病毒的遺傳與變異ppt課件-資料下載頁
2025-01-05 13:55本頁面
【正文】 變化對鈍化劑的敏感性、使蛋白或核酸電泳遷移率變化等 其它性狀變異 (現(xiàn)象） 毒力變異： 細胞水平、機體水平、生物群體水平 抗原變異 免疫原性、抗原結(jié)構(gòu)、結(jié)合力 培養(yǎng)性狀變異 蝕斑、空斑形態(tài)和性質(zhì) 對理化因素抵抗力的變異 對溫度、射線、化學(xué)劑的感受性等 ? 自然條件下不感染或不易感染的異種動物 /細胞的適應(yīng)性變異 強毒株 —— 新宿主癥狀輕 —— 連續(xù)傳代 —— 新宿主癥狀重 （往往對原宿主的 毒力降低成為弱毒株） ? 適應(yīng)性變異原理： ? 宿主細胞的選擇性結(jié)果 ? 病毒對不易感宿主的適應(yīng) ? 如流感病毒有甲乙丙三個型，其中甲型中有 15個 HA亞型、9個 NA亞型，各個型之間往往不能相互免疫。 三、病毒變異的研究方法 （一）病毒純化 蝕斑（空斑）分離法 病斑分離法 終點稀釋法 ? 選取組織 —— 消毒 —— 酶解 —— 洗滌 —— 培養(yǎng)單層細胞 ——接種病毒 —— 保溫培養(yǎng) —— 空斑觀察 —— 單斑再分離 ? 病毒高倍稀釋，如每一稀釋度接種 5管細胞培養(yǎng)物： 如 107 全有病斑； 108中 3管有病斑； 109全無病斑 則 108管為終點，有條件地認為是一個或少數(shù)幾個病毒顆粒的后代。廣泛用于毒株的純化和變異株選育 （二）、獲得變異株的途徑 從自然變異中選取 溫度誘變 輻射誘變： 紫外線、 X射線、 r射線 化學(xué)誘變 （ 1） 堿基替代 ： 5溴尿核苷、氨基嘌呤等 （ 2） 作用核酸 ： 亞硝酸、羥胺和各種烷化劑 （三）、病毒的遺傳指標 病毒顆粒的形態(tài) 抗原構(gòu)造及血清學(xué)性狀 蝕斑或空斑的大小和性狀 致細胞病變的特征 病原性（包括感染范圍和毒力） 對理化因素的抵抗力 對干擾素的敏感性 植物病毒的遺傳指標 血清學(xué)反應(yīng) 交叉保護作用 傳播方式 寄主范圍 癥狀類型 對理化性狀的穩(wěn)定性 四、病毒的遺傳學(xué)研究 ? 傳統(tǒng)方法： 突變體的分離及分析 ? 分子遺傳學(xué)方法： ?代謝抑制劑進行生化分析構(gòu)建遺傳圖譜 ?高分辨率電泳技術(shù)分析病毒蛋白或核酸的遺傳多態(tài)性 ?其他分子生物學(xué)技術(shù) 病毒基因功能的研究方法 ? 互補試驗 用成對病毒突變體混合感染，一種病毒為另一種病毒提供了其必需但又缺陷的基因產(chǎn)物，從而促進其增殖，或者兩種病毒互為對方提供所必需的基因產(chǎn)物，能促進雙方的增殖?；パa過程中，感染病毒的基因型都沒有改變。 ? 利用分離基因研究病毒基因功能 ? 用克隆序列進行互補試驗 ? 轉(zhuǎn)染后的瞬時表達 病毒表達載體 ? 由于一些病毒可以感染動物和人類的特異組織細胞，利用這些病毒構(gòu)建外源基因表達載體，用于人類一些特殊疾病的基因治療，前景誘人。 ? 病毒載體提供了一個病毒或細胞基因進入哺乳動物細胞的極好工具。 ? 優(yōu)點： 能引導(dǎo)多拷貝目的基因進入幾乎每個培養(yǎng)細胞。動物病毒載體既能穩(wěn)定地表達基因，也能瞬時表達基因。 ? 經(jīng)常用于瞬時表達的病毒載體主要來源于 裂解性病毒，如：乳多空病毒、腺病毒、痘病毒和皰疹病毒等 本章要點 ? 了解病毒突變體的類型 ? 病毒之間的遺傳互作與非遺傳互作 ? 有關(guān)概念 ? 了解病毒遺傳學(xué)研究的方法
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