植物細(xì)胞工程課件第一章實驗室基本技術(shù)-資料下載頁
2025-01-20 07:37本頁面
【正文】 在 45℃ 下只能存活 1小時 ， 但在 25℃ 條件下仍然能慢速生長 ， 并維持長時間不死 ，甚至在 4℃ 下數(shù)小時后 ， 再置于適宜溫度下細(xì)胞仍然可以正常生長 。 動物細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境控制 2. pH 動物細(xì)胞培養(yǎng)適宜的 pH一般在 ， 低于 ， 嚴(yán)重時會導(dǎo)致細(xì)胞死亡 。 培養(yǎng)細(xì)胞對 pH的要求因培養(yǎng)時間長短有關(guān) ，一般原代細(xì)胞要求較嚴(yán)格 ， 而永久細(xì)胞系對 pH具有較強的忍耐性 。 3. 溶氧及氣體環(huán)境 一般細(xì)胞在培養(yǎng)初期要求較低的溶氧水平 ，而在對數(shù)生長期或培養(yǎng)后期 ， 對溶氧水平要求增加 ， 如果供氧不足 ， 將導(dǎo)致細(xì)胞缺氧而死亡 。 除了氧氣供應(yīng)外 ， 還應(yīng)注意培養(yǎng)基的氧氣和 CO2的平衡 。 4. 滲透壓 動物細(xì)胞培養(yǎng)滲透壓包括兩個方面的問題： ?一是培養(yǎng)基的滲透壓維持； ?二細(xì)胞體內(nèi)的滲透壓維持 。 大多數(shù)動物細(xì)胞對滲透壓的忍耐程度較強 ， 只要培養(yǎng)基的滲透壓變化不是很劇烈 ， 一般對培養(yǎng)物不會造成致命傷害 。 動物細(xì)胞滲透壓的維持一般采用平衡鹽溶液 。 外植體接種培養(yǎng) 植物離體培養(yǎng)類型： ※ 組織培養(yǎng) ※ 器官培養(yǎng) ※ 細(xì)胞培養(yǎng) ※ 原生質(zhì)體培養(yǎng) 植物材料的培養(yǎng)與外植體選取 外植體滅菌 接種培養(yǎng)及培養(yǎng)條件的控制 植物離體培養(yǎng)基本程序 外植體的來源 ※ 外植體 （ explant） 是指用于離體培養(yǎng)的活的植物組織 、 器官等材料 。 ※ 用于外植體分離的母體植物材料一般有三種來源： ? 一是生長在自然環(huán)境下的植物； ? 二是有目的地培育在溫室控制環(huán)境條件下生長的植物； ? 三是無菌環(huán)境下已經(jīng)過離體培養(yǎng)的植物 。 外植體取材 a. 根據(jù)培養(yǎng)需求選擇植物部位 b. 多年生植物注意樹齡和季節(jié) c. 在不影響培養(yǎng)目的的前提下盡可能選擇自然繁殖器官作外植體 外植體滅菌 外植體 清洗整理 殺菌劑滅菌 無菌水清洗 不同外植體 在滅菌劑濃度、 時間、程序上 應(yīng)有所區(qū)別 幾種常用消毒劑的效果比較 消 毒 劑 使用濃度 (%) 消毒時間 (min.) 效 果 殘液去除難易 次氯酸鈣 /納 10 5～ 30 好 易 新潔爾滅 10～ 20 5～ 30 好 易 氯化汞 ～ 1 2～ 10 最好 最難 過氧化氫 10～ 12 5～ 15 較好 最易 抗菌素 4～50mgl1 30～ 60 較好 較難 課后思考 ? 請思考細(xì)胞工程實驗技術(shù)與其它生物技術(shù)實驗不同之處。 ? 植物細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境控制應(yīng)注意哪些方面？ ? 動植物細(xì)胞培養(yǎng)基的主要成分分別包括哪些？ ? 就本章知識，分析動植物細(xì)胞培養(yǎng)的區(qū)別。
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