研究生分子醫(yī)學(xué)實驗技能實驗三-資料下載頁
2025-10-07 19:53本頁面
【正文】 法得到含有重組 DNA的陽性克隆。 篩選的依據(jù)： 基因載體的特點 、 受體細胞的特性和外源基因的表達 。 篩選的方法： 抗藥性標(biāo)志的選擇 插入表達篩選 ?半乳糖苷酶系統(tǒng)篩選 （ ?互補 ） (?半乳糖苷酶能將 Xgal轉(zhuǎn)變?yōu)椴蝗苄缘纳钏{沉淀 ） (插入失活法 ) 抗藥性標(biāo)記選擇 目 錄 菌落雜交篩選法 內(nèi)切酶圖譜鑒定 PCR篩選重組子 Southern印跡雜交和菌落原位雜交 DNA序列分析 免疫化學(xué)檢測法 原理：基因載體上含有 223。半乳糖苷酶（ LacZ)的基因，當(dāng)外源 DNA插入到載體的 LacZ基因上后將造成 223。半乳糖苷酶失活，就不能分解培養(yǎng)基中的 Xgal(5溴 4氯 3吲哚 223。D半乳糖苷）產(chǎn)生藍色產(chǎn)物，結(jié)果可通過大腸桿菌轉(zhuǎn)化子菌落在含有 XgalIPTG（異丙基 223。D硫代半乳糖苷）培養(yǎng)基的顏色變化直接觀察出來。 藍白斑實驗 α 互補的檢測 目 錄 U6 pUC119 含載體pUC119的藍色菌落 含 pUC119 u6的白色菌落 pUC119 u6
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