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離心分離ppt課件-資料下載頁

2025-01-15 06:09本頁面
  

【正文】 差異較大的顆粒。操作簡單方便,但分離效果較差。 19 20 差速離心 —— 工業(yè)上最常用的離心分離方法 菌體、細胞 大小 /μm 離心力 /g 實驗室 工業(yè)規(guī)模 大腸桿菌 24 1500 13000 酵母 27 1500 8000 血小板 24 5000 - 紅細胞 69 1200 - 淋巴球 712 500 - 肝細胞 2030 800 - 21 ? 2.密度梯度離心 ? 事先在離心管中用某種低分子溶質(zhì)調(diào)配好密度梯度,在密度梯度之上加待處理的料液后進行離心 ,使密度不同的組分得以分離的一種區(qū)帶分離方法。 ? 密度梯度系統(tǒng) 是在溶劑中加入一定的梯度介質(zhì)制成的。常用的有蔗糖、甘油等。使用最多的是蔗糖密度梯度系統(tǒng)。 22 ?密度梯度的制備可采用梯度混合器,也可將不同濃度的蔗糖溶液,小心地一層層加入離心管中,越靠管底,濃度越高,形成階梯梯度。 ?離心前,把樣品小心地鋪放在預(yù)先制備好的密度梯度溶液的表面。離心后,不同大小、不同形狀、有一定的沉降系數(shù)差異的顆粒在密度梯度溶液中形成若干條界面清晰的不連續(xù)區(qū)帶。各區(qū)帶內(nèi)的顆粒較均一,分離效果較好。 ? 在密度梯度離心過程中,區(qū)帶的位置和寬度隨離心時間的不同而改變。隨離心時間的加長,區(qū)帶會因顆粒擴散而越來越寬。為此,適當增大離心力而縮短離心時間,可減少區(qū)帶擴寬。 23 思考題 ? 1 按離心機轉(zhuǎn)速分,離心機有哪些種類?各自的適用范圍是什么? ? 2 離心操作應(yīng)注意控制哪些條件?離心轉(zhuǎn)速和沉降時間有何關(guān)系?
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