【正文】 定最低全致死濃度和最高全存活濃度，確定正式試驗(yàn)濃度范圍 ? 正式試驗(yàn) 57個(gè)濃度組，每缸 10尾， 96小時(shí)，設(shè)空白對(duì)照 36小時(shí)內(nèi)特別注意觀察，之后每 24h觀察一次，記錄 平衡、游動(dòng)、呼吸、體色變化 溫度、 pH、溶氧量 數(shù)據(jù)處理： 96hLC50,寇氏法、直線內(nèi)插法、計(jì)算機(jī)軟件 2021/11/11 農(nóng)藥環(huán)境安全性評(píng)價(jià) 93 魚類毒性試驗(yàn) 質(zhì)量控制 ? 空白對(duì)照死亡率不超過(guò) 10% ? 以重鉻酸鉀為參考物質(zhì)，斑馬魚試驗(yàn)， 24LC50必須處于2004— mg/L之間 ? 溶氧量不低于 ? 保證其他條件正常 2021/11/11 農(nóng)藥環(huán)境安全性評(píng)價(jià) 94 魚毒性評(píng)價(jià) LC50（ mg/L） 毒性級(jí)別 10 低毒 1~10 中毒 ~1 高毒 劇毒 2021/11/11 農(nóng)藥環(huán)境安全性評(píng)價(jià) 95 蛙類毒性試驗(yàn) ? 農(nóng)藥對(duì)蛙類的毒性測(cè)定，選用澤蛙的蝌蚪為試驗(yàn)材料。 ? 供試農(nóng)藥用制劑或原藥，對(duì)難于溶于水的農(nóng)藥，可用少量?jī)?nèi)酮與吐溫 80助溶，用量不得 。 ? 試驗(yàn)材料取自田間自然繁殖的蝌蚪，采回后先預(yù)養(yǎng)一天，再選健壯、個(gè)體均一的蝌蚪供試驗(yàn)用； ? 試驗(yàn)容器為直徑 18cm、高 9cm的玻璃缸，加入 1000ml試液，每個(gè)處理投放 10頭蝌蚪，重復(fù)三次。 ? 正式試驗(yàn)前先用預(yù)試。然后在最高安全濃度與最低全致死濃度范圍之間按等比級(jí)差設(shè) 57個(gè)處理，并設(shè)空白對(duì)照，試驗(yàn)在自然氣溫條件下進(jìn)行。 ? 試驗(yàn)開始后 24小時(shí)、 48小時(shí)觀察記錄蝌蚪的死亡率， ? 用概率統(tǒng)計(jì)法求出 LC50值與 95%的可信限值。 ? 農(nóng)藥對(duì)蛙類的毒性分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)，可參照魚類的毒性分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)。 2021/11/11 農(nóng)藥環(huán)境安全性評(píng)價(jià) 96 蚯蚓毒性試驗(yàn) ? 為了使試驗(yàn)結(jié)果具有可比性，采用人工配制的標(biāo)準(zhǔn)土壤作為試驗(yàn)材料，將農(nóng)藥按一定的級(jí)差，配成 57個(gè)等級(jí)，分別均勻地加入 1公斤土壤中，調(diào)節(jié)到一定的濕度后，裝于 2升的培養(yǎng)缸中。 ? 每個(gè)處理養(yǎng)入個(gè)體大小相近的健壯蚯蚓 10條，在 20177。 2℃和有適量光照條件下進(jìn)行試驗(yàn)。 ? 供試農(nóng)藥用制劑或純品，對(duì)難溶于水的農(nóng)藥，可用丙酮助溶。拌入土壤后先將丙酮揮發(fā)掉后再做試驗(yàn)。 ? 蚯蚓的毒性試驗(yàn)需連續(xù)進(jìn)行 14天，于第 7與 14天時(shí)測(cè)定蚯蚓的死亡率，用概率法求半致死濃度 LC50與 95%的可信限值。 ? 上述方法得到的試驗(yàn)結(jié)果，建議按照 LC50值的大小將農(nóng)藥對(duì)蚯蚓的毒性劃分為三個(gè)等級(jí)： 1ppm的為高毒農(nóng)藥，110ppm的為中毒農(nóng)藥， 10ppm的為低毒農(nóng)藥。 2021/11/11 農(nóng)藥環(huán)境安全性評(píng)價(jià) 97 土壤微生物毒性試驗(yàn) ? 本試驗(yàn)用測(cè)定土壤微生物呼吸強(qiáng)度的方法，評(píng)價(jià)施用農(nóng)藥后對(duì)土壤微生物總活性影響的指標(biāo)。 ? 供試土壤要用兩種有代表性的新鮮土壤，并要提供 pH 值、有機(jī)質(zhì)、代換量、土壤質(zhì)地等數(shù)據(jù)。 ? 供試農(nóng)藥最好用制劑，也可用原藥或純品。每種土壤設(shè) 1ppm、 10ppm、 100ppm 三組不同濃度處理，并設(shè)空白對(duì)照，每組重復(fù)三次。難溶于水的農(nóng)藥，可用丙酮助溶。 2021/11/11 農(nóng)藥環(huán)境安全性評(píng)價(jià) 98 土壤微生物毒性試驗(yàn) ? 將藥液先與少量土混勻，待丙酮發(fā)凈后，再均勻拌入到處理的土壤中。每個(gè)處理用土 50克，將土壤含水量調(diào)節(jié)成田間持水量的 60%，裝于 100ml 小燒杯中，與另一個(gè)裝有標(biāo)準(zhǔn)堿液的小燒杯一起臵于 2 升容積的密閉瓶中，于25177。 1℃ 的恒溫箱中培養(yǎng)。 ? 試驗(yàn)開始后的第 15天時(shí)更換出密閉瓶中的堿液測(cè)定吸收的 CO2 含量。當(dāng)打開密閉瓶更換堿液時(shí)，同時(shí)更換了密閉瓶中的空氣，以保證密閉瓶中的氧壓維持在一定水平。 ? 用土壤中 CO2 釋放量的變化，反映土壤微生物受農(nóng)藥抑制的程度，并以此為依據(jù)，建議將農(nóng)藥對(duì)土壤微生物的毒性劃分成以下三個(gè)等級(jí)：用 1ppm處理土壤，在 15天內(nèi)抑制值 50%的為高毒農(nóng)藥；用 10ppm處理的土壤，抑制值50%的為中毒的農(nóng)藥；抑制值 50%的為低毒農(nóng)藥 2021/11/11 農(nóng)藥環(huán)境安全性評(píng)價(jià) 99 水蚤毒性試驗(yàn) ? 試驗(yàn)用的蚤種選用常用的大型蚤（ Daphnia magna），蚤齡 624 小時(shí)，試驗(yàn)水用脫氯后的自來(lái)水，標(biāo)明水質(zhì)指標(biāo)，以綠藻（小球藻、柵列藻）為飼料，用靜態(tài)方法培養(yǎng)。 ? 試驗(yàn)用的農(nóng)藥用純品，也可用制劑。難溶于水的農(nóng)藥，可用少量低毒的丙酮與吐溫 80助溶，加入量不得 ，試驗(yàn)液的濃度按級(jí)差設(shè) 57 個(gè)組。另設(shè)一對(duì)照組，每組用水蚤 20只，分 4槽，每槽 5 只。 ? 槽中藥液用量不得 2ml/ 只蚤。試驗(yàn)期不投食，對(duì)照組中水蚤的死亡率應(yīng)控制在 10% ，試驗(yàn)在 22177。 2℃ 的條件下觀察 48 小時(shí)。 ? 判斷水蚤死亡的標(biāo)準(zhǔn)，在顯微鏡下觀察，心臟停止跳動(dòng)為依據(jù)，記錄 24小時(shí)與 48小時(shí)的死亡數(shù)，用概率統(tǒng)計(jì)法求出 LC50與 95% 的可信限值。 ? 農(nóng)藥對(duì)水蚤的毒性等級(jí)劃分標(biāo)準(zhǔn)，可參照魚類的等級(jí)標(biāo)準(zhǔn)。 2021/11/11 農(nóng)藥環(huán)境安全性評(píng)價(jià) 100 藻類毒性試驗(yàn) ? 國(guó)際上供農(nóng)藥毒性試驗(yàn)用的藻種有月牙藻、柵列藻、小球藻等，這些藻種在我國(guó)都有廣泛分布。建議統(tǒng)一用柵列藻作為試驗(yàn)材料。 ? 試驗(yàn)用的玻璃容器均需高溫滅菌，選擇合適的培養(yǎng)液作為試驗(yàn)用水（如水生 6 號(hào)培養(yǎng)液）。 ? 供試的農(nóng)藥用純品，必要時(shí)也可用制劑。難溶于水的農(nóng)藥可用丙酮與吐濕 80助溶，用量不得 。 ? 試驗(yàn)用的農(nóng)藥溶液按級(jí)差設(shè) 57 個(gè)組，另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照。開始時(shí)試驗(yàn)液中的藻量控制在 105 個(gè)細(xì)胞 /ml左右， pH 177。 ，水溫 22177。 2℃ ，連續(xù)光照（光強(qiáng) 4000勒克斯），采用振搖或間歇振搖下培養(yǎng) 96小時(shí)，于 2 4 7 96小時(shí)時(shí)取出少量培養(yǎng)液，測(cè)定藻數(shù)變化，用概率統(tǒng)計(jì)法求出相應(yīng)時(shí)間內(nèi)的半抑制濃度 EC50與 95%的可信限值。 2021/11/11 農(nóng)藥環(huán)境安全性評(píng)價(jià) 101 我國(guó)農(nóng)藥登記管理對(duì)農(nóng)藥環(huán)境安全性的要求 ? 按照登記階段 臨時(shí)登記 正式登記 登記后 2021/11/11 農(nóng)藥環(huán)境安全性評(píng)價(jià) 102 臨時(shí)登記階段 ? 制劑 根據(jù)農(nóng)藥特性和用途，至少應(yīng)提供由我國(guó)登記主管部門認(rèn)證或認(rèn)可試驗(yàn)單位出具的制劑對(duì)魚、鳥、蜜蜂、家蠶的毒性實(shí)驗(yàn)資料。 ? 原藥 根據(jù)農(nóng)藥的特性和使用特點(diǎn)，原藥要求提供有關(guān)的環(huán)境行為特征資料。 2021/11/11 農(nóng)藥環(huán)境安全性評(píng)價(jià) 103 正式登記階段 ? 原藥完整的環(huán)境化學(xué)、環(huán)境行為特征資料（七項(xiàng)）： ? 1） 揮發(fā)作用 ? 2） 土壤吸附作用 ? 3） 淋溶作用 ? 4） 土壤降解作用 ? 5） 水解作用 ? 6） 光解作用 ? 7） 生物富集作用 2021/11/11 農(nóng)藥環(huán)境安全性評(píng)價(jià) 104 正式登記階段 ? 制劑環(huán)境生態(tài)的資料（八項(xiàng)） ? 1）鳥類毒性 ? 2）蜜蜂毒性 ? 3）天敵毒性（赤眼蜂、蛙類） ? 4）魚類毒性 ? 5）水生生物毒性（水蚤、藻類） ? 6）家蠶毒性（根據(jù)農(nóng)藥性質(zhì)和用途而定） ? 7）蚯蚓毒性和土壤微生物影響（土壤處理） ? 8）主要后茬作物敏感性（高活性除草劑：如 ? 磺酰脲類等） ? 對(duì)環(huán)境有明顯影響的農(nóng)藥，提供其對(duì)環(huán)境影響的補(bǔ)充資料 （如：蝦、蟹，地下水影響等） 2021/11/11 農(nóng)藥環(huán)境安全性評(píng)價(jià) 105 特殊產(chǎn)品 生殺蟲劑： 原藥提供光解、水解和吸附作用資料，室內(nèi)用制劑提供家蠶毒性試驗(yàn)資料，室外用制劑提供對(duì)主要水生生物的毒性及水中滯留性試驗(yàn)資料 殺鼠劑 ：臨時(shí)登記，提供鳥、禽、畜的毒性資料；正式登記，全面噴灑的提供全部的環(huán)境生態(tài)試驗(yàn)資料（環(huán)境行為特征和環(huán)境生態(tài)）。 生物化學(xué)農(nóng)藥 （信息素、激素、酶） 臨時(shí)登記時(shí)提供環(huán)境生態(tài)毒性資料；正式登記時(shí)提供環(huán)境行為特征試驗(yàn)資料。 2021/11/11 農(nóng)藥環(huán)境安全性評(píng)價(jià) 106 登記后管理 發(fā)現(xiàn)問(wèn)題，繼續(xù)試驗(yàn)，決定產(chǎn)品管理政策 ? 菊酯類農(nóng)藥 ? 涕滅威對(duì)地下水污染 ? 克百威對(duì)地下水污染、對(duì)鳥類毒性 2021/11/11 農(nóng)藥環(huán)境安全性評(píng)價(jià) 107 ？ 2021/11/11 農(nóng)藥環(huán)境安全性評(píng)價(jià) 108 謝謝