醫(yī)學(xué)微生物學(xué)與免疫學(xué)-資料下載頁
2025-04-04 23:15本頁面
【正文】 哪一類免疫反應(yīng) 測定結(jié)果是否正常，如不正常為什么？實驗七 凝集反應(yīng)一、實驗?zāi)康? 熟悉試管細菌凝集反應(yīng)的原理，操作方法及實用意義。二、實驗內(nèi)容 試管細菌凝集反應(yīng)三、實驗儀器、設(shè)備及材料 試管、菌液、吸管、受檢血清四、實驗原理 試管凝集試驗是細菌、紅細胞等顆粒性抗原與相應(yīng)抗體在試管中直接凝集的半定量試驗。多用以測定抗體。 五、實驗步驟 見下表(1)將待檢血清進行一系列倍比稀釋，并設(shè)抗原對照。（2）加一定量的診斷菌液（3）孵育，使細菌和抗體充分反應(yīng) （置35℃溫箱或水浴過夜或56℃水浴24小時）（4）觀察每個試管內(nèi)抗原的凝集程度，通常以產(chǎn)生明顯凝集現(xiàn)象（2+）的最高血清稀釋度為血清中抗體的效價。六、實驗報告要求記錄實驗過程及結(jié)果解釋。七、實驗注意事項 加樣一定要準確要有空白對照試驗，以防因診斷菌液不穩(wěn)定發(fā)生自凝或電解質(zhì)濃度及PH不適當可引起非特異性凝集而出現(xiàn)假陽性。八、思考練習(xí) 試管細菌凝集反應(yīng)的原理 怎樣判斷待測血清中抗體的效價？實驗八 瓊脂雙擴散試驗一、實驗?zāi)康? 熟悉瓊脂雙擴散試驗方法 理解AFP檢測的原理與意義。二、實驗內(nèi)容 瓊脂雙擴散試驗AFP檢測三、實驗儀器、設(shè)備及材料 玻璃片、瓊脂、打孔器、燒瓶、電爐、加樣器、AFP抗體、不同稀釋度的AFP溶液四、實驗原理 原理：將抗原和抗體分別置凝膠反應(yīng)板中自由擴散，當抗原與其對應(yīng)抗體在凝膠中相遇結(jié)合，若兩者比例合適便形成沉淀線。五、實驗步驟制板：取潔凈無痕載玻片平放于水平臺上，取已融化的1%瓊脂，輕輕傾注于玻璃表面，制成瓊脂板。注意瓊脂不宜太燙易溢出玻片，也不能太冷，太冷易結(jié)成凝塊。瓊脂內(nèi)不要有氣泡。打孔：瓊脂冷卻凝固后，可根據(jù)實際需要打孔，常用梅花形，一般孔距3—5mm，孔直徑3mm，打孔后用注射針挑去瓊脂心。加樣：中央孔加已知抗體，外圍六個孔中分別依次加不同稀釋度的待測抗原，每孔10ul。擴散：將瓊脂板置濕盒中，在37℃恒溫箱中擴散24小時觀察結(jié)果。六、實驗報告要求記錄結(jié)果：抗原抗體孔間出現(xiàn)白色沉淀線者為陽性，無沉淀線者為陰性。七、實驗注意事項 瓊脂質(zhì)量、濃度及加樣孔的大小對結(jié)果有較大影響，條件要統(tǒng)一，加樣量要準確。 為避免沉淀環(huán)變形，瓊脂板要保持水平位置，擴散溫度不能高于37176。C。 八、思考練習(xí) 瓊脂雙擴散法的原理 AFP檢測的意義。15 /
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