感染與免疫生工ppt課件-資料下載頁
2025-04-29 02:03本頁面
【正文】 克隆所產(chǎn)生的抗體混合物 。 四、現(xiàn)代免疫標(biāo)記技術(shù) ? 免疫標(biāo)記技術(shù) (Immunolabelling technique)是指將抗原或抗體用熒光素、酶、放射性同位素和電子致密物質(zhì)等加以標(biāo)記，借以提高其靈敏度的一類新技術(shù)。 1971年瑞典學(xué)者 Engvail和 Perlmann,荷蘭學(xué)者Van Weerman和 Schuurs分別報道將免疫技術(shù)發(fā)展為檢測體液中微量物質(zhì)的固相免疫測定方法，即酶聯(lián)免疫吸附測定法 (enzymelinked immunosorbent assay , ELISA) 。 ELISA現(xiàn)在已成為目前分析化學(xué)領(lǐng)域中的前沿課題 ，它是一種特殊的試劑分析方法，是在免疫酶技術(shù) ( immunoenzymatic techniques ) 的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種新型的免疫測定技術(shù) 。 酶聯(lián)免疫吸附試驗法 （ Enzyme linked immunosorbent assay, ELISA) 基本原理（定義） 以待測抗原（或抗體）與酶標(biāo)抗體（或抗原）的特異結(jié)合反應(yīng)為基礎(chǔ)，通過酶活力測定來確定抗原（或抗體）含量的固相免疫測定方法。 在這種測定方法中有 3種必要的試劑： ①固相的抗原或抗體（ 免疫吸附劑） ②酶標(biāo)記的抗原或抗體（ 標(biāo)記物） ③酶作用的底物（ 顯色劑） ① 使抗原或抗體結(jié)合到某種固相載體表面，并保持其免疫活性。 ② 使抗原或抗體與某種酶連接成 酶標(biāo)抗原或抗體 ，這種酶標(biāo)抗原或抗體既保留其免疫活性，又保留酶的活性。在測定時，把受檢標(biāo)本（測定其中的抗體或抗原）和酶標(biāo)抗原或抗體按不同的步驟與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與其他物質(zhì)分開，最后結(jié)合在固相載體上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量成一定的比例。 ③ 加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化變?yōu)橛猩a(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)顏色反應(yīng)的深淺刊物定性或定量分析。由于酶的催化頻率很高，故可極大地地放大反應(yīng)效果，從而使測定方法達(dá)到很高的敏感度。 酶聯(lián)免疫吸附試驗 ? 圖 兩種酶聯(lián)免疫吸附試驗示意圖 The End
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