醫(yī)學(xué)]中國藥科大學(xué)新藥篩選中心細胞培養(yǎng)基礎(chǔ)知識培訓(xùn)材料-資料下載頁
2025-01-04 07:56本頁面
【正文】 用非動物 /人來源的原料制造 ?有利于準(zhǔn)確闡述細胞功能 , 更好控制生理反應(yīng) ?降低成本，控制污染 無血清培養(yǎng)基產(chǎn)品體系 五大細胞培養(yǎng)平臺： CHO Cell (倉鼠卵巢細胞 ) Hybridoma and Myeloma Cell (雜交瘤和骨髓瘤細胞 ) HEK 293 and 174。 Cell Culture Insect Cell Culture (昆蟲細胞） Viral Vaccine Cell Culture(病毒生產(chǎn)用細胞 ) 細胞培養(yǎng)添加劑 amp。 丙酮酸鈉 青霉素 /鏈霉素溶液 SV30010 根據(jù)細胞而定 6. HEPES 胰酶 Trypsin ? 用途：用于貼壁細胞的消化，使貼壁生長的細胞重新懸浮起來，以便傳代 ? 含或不含 EDTA, 根據(jù)細胞和實驗要求選擇 平衡鹽溶液 ? 平衡鹽溶液主要是由無機鹽、葡萄糖組成； 它的作用是維持細胞滲透壓平衡，保持 pH穩(wěn)定及提供簡單的營養(yǎng)； ? 用于取材時組織塊的漂洗、細胞的漂洗、配制其他試劑等 PBS 磷酸鹽緩沖液 DPBS（ Dulbecco’ s PhosphateBuffered Salines） Earle’ s 平衡鹽 Hank’ s 平衡鹽 常見問題處理 1. 如果細胞培養(yǎng)基偶然被凍，應(yīng)該融化培養(yǎng)基并觀察是否有沉淀產(chǎn)生。如果沒有沉淀產(chǎn)生，培養(yǎng)基可以正常使用，如果出現(xiàn)沉淀，只能丟棄這些培養(yǎng)基。 2. 當(dāng)在無血清培養(yǎng)基中添加抗生素時，降低至少在有血清培養(yǎng)基中所使用濃度的 50%。血清蛋白會結(jié)合和滅活一些抗生素。在無血清培養(yǎng)條件下，抗生素不被滅活，可能對于細胞達到毒性水平。 3次，如果次數(shù)更多都會在包含蛋白的溶液引起一定水平的降解和沉淀，將會影響它的性能。 4. 在溶解的一周內(nèi)使用貯存在 4℃ 冰箱中的液體胰蛋白酶溶液。胰蛋白酶在 4℃ 就可能開始降解，如果在室溫下放置超過 30分鐘，就會變得不穩(wěn)定。 5. 產(chǎn)品說明在超過指定的貯存期的一段時間內(nèi)，產(chǎn)品仍然在可接受的范圍內(nèi)，但是由于在超過指定的效期后，產(chǎn)品的性能和穩(wěn)定性沒有檢測，我們不推薦使用過了效期的產(chǎn)品。 細胞生長不好 ? 細胞本身的狀態(tài) ?細胞的接種量：接種量過低，細胞生長緩慢 ?細胞傳代時間過晚：細胞中毒，影響傳代后的細胞生長 ?胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細胞死亡；時間過短，細胞未完全分離而成團，細胞死亡 ? 細胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速溶 ? 污染 支原體污染 ? 合適的培養(yǎng)基及培養(yǎng)環(huán)境 更換血清批次需事先驗證
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