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2025-04-07 03:06本頁面
【正文】 f）硫酸溶液（100ml/L）：取100ml濃硫酸加入到800ml左右水中，混勻，冷卻后稀釋至1L：g）苯酚溶液（50g/L）：，加水溶解并稀釋至100ml，混勻。溶液置冰箱中可保存一月；h）葡聚糖標準儲備溶液：精密稱取分子量500000、加水溶解，并定容至50ml，混勻，置冰箱中保存。；i）葡聚糖標準使用液：，置于100ml容量瓶中，加水至刻度，混勻，置冰箱中保存。 儀器a）分光光度計：b）離心機；c）旋轉(zhuǎn)混勻器。 分析步驟 標準曲線制備：精密吸取葡聚糖標準使用液，0，，，（相當于葡聚糖0，，，）分別置于25ml比色管中，加入50g/，在旋轉(zhuǎn)混勻器上混勻，于旋轉(zhuǎn)混勻器上小心混勻，置沸水浴中煮沸2min，冷卻后用分光光度計在485nm波長處以試劑空白溶液為參比，lcm比色皿測定吸光度值。以葡聚糖濃度為橫坐標，吸光度值為縱坐標，繪制標準曲線。 樣品處理a）樣品提取：，置于100ml容量瓶中，加水80ml左右，于沸水浴上加熱2h，冷卻至室溫后補加水至刻度，混勻，過濾，棄去初濾液，收集余下濾液供沉淀粗多糖使用：b）沉淀粗多糖：精密取a），置于50ml離心管中，加入無水乙醇20ml，混勻后，以3000rpm離心5min，棄去上清液。殘渣用乙醇溶液數(shù)毫升洗滌，離心后棄上清液，反復操作3～4次。，混勻后，供沉淀葡聚糖使用；c）沉淀葡聚糖：精密取b）．溶液2ml置于20ml離心管中，、沸水浴中煮沸2min，冷卻后以3000rpm離心5min，棄去上清液。殘渣用洗滌液數(shù)毫升洗滌，離心后棄上清液，反復操作3次后，加水稀釋至刻度，混勻。此溶液為樣品測定液。 樣品測定，．，在旋轉(zhuǎn)混勻器上混勻后，置沸水浴中煮沸2min，冷卻至室溫后用分光光度計在485nm波長處，以試劑空白為參比，lcm比色皿測定吸光度值。從標準曲線上查出葡聚糖質(zhì)量，按公式（2）計算樣品中粗多糖含量，同時作樣品空白實驗。式中：X ——樣品粗多糖含量（以葡聚糖計），mg/g：W1——樣品測定液中葡聚糖的質(zhì)量，mg；W2——樣品空白液中葡聚糖質(zhì)量，mg；M ——樣品質(zhì)量，g；Vl——樣品提取液總體積，ml；V2——沉淀粗多糖所用樣品提取液體積，ml；V3——粗多糖溶液體積，ml；V4——沉淀葡聚糖所用粗多糖溶液體積，ml；V5——樣品測定液總體積，ml；V6——測定用樣品測定溶液體積，ml。 7
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