花生中植物螯合肽pc的研究__本科畢業(yè)論文-資料下載頁
2025-05-19 10:59本頁面
【導(dǎo)讀】使用，使得重金屬對水體，土壤的污染愈來愈嚴(yán)重，而在植物的器官中累積的重金屬，最終經(jīng)過食物鏈迫害人類。利用植物減輕重金屬污染是國內(nèi)外研究開發(fā)的熱點。研究發(fā)現(xiàn)鎘被人體吸收后，其它臟器例如胰、脾、甲狀腺和毛。發(fā)等也會累積一定量。鎘在體內(nèi)可與含氨基、羥基、硫基的蛋白質(zhì)分子結(jié)合，抑制許。多酶系統(tǒng)，從而使肝、腎器官中酶系統(tǒng)的正常功能受阻。由于鎘會損傷腎小管，病人。會出現(xiàn)糖尿、蛋白尿和氨基酸尿的癥狀。更嚴(yán)重的會使使骨骼的代謝受阻，造成骨質(zhì)。疏松、萎縮等一系列癥狀，鎘的危害已經(jīng)受到人們極大地關(guān)注。相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀來測定花生中植物螯合肽的含量。在以上的實驗條件下，檢出限為；線性范圍。分布在(R2=)之間，回收率在80%以上，靈敏度相對較高。屬鎘污染的花生中都檢出不同濃度的植物螯合肽。本實驗的目的在于為重金屬鎘污染的減弱做一份貢獻。
【正文】 條件 選用正離子模式，負離子形式分別掃描濃度為 /L 的 PC 標(biāo)準(zhǔn)溶液，證實PC4 在負離子模式下信號反應(yīng)很弱，在正離子模式下反應(yīng)信號比較靈敏。優(yōu)化正離子 9 掃描條件下 各種條件，例如錐電壓為 ： 25 V； 噴霧電壓為 ： kV； 溶劑氣體溫度的去除： 350℃ ； 采樣錐電壓 ： 20 V； 透鏡電壓 V； 錐孔溫度為 ： 105℃ ； 脫溶劑氣流量為 ： 110m L/h ； 全掃描范圍 m /z 為 ： 5001200，反吹氣流量為 ： 80m L /h。圖 為條件優(yōu)化以后 PC4 的總離子流圖，圖 為 PC4 化合物在正離子模式下的掃描質(zhì)譜圖。 圖 PC 的總離子流圖 圖 正離子質(zhì)譜圖 10 PC4 分子式為 (γG l uCys) 4βA la ，分子量為 。從圖 6b 可以得出 ， 信號反應(yīng)最強的是 m/z1018 的 [M ]+母離子峰 ； m /z 698 的是 [MGluCysAla]+離子峰， m/z 929 的為 [MAla]+離子峰，均為斷裂峰 ； m/z1019 為 [M + H ]+離子峰， m /z 521 為[M+H+ Na]2 +離子峰 ， m /z 1056 為 [M H + K ]+離子峰 ， 大概是由于環(huán)境，樣品和容器含鉀， N 和其他堿金屬，由于去除堿金屬樣品存在困難，所以在質(zhì)譜， K 離子 往往 往 作為一個特征離子。 線性范圍和檢出限 將 PC 標(biāo)準(zhǔn)溶液稀釋成濃度為 、 、 5 .0、 和 /L 的梯度溶液，用色譜 質(zhì)譜方式測定，橫坐標(biāo)用標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度表示，縱坐標(biāo)用峰面積表示，繪制這個條件下標(biāo)準(zhǔn)線性回歸曲線。當(dāng)濃度為 － ，線性方程為 y = + 80275（ r=） 當(dāng)信噪比 S/N=3 時，儀器檢出限為 /L，定量限為 /L。 回收率和精密度 選用統(tǒng)一花生樣品進行重復(fù)的精密度實驗，同時設(shè)置試劑作為空白，結(jié)果見表 ， 結(jié)果表明， 本方法對濃度 水平為 /kg 的樣品中 ，測定的 PC4 平均回收率達 % ； 相對標(biāo)準(zhǔn)偏差達 %。表格 反映了回收率與精密度分析的結(jié)果 。 表格 實驗的回收率與精密度的分析結(jié)果 ( n = 3) NUMBER 分析結(jié)果 mg/kg 回收率 (%) RSD 1 2 3 實際花生樣品的分析 選用 HPLCMS 檢測方法，在兩種不同鎘水平下測定了兩個花生品種。實驗結(jié)果表明，花生樣品均有不同濃度的 PC4 化合物的發(fā)現(xiàn)，表 是測定結(jié)果， PC4 花生樣品譜圖如圖 所示。文獻表明，含（ γ谷氨酸 半胱氨酸）植物螯合肽的 Nβ丙氨酸肽鏈結(jié)構(gòu)，有豆類，但沒有報告花生中包含植物螯合肽。本實 驗建立了獨特的檢測方 11 法被證明花生含有丙氨酸 類 PC 化合物。 表 花生樣品中植物螯合肽測定結(jié)果 第 1組 PC4含量 (mg/kg) 第 2組 PC4含量 （ mg/kg） 圖 花生樣品中 PC4的質(zhì)譜圖 12 第 3 章 結(jié)論 實驗結(jié)論 植物螯合肽在花生里存在 ，而且主要以 PC4 的形式存在；植物螯合肽可以螯合多種重金屬離子，在花生中，對金屬鎘的螯合能力最強； 關(guān)與測定方法，目前 有： 液相色譜法，分光光度比色法，凝膠過濾法，毛細管電泳法比較被認可，而液相色譜法測定方法應(yīng)用最廣，選用 mBBr 柱前衍生與高效液相色譜測定 PC 則更簡單，重現(xiàn)性更好，靈敏度更高 ， 也具有較好的分離能力 。 研究展望 本研究性實驗在先前的基礎(chǔ)上進行了進一步的研究，還有好多工作需進一步研究。前期實驗已經(jīng)證明豆科植物及花生中植物螯合肽的存在， 而且 螯合肽的種類主要以 PC4 的形式存在， 螯合肽 PC 的生成受哪些基因調(diào)控，或者細胞所處周期時間不同會不會影響 PC 的種類，有待我們進一步驗證。 13 參考文獻 [1]張紅 ,王艷紅 ,王 珊珊 .高效液相色譜 質(zhì)譜法測定花生中的螯合肽 [J].分析化學(xué)簡報 ,20xx,37(6):881883. [2] 張靜 ,常青曉 ,孫傳范 ,段桂蘭 .HPLC 法測定鎘和砷脅迫下水稻根系的植物螯合肽 [J].環(huán)境科學(xué)學(xué)報 ,20xx,31(7):15501555. [3] 婁來清 ,沈振國 .金屬硫蛋白和植物螯合肽在植物重金屬耐性中的作用 [J].生物學(xué)雜志 ,20xx,18(3):14. [4] 李安明 ,李德華 ,鄧青云汪宜宇 .植物螯合肽合成酶的研究進展 [J].植物生理學(xué)報 ,20xx,47(1):2736. [5] 蔡保松 ,雷梅 ,陳同斌 ,張國平 ,陳陽 .植物螯合肽及其在抗重金屬脅迫中的作用[J].生態(tài)學(xué)報 ,20xx,13(3):21272131. [6] 全先慶 .植物鰲合膚及其功能 [J].生命的化學(xué) ,20xx,27(3):213215. [7] 姜瑛楠 .重金屬鎘污染 [J].植物生態(tài)學(xué)報 ,20xx,29(4):65966. [8] 蔡保松 ,雷梅 .土壤砷污染對蔬菜砷含量食用安全性的影響 [J].生態(tài)學(xué)報 20xx,23(10):21252132. [9]張玉秀 ,柴團耀 .植物耐重金屬機理研究進展 [J].植物學(xué)報 ,1999， 41(5):453457. [10] 茹炳根 ,潘愛華 .金屬硫蛋白 [J].分析化學(xué)簡報 1991,18(4):254259. 14 致謝
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