微生物雜交育種ppt課件-資料下載頁(yè)
2025-04-29 01:42本頁(yè)面
【正文】 感受性的兩種菌絲間才可形成異核體； 2）具有野生型性狀，可在基本培養(yǎng)基上生長(zhǎng) ； （基因互補(bǔ)功能） 3）大多數(shù)異核體的分生孢子不能在基本培養(yǎng)基 上生長(zhǎng)；如能生長(zhǎng)，則為異核體、或?yàn)殡s合 二倍體（重組子）。 雜合雙倍體的形成 隨著異核體的形成，準(zhǔn)性生殖便進(jìn)入 雜合雙倍體的形成階段，就是異核體菌絲在繁殖過(guò)程中，偶而發(fā)生兩種 不同遺傳型核的融合 ，形成 雜合細(xì)胞核。 由于組成異核體的兩個(gè)親本細(xì)胞核各具有一個(gè)染色體組，所以 雜合核是雙倍體 。雜合雙倍體形成之后，隨 異核體的繁殖而繁殖 ，這樣就在異核體菌落上形成 雜合二倍體 的 斑點(diǎn)或扇面 。將這些斑點(diǎn)或扇面的孢子挑出進(jìn)行 單孢子分離 ，即可得到 雜合雙倍體菌株 。 體細(xì)胞重組 雜合雙倍體只具有相對(duì)的穩(wěn)定性，在其繁殖過(guò)程中可以發(fā)生染色體交換和染色體單倍化，從而形成各種分離子。染色體交換和染色體單倍化是兩個(gè)相互獨(dú)立的過(guò)程，有人把它們總稱為體細(xì)胞重組。這就是準(zhǔn)性生殖的最后階段。 染色體交換 由準(zhǔn)性生殖第二階段形成的雜合雙倍體 并不進(jìn)行減數(shù)分裂 ，卻會(huì)發(fā)生 染色體交換 。由于這種交換發(fā)生在 體細(xì)胞的有絲分裂過(guò)程中 ，因此它們被稱為 體細(xì)胞交換 。雜合雙倍體發(fā)生了體細(xì)胞交換后所形成的兩個(gè)子細(xì)胞仍然是 雙倍體細(xì)胞 。 染色體單倍化 雜合雙倍體除了發(fā)生染色體交換 外， 還能發(fā)生染色體單倍化 。 這過(guò)程不同于減數(shù)分裂 。在減數(shù)分裂過(guò)程中，全部染色體同時(shí)有一對(duì)減為一個(gè)，所以通過(guò)一次減數(shù)分裂，由一個(gè)雙倍體細(xì)胞產(chǎn)生四個(gè)單倍體細(xì)胞。而染色體單倍化則不同，它是通過(guò)每一次細(xì)胞分裂后，往往 只有一對(duì)染色體變?yōu)橐粋€(gè) ，而其余染色體則仍然都是成雙的。這樣維過(guò) 多次細(xì)胞分裂，才使一個(gè)雙倍體細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)閱伪扼w細(xì)胞 。通過(guò)單倍化過(guò)程，形成了各種類(lèi)型的分離子，它包括 非整倍體、雙倍體和單倍體。 體細(xì)胞交換和單倍體化 雜合體細(xì)胞中有極少數(shù)細(xì)胞核在進(jìn)行有絲分裂的過(guò)程中，能發(fā)生體細(xì)胞染色體間的交換、分離（單倍體化）而產(chǎn)生具有新性狀的單倍體雜合子、雙倍體及非整倍體。 A B A+B （同核體） （異核體） A A B B AB A A B B （雜合二倍體） 單倍體雜合子 B 霉菌的雜交技術(shù) （ 1）選擇直接親本 用來(lái)進(jìn)行雜交的兩個(gè)野生型菌株叫做 原始親本 。原始親本經(jīng)過(guò) 誘變以后 得到各種突變型菌株 。假設(shè)這種菌株是用來(lái)作為 形成異核體的親本，就 叫直接親本 。 作為直接親本的 遺傳標(biāo)記 有多種多樣。如 營(yíng)養(yǎng)突變型，抗藥性突變型，形態(tài)突變型 等。 （ 2）異核體的形成 在基本培養(yǎng)基上，強(qiáng)迫兩株?duì)I養(yǎng)缺陷型 互補(bǔ)營(yíng)養(yǎng) ，則這兩個(gè)菌株經(jīng)過(guò) 菌絲細(xì)胞間的吻合形成異核體 。由直接親本 形成異核體的方法 有： 1）完全培養(yǎng)基液體混合培養(yǎng)法； 2）完全培養(yǎng)基斜面混合培養(yǎng)法； 3）液體有限培養(yǎng)基混合培養(yǎng)法； 4）有限培養(yǎng)基平板異核叢形成法； 5）基本培養(yǎng)基斜面銜接接種法 6）基本培養(yǎng)基平板穿刺法等。 （ 3）雙倍體的檢出 檢出雙倍體的方法有三種 ： l）用擴(kuò)大鏡觀察異核體菌落的表面 ，如果發(fā)現(xiàn)有 野生型顏色的斑點(diǎn)和扇面 ，即可用接種針將其孢子挑出，進(jìn)行 分離純化 ，即得 雜合雙倍體 。 2）將異核體菌絲打碎 ，于基本培養(yǎng)基和完全培養(yǎng)基平板上進(jìn)行分離，經(jīng)培養(yǎng) 挑出異核菌落 。在個(gè)別異核菌落上長(zhǎng)出野生型原養(yǎng)性的斑點(diǎn)和扇面，將其挑出進(jìn)行 分離純化即可 。 上述兩種方法只能 從每個(gè)異核體菌落（叢）上挑取一個(gè)斑點(diǎn)或扇面，以 排除無(wú)性繁殖的干擾 。 3） 將大量異核體孢子分離于基本培養(yǎng)基平板上從中長(zhǎng)出野生型原養(yǎng)性菌落，將其挑出分離純化， 即得雜合雙倍體。 （ 4）分離子的檢出 1） 將雜合雙倍體單孢子分離于完全培養(yǎng)基平板上，培養(yǎng)至 菌落成熟 ，從每個(gè)菌落挑出一個(gè)斑點(diǎn)或扇面的孢子于完全培養(yǎng)基斜面上，培養(yǎng)后經(jīng)過(guò) 純化和鑒別即得分離子 。 2）用選擇性培養(yǎng)基篩選分離子 我國(guó)進(jìn)行了不少霉菌雜交育種方面的工作。 60年代青霉素產(chǎn)生菌產(chǎn)黃 準(zhǔn)性 生殖的過(guò)程： ① 菌絲聯(lián)結(jié) ②異核體形成（質(zhì)配） ③核配形成雜合二倍體 ④體細(xì)胞交換和單倍體化 。 準(zhǔn)性生殖與有性生殖的比較 項(xiàng) 目 準(zhǔn)性生殖 有性生殖 參與接合的親本細(xì)胞 形態(tài)相同的體細(xì)胞 形態(tài)或生理上有分化的性細(xì)胞 獨(dú)立生活的異核體階段 有 無(wú) 接合后雙倍體細(xì)胞形態(tài) 與單倍體基本相同 與單倍體明顯不同 雙倍體變單倍體的途徑 通過(guò)有絲分裂 通過(guò)減數(shù)分裂 接合發(fā)生的幾率 偶然發(fā)現(xiàn)，幾率低 正常出現(xiàn)，幾率高
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