禁用口吸液。 4． 移液管使用后應完全浸入消毒液中。移液管應在消毒液中浸泡適當?shù)臅r間，然后再丟棄或滅菌清洗后重復使用。 5． 帶有血凝塊的廢棄標本管，在加蓋后應放在適當?shù)姆缆┤萜鲀雀邏簻缇?/或焚燒。 6． 應備有適當?shù)南緞﹣砬逑磭姙R和溢出標本。 對血液和其他體液、組織及排泄物的標準防護方法 設計標準防護方法（其中包括“常規(guī)預防措施”）以降低從已知或未知感染源的微生物傳播危險。 玻璃器皿和“銳器” 1． 盡可能用塑料制品代替玻璃制品。只能用實驗室級別（硼硅酸鹽）的玻璃，任何破碎或有裂痕的玻璃制品均應丟棄。 2． 不能將皮下注射針作為移液管使用。 用于顯微鏡觀察的蓋玻片和涂片 消毒、滅菌和廢棄物的處理過程 11－ 31 用于顯微鏡觀察的血液、唾液和糞便標本在固定和染色時，不必殺死涂片上的所有微生物和病毒。應當用鑷子拿取這些東西，妥善儲存，并經(jīng)清除污染和 /或高壓滅菌后再丟棄。 自動化儀器 為了避免液滴和氣溶膠的擴散，可能的話這些儀器應采用封閉型的。 1． 排出物應當收集在封閉的容器內進一步高壓滅菌和 /或廢棄。 2． 在每一步完成后應根據(jù)操作指南對儀器進行消毒。 清除污染 建議使用次氯酸鹽和高級別的消毒劑來清除污染。一般情況可使用新鮮配制的含有效氯 1 g/L 的次氯酸鹽溶液，處理溢出的血液時，有效氯濃度應達到 5 g/L。戊二醛可以用于清除表面污染。 一次性接種環(huán) 一次性接種環(huán)的優(yōu)點是無需滅菌，因此可以在生物安全柜中使用。否則，使用明火會擾亂氣流。一次性接種環(huán)使用后應置于消毒劑中，并按污染性廢棄物處理。 微型加熱器 氣體和電加熱的微型加熱器配有硼硅酸玻璃紅火陶瓷保護罩，從而減少接種環(huán)滅菌 時感染性物質的飛濺和散步。但微型加熱器會擾亂氣流，因此應置于生物安全柜中靠近工作面后緣的地方。 、試管和試劑瓶 由于沒有明確的事故發(fā)生及明顯的溢出物，因此不能確定打開的平板、試管及試劑瓶里的一些微生物體是否會引起實驗室感染。然而，這些很高的傳染因子中很有可能有一些傳染病會發(fā)生。當打開存在真菌類的平板、試管及瓶子時需格外小心，因為在操作中可能會釋放出大量孢子。一些培養(yǎng)物應該在生物安全柜內進行操作。在吸取液體培養(yǎng)物前，為確保它成為均一的懸液，應給予振動混勻。劇烈的搖動將產(chǎn)生大量的氣溶膠。輕微的 打旋可以成為均一的懸液，但仍伴有微量的氣溶膠產(chǎn)生。當液體培養(yǎng)物恢復原狀停留片刻后再打開容器時，氣溶膠產(chǎn)生減少。將消毒后熱的金屬接種環(huán)或針插入液體或斜面培養(yǎng)物會產(chǎn)生飛濺并產(chǎn)生氣溶膠。為減少氣溶膠的產(chǎn)生，金屬接種環(huán)應在空氣中冷卻，或在容器內壁，消毒、滅菌和廢棄物的處理過程 11－ 32 或在繁殖物培養(yǎng)的瓊脂表面沒有物體生長的地方接觸一下進行冷卻。用特定設計的電或氣體燒灼裝置消毒的接種環(huán)或針，比用開口火焰加熱的更可取。這種小型的燒灼裝置有一個筒，可以包容從接種環(huán)或針上飛濺出的任何物質。通?？扇我馐褂玫慕臃N環(huán)是有用的。加熱使用過后為了能夠立即消毒，丟棄首先放 入消毒劑的容器中。 在粗糙不平整的培養(yǎng)基上用接種環(huán)或針劃線接種培養(yǎng)物會導致氣溶膠的產(chǎn)生。如果培養(yǎng)基表面光滑整潔，通常是不會產(chǎn)生氣溶膠的。丟棄粗糙不平整的培養(yǎng)基是好的安全技術。 有蓋培養(yǎng)皿內的培養(yǎng)物脫出的水里通常存在活的細小微生物，并且在倒轉平板的蓋子和邊緣之間形成一層膜。當打開平板時這層膜破裂，釋放出氣溶膠。對于蓋子與邊緣只有三個接觸點的塑料有蓋培養(yǎng)皿可能減少危害物。使用完全干燥的平板也能減少這種風險，但是從厭氧罐內取出的孵育平板（進行厭氧孵育）很容易變濕。在蓋子內裝上過濾膜雖能減少危害物的產(chǎn)生，但不能防止 擴散。如果平板明顯潮濕，則應在生物安全柜內打開。 打開有螺旋帽的瓶子和帶塞的試管時會產(chǎn)生看不見的氣溶膠。這是因為在打開塞子或蓋時，感染性液體在塞子邊緣處形成的那層膜被破壞，產(chǎn)生了氣溶膠。振動或離心后立即取下長頸瓶、瓶子、離心管的棉花塞子或塞蓋，產(chǎn)生氣溶膠導致環(huán)境污染。長頸瓶或離心管不處于垂直狀態(tài)，去除濕的瓶塞也會產(chǎn)生危害。此外，離心時會產(chǎn)生微量的泡沫，瓶塞很可能會被少許弄濕。由于這些可能性，因此應在生物安全柜內打開液體感染性培養(yǎng)物及危害物質，同時穿戴手套、長袖實驗室工作服，這是很好的安全措施。干縮的、有感染 性的培養(yǎng)物可聚集在蓋子邊緣或培養(yǎng)管 /長頸瓶的壁上，當受到干擾時會擴散到空氣里。裝有干粉狀危害物的容器應在生物安全柜內打開。 打開裝有凍干或液體培養(yǎng)物的密封安瓿會產(chǎn)生氣溶膠。為防止或減少氣溶膠的產(chǎn)生，應在生物安全柜內打開安瓿。在復蘇安瓿內容物時，要小心仔細以防割破手套和手，防止碎玻璃嘣入眼、臉及實驗環(huán)境里。此外，生物產(chǎn)品本身不能因外界生物體或消毒劑而受到污染。應戴手套在生物安全柜內進行操作。用砂輪在安瓿的頸部劃痕，消毒的濕酒精棉球包裹住安瓿，在安瓿的頸部用力折斷，確保安瓿處于垂直狀態(tài)。另一種 方法，在安瓿的頸部做一標記，用熱的金屬環(huán)或棒接觸使之產(chǎn)生裂縫，然后用消毒的濕酒精棉球包裹住安瓿，折斷頸部打開。消毒、滅菌和廢棄物的處理過程 11－ 33 將棉球和安瓿頂端丟進消毒劑中。緩慢加入液體使安瓿內的內容物復蘇，避免干燥濃縮狀的內容物呈煙霧狀擴散。混勻但無氣泡產(chǎn)生，取出內容物放入干凈容器內。一些實驗人員想使用已有劃痕的安瓿便于開口。但是，這樣很可能使安瓿變得不堅固，在操作或貯存期間發(fā)生破裂。裝有液體培養(yǎng)物的安瓿用同樣的方法打開。為確保裝有有害的、可流動的培養(yǎng)物及有活性的、粉狀物質的玻璃器皿便于運輸、孵育、貯存，應使用不易破碎的、防漏的外層容器應 ，體積足夠的大以防玻璃容器滲漏或破損時可容納所有的液體和粉末。外層容器必需貼上生物危害標識，包括感染性物質的名稱。 內務管理 設計周全的內務管理程序和表格可降低從事與致病因子有關工作的風險度，并確保研究項目的完成。 在進行操作的實驗室內，內務管理的作用更加明確的體現(xiàn)出來。 在有危害性操作的關鍵時刻，設計合理并能很好實施的內務管理程序可以限制 注意力不集中這種身體上的 影響因素，限制影響操作人員操作的因素；提供一個沒有身體危害源及污染物的工作環(huán)境；提供一個對于突發(fā)事件中釋放出來的致病因子可提高凈化效率的工作環(huán) 境。內務管理程序的制訂最直接明顯好處之一是對不同水平人員對污染物種類和污染源概念的培訓。 目的 實驗室內務管理的目的： ??提供有序的工作環(huán)境利于科研項目的完成。 ?使工作區(qū)域無自然危害物。 ?為維持生物學系統(tǒng)的完整性，提供一個背景污染完全達到零水平的清潔工作環(huán)境，但實際上通過特殊措施的消毒方法達到這種水平是不必要的。 ?預防現(xiàn)在和過去實驗中產(chǎn)生的可造成實驗室人員危害的物質的聚積。 ?使用內務管理程序預防危害物質氣溶膠的產(chǎn)生。 內務管理程序的改進應以人員和實驗完整性可能遭受的最大水平危害為基礎 。通過人員的綜合實踐和再培訓避免這種狀況。日常內務管理程序可以預防組織廢墟的聚集物： ?成為潛在微生物的窩藏處，對研究生物學系統(tǒng)的完整性有威脅。 消毒、滅菌和廢棄物的處理過程 11－ 34 ?提高實驗過程中不經(jīng)意釋放出的微生物的存活率。 ??阻礙凈化污物的滲透力。 ?通過衣服和鞋子從一個區(qū)域轉移到另一個區(qū)域。 ??通過人員和空氣的移動充分聚集后形成如同氣溶膠物質一樣的生物危害。 ? 引起人員的過敏反應（例如：對動物的皮屑） 適用范圍 在相當長的一段時間間隔后，為達到全部污物清除或主要的生物物質清除的效果，實驗室實施內務管理。 日常的內務管 理是建立在提供一個無潛在污染源環(huán)境的基礎上進行的。提供這樣一個工作環(huán)境，用簡潔的方法指示出應做的事情，誰去做以及進行的頻率，并不是一件簡單的事。監(jiān)督員必須從有關的潛在生物危害方面嚴格檢查每一項任務，制定出詳細的程序，并對實驗人員進行指導以減少誤解的機會。下面略述了需實驗室監(jiān)督人嚴格監(jiān)督的一部分條文。無需刻意按照這些條文去完成，這只是舉一個例子，作為實驗室內復雜的內務管理必須觀察的詳細方式介紹如下。 ??通道 ?洗眼器 ??實驗室進出路線 ??工作臺上方 ?地面 ??實驗設備的清潔 ??生物安全柜 ?玻 璃器皿 ?電冰箱 ??冷藏室 ??走廊 ?貯藏室 ?低溫冰柜 ??培養(yǎng)箱 ?廢棄物聚積 ??干冰柜 ?昆蟲和嚙齒動物的控制 ?工作臺表面 ?器具 職責的分配 實驗室進行內務管理是安全完成研究項目的一種途徑。將內務管理的任務分派給有經(jīng)驗的檢查人員是十分重要的 。被推薦的內務管理方法是對于直接的工作區(qū)域采取單獨分管的原則，對于共同使用場所區(qū)域采取合作原則，將內務管理的任務分配給檢查組。實驗室生物安消毒、滅菌和廢棄物的處理過程 11－ 35 全管理員需監(jiān)測單內務管理事務的完成次數(shù)。管理員應制定進度表和進行檢查任務的頻率并依此執(zhí)行。當精密的實驗儀器設備有特殊需求，應由專業(yè)的人員進行操作；應確定生物學準備的集中場所，以及使用處于準備狀態(tài)或運作狀態(tài)時有污染的器材的場所。 菌（毒）種和生物樣本管理 生物樣本采集應符合國家有關規(guī)定和技術標準的要求。樣本采集人員應掌握相關專業(yè)知識和操作技能，并具有與采 集病原微生物樣本危害等級相適應的生物安全防護裝備和防止擴散污染的措施。樣本采集人員應對樣本的來源、采集時間、采集人員等做好記錄。 高致病性（或疑似）的病原微生物菌（毒）種和生物樣本的運送應按《可感染人類的高致病性病原微生物菌（毒）種或生物樣本運輸管理規(guī)定》執(zhí)行。非高致病性的病原微生物菌（毒）種和生物樣本的運送應由專人負責，專車運送，運送人員應經(jīng)過培訓取得相關資質，不得通過公共交通工具運送，運送過程應采取相應的防護措施。運輸過程中發(fā)生意外狀況，運送單位、運送人、接受機構應按國家有關規(guī)定，采取必要的 應急措施。 內部運送病原微生物菌（毒）種和生物樣本的容器或包裝材料應滿足生物安全防護的要求，應密封，防水、防破損、防外泄。外送病原微生物菌（毒）種和生物樣本的容器或包裝材料應滿足國際民航組織《危險品航空安全運輸技術細則》（ Doc9284 包裝說明PI650）規(guī)定的 B 類包裝要求。最外層的容器或包裝材料上應按規(guī)定做好生物安全警示標識。 實驗室保藏菌（毒）種和生物樣本應符合國家相關規(guī)定。病原微生物實驗室菌（毒）種或樣本保藏部位為內部治安保衛(wèi)的重點，有關實驗室內部治安保衛(wèi)管理應嚴格按照國務院第 421 號令《企業(yè)事業(yè)單位內部治安保衛(wèi)條例