植物細胞工程復(fù)習(xí)-資料下載頁
2025-04-17 04:35本頁面
【正文】 倍體細胞的分裂。 花藥培養(yǎng)中再生植株的形成途徑與再生植株倍性有何關(guān)系？①胚狀體途徑；②愈傷組織途徑。幼胚培養(yǎng)的關(guān)鍵技術(shù)是什么？A、取材時期：球形胚至魚雷胚時期。 B、幼胚剝離：一個胚為一個植株，剝離成功與否是幼胚培養(yǎng)能否成功的關(guān)鍵。借助解剖鏡，剝離過程要保濕（幼胚半透明、高黏稠狀組織，易失水），操作快速。 C、接種培養(yǎng)：立即接種培養(yǎng)基中培養(yǎng)。 植物胚培養(yǎng)的意義?①克服雜交育種中雜種胚的早期夭折遠緣雜交常發(fā)生雜種不育現(xiàn)象：胚發(fā)育不良；胚乳發(fā)育不良；有時胚和胚乳間的障礙物質(zhì)阻礙了營養(yǎng)物質(zhì)的運輸?shù)?。②克服珠心胚干擾，提高育種效率 自然界中有些植物種子存在多胚現(xiàn)象如柑橘、芒果等。受精只產(chǎn)生的一個有性胚，珠心細胞發(fā)育成多胚。珠心胚干擾雜種胚的確定，珠心胚造成雜種胚夭折。通過幼胚培養(yǎng)可克服。③理論研究領(lǐng)域的應(yīng)用，如研究胚發(fā)育中胚乳的作用等。幼胚培養(yǎng)條件培養(yǎng)基：幼胚處于異養(yǎng)狀態(tài)，培養(yǎng)基不僅要完全的營養(yǎng)成分，對培養(yǎng)基滲透壓（4 12％蔗糖）。因原胚“浸沒”在高滲透壓的胚乳液中，若處低滲中，幼胚生長停頓或死亡。胚小→大，滲透壓高→ 低。激素水平：為控制胚性生長，促進胚發(fā)育成熟，要求生長素和細胞分裂素配合使用。低濃度GA和KT能促進幼胚早熟萌發(fā)， GA有時具有胚柄作用，GA是必需的。附加物：幼胚培養(yǎng)多處于異養(yǎng)階段，需胚乳和周圍的母體組織提供營養(yǎng)。常用復(fù)雜的天然植物提取物（胚乳提取物必不可少，椰乳、玉米胚乳和麥芽提取物等 ） ，它既含多種植物生長調(diào)節(jié)劑，又提供胚發(fā)育所需的豐富的營養(yǎng)物質(zhì)。 活性炭：通常加入培養(yǎng)基，吸收胚培養(yǎng)中釋放的有毒物或過量抑制胚生長的物質(zhì)，使胚順利發(fā)育成熟、成苗。光照：培養(yǎng)初期黑暗條件是必需的。黑暗時間與胚 發(fā)育時期有關(guān)，早期胚暗期長。如球型胚至心 形胚暗培養(yǎng)2周后光照。芥菜實驗，早期光照 不利胚根的發(fā)育，但胚芽發(fā)育需一定的光照。溫度：與該植物種子萌發(fā)溫度一致。第七章遺傳轉(zhuǎn)化：是指同源或異源的游離DNA分子(質(zhì)粒和染色體DNA)被自然或人工感受態(tài)細胞攝取，并得到表達的水平方向的基因轉(zhuǎn)移過程。直接轉(zhuǎn)化：將裸露的DNA直接導(dǎo)入植物細胞的轉(zhuǎn)化方法。裸露的DNA可以是全部或部分染色體，分離的DNA，也可以是基因工程質(zhì)粒。介導(dǎo)轉(zhuǎn)化：介導(dǎo)轉(zhuǎn)化是利用另一種生物來實現(xiàn)基因的轉(zhuǎn)入和整合。1．哪些因素會影響培養(yǎng)物的遺傳變異？（1）植物種類，或稱遺傳背景；（2） 材料來源，組織或器官； （3）繼代培養(yǎng)次數(shù)，次數(shù)增多則變異率增高。 （如香蕉繼代30代，染色體數(shù)量變異率 %，%。）培養(yǎng)條件引起新的異常：（1）培養(yǎng)基成分對染色體倍性變異的影響：如plopapus gracilis 培養(yǎng)物16條染色體的3個體細胞系，2，4－D的Ｂ５培養(yǎng)基，16條染色體的體細胞系逐步丟失染色體形成穩(wěn)定的 13 條染色體。（2）培養(yǎng)基成分引起不同倍性細胞的選擇分裂： 如豌豆根： 2，4D培養(yǎng)基→二倍體細胞分裂； 2 ，4D + KT + 酵母提取液培養(yǎng)基 → 四倍體細胞分裂。3）培養(yǎng)基物理狀態(tài)的影響： 懸浮培養(yǎng)→二倍體；半固化培養(yǎng)→四倍體。 誘變劑 （1）物理誘變劑： Ｘ射線、α射線、β射線、r射線和紫外線等。 （2） 化學(xué)誘變劑：甲基磺酸乙酯（ＥＭＳ），乙烯亞胺（ＥＬ），５－溴尿嘧啶（ＢＵＤＲ），吖啶橙。 ３、 誘變劑的劑量不同來源的細胞對誘變劑的敏感程度有差異。（1）細胞快速增殖時誘變處理，產(chǎn)生突變率最高；（2）游離的原生質(zhì)體對誘變劑的敏感性高于愈傷組 織細胞，但比葉肉細胞??；（3）化學(xué)誘變劑對原生質(zhì)體的毒性比物理因素大；（4）單倍體細胞比二倍體細胞更敏感等。 最適劑量：以半致死量多一些為宜。2． 體細胞無性系變異的誘導(dǎo)和選擇方法。直接選擇法：選擇條件下，新的突變表現(xiàn)型優(yōu)先生長，或可測定的其他可見的差異。分正選擇法和負選擇法 。 (1)正選擇法：細胞置于含特定物質(zhì)培養(yǎng)基上，如有毒 （如抗代謝物）或有害（如低溫）培養(yǎng)基上，野生型（正常）細胞不生長，突變體能生長。（2） 負選擇法：選擇培養(yǎng)基，正常生長細胞因吸收培養(yǎng)基中外加選擇劑而死亡，突變體不生長但也不死亡。用來篩選營養(yǎng)缺陷型與溫度敏感型等突變體。間接選擇法：無直接可供選擇的表型指標(biāo)，借助與突變表型有某種相關(guān)的特征作為間接選擇指標(biāo)。3．常見的基因轉(zhuǎn)化技術(shù)以及各自的優(yōu)缺點有哪些？直接轉(zhuǎn)化、介導(dǎo)轉(zhuǎn)化、原生質(zhì)體融合（ 1 ） 基因資源豐富：植物、動物和微生物等；（２）轉(zhuǎn)入的某性狀具連續(xù)性和整體性；（３）育種周期短，成本低；（４）基因育種具不污染環(huán)境等優(yōu)點
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