【導(dǎo)讀】檢疫性植物病毒的檢驗方法。了解檢疫性植物病毒的種類、分布及重要性，分子生物學檢測技術(shù)。植物病毒對鑒別寄主或指示植物的特異反應(yīng)。3～5種不同反應(yīng)類型的寄主植物。例1，TMV和CMV在田間煙草植株上都呈花葉癥，通過下列三種植物的接種來確定。在DNA和RNA之間進行，依據(jù)是。在一定的條件下，RNA--DNA形成。異質(zhì)雙鏈的過程稱為雜交。針為互補cDNA也稱為cDNA探針。植物病毒分子探針具專一性強、靈敏度高、分子探針的長度一般在500～1500核苷酸。種病害的檢驗措施。至今已有30多個國家和地區(qū)發(fā)現(xiàn)有該病毒，桃樹和李屬其它樹種上的癥狀（桃樹黃芽。形的叢生葉，成淺黃色而死亡。葉片褪綠，葉芽發(fā)育推遲，落葉提。懸鉤子上的癥狀：植株矮化，小果并減產(chǎn)，三年有10％～80％的果枝死亡。接種的煙葉和黃瓜子。二者血清學性質(zhì)有差異。煙草株系：以煙草環(huán)斑病毒2號為代表，是典型株系。發(fā)生在溫室的煙草幼苗，主要分布在美國東部。

　　

【正文】 ④綜合防治：一旦發(fā)生穿孔線蟲病，可采用“熱、毒、餓”綜合治理措施。熱就是將發(fā)病的蕉頭、蕉根集中煮沸半小時或挖一個大坑，切碎蕉頭，深埋高溫漚制。毒就是將病田土壤用殺線劑，如呋喃丹、益舒寶，米樂爾等進行消毒處理。餓就是病田堅持休耕 2－ 3年，休耕期間定期一個月噴 1－ 2次除草劑，要求不長雜草，使可能殘留在土壤中的極少線蟲，由于缺乏營養(yǎng)而死亡。 松材線蟲 Pine wilt nematode 分布： 1905年在日本長崎、九州及其周圍發(fā)生，目前主要發(fā)生于美國、墨西哥、加拿大、德國、意大利、葡萄牙、朝鮮、日本、韓國和我國臺灣、香港、澳門、江蘇、安徽、廣東、山東、浙江、湖北、上海等地。 寄主 ： ?主要危害松屬植物，也侵染冷杉屬、云杉屬、雪松屬和落葉松屬等。 ?最感病的樹種是日本赤松、日本黑松、硫球松、歐洲赤松和歐洲黑松等。 ?中國自然高感樹種是日本黑松，也有一定數(shù)量的馬尾松自然發(fā)病。 危害和重要性： 又稱松樹萎蔫病，是松樹的一種毀滅性流行病。是國際國內(nèi)重要的檢疫對象，屬于危及國家生態(tài)安全的重大病害。松樹一旦感染該病，最快的40天左右即可枯死， 3－ 5年間便造成大面積毀林的惡性災(zāi)害。在日本， 1979年損失木材 240萬立方米，我國于 1982年，在南京發(fā)現(xiàn)該病害，當年死樹僅 200多株，到 1984年累積 5萬多株， 1986年達 21萬株。我國政府把該病害列為二類危險性有害生物。 該病的毀滅性在于： 致病力強，寄主死亡速度快；傳播快，且常常猝不及防；一旦發(fā)生，治理難度大。 據(jù)不完全統(tǒng)計，我國自 1982年發(fā)生該病后的 10年間，發(fā)生面積約達 38000hm2，造成松樹死亡 1400000株以上，損失木材 50000m3。用于病害的防治經(jīng)費達 645萬元 。不僅給國民經(jīng)濟造成巨大損失，也破壞了自然景觀及生態(tài)環(huán)境，更對我國松林資源構(gòu)成嚴重威脅。 癥狀： 任何樹齡均可發(fā)病。外部癥狀是針葉陸續(xù)變?yōu)辄S褐色乃至紅褐色，萎蔫，最后整株枯死。 病害發(fā)展過程分 4個階段： （ l）松樹外觀正常，樹脂分泌減少蒸騰作用下降，在嫩枝上往往可見松褐天?？惺硺淦さ暮圹E； （ 2）針葉開始變色，樹脂分泌停止，除松褐天牛補充營養(yǎng)的痕跡外，還可發(fā)現(xiàn)產(chǎn)卵刻槽； （ 3）大部分針葉變?yōu)辄S褐色，萎蔫，可見松褐天牛的蛀屑； （ 4）針葉全部變?yōu)辄S褐色至紅褐色，病樹整株干枯死亡。 致病機制 ： 線蟲從傷口進入松樹木質(zhì)部，寄生在樹脂道中，大量繁殖后遍及全株，導(dǎo)致松樹木質(zhì)部內(nèi)髓射線薄壁組織細胞受到破壞，管胞形成受到抑制，水分輸導(dǎo)受阻，呼吸作用加強，樹脂分泌減少至最后停止，蒸騰作用減弱直至松樹迅速死亡。 病原線蟲： 嗜木質(zhì)傘滑刃線蟲 Bursaphelenchus xylophilus （ Steiner amp。 Buhrer） Nikle 分類地位 ：動物界 Animal 圓形動物門Nemathelminthes 線蟲綱 Nematoda 墊刃目Tylenchida 滑刃線蟲科 Aphelenchoididae 傘滑刃屬 Bursaphelenchus 形態(tài)特征 ：雌雄同形，蠕蟲狀。 雌成蟲 ：細長，唇區(qū)隆起，無唇環(huán)，口針基部稍膨大，食道滑刃型，中食道球大，食道腺覆蓋腸端，排泄孔位于食道和腸交界處，神經(jīng)環(huán)正好在中食道球下面；陰門前部有陰門蓋覆蓋著，后陰子宮囊很長，尾部寬園，少數(shù)有指狀突。 雄成蟲 ：交合刺大型，弓形， 1對，不愈合，有喙狀突起，尾弓形，末端尖銳，有交合傘，無引帶，有卵圓形的尾翼尾部還有兩對尾突。 生物學特性： 發(fā)育溫度范圍 ～ 33 ℃ ，在 25 ℃ 下 4～ 5d完成生活周期， 17℃ 下可存活5個月。雌蟲產(chǎn)卵期為 28d，每蟲產(chǎn)卵平均 79粒。生活史包括繁殖周期和分散周期，繁殖周期在生長季節(jié)，以卵、 1～ 4齡幼蟲和成蟲反復(fù)繁殖；分散周期是線蟲的休眠和傳播時期，屬于 3齡和 4齡幼蟲。 傳播 ：該病借助于天牛的遷飛自然擴散，天牛幼蟲在越冬和化蛹期間分泌脂肪酸在蛹室積累，引誘 3齡幼蟲向蛹室集中，后變?yōu)?4齡，受天牛幼蟲羽化時產(chǎn)生的 CO2引誘而轉(zhuǎn)移到天牛成蟲體表，再通過腹部氣門進入天牛氣管，聚集在腹部，再從氣門出來，移至尾部，當天牛成蟲在健樹上取食和在衰弱樹上產(chǎn)卵時，線蟲即從傷口侵入寄主。 遠距離傳播通過人為調(diào)運患病松材及其制品等進行。 傳播介體： ?在自然條件下，墨天牛是松材線蟲的傳播媒介，主要有松墨天牛、云杉墨天牛、卡羅來納墨天牛、白點墨天牛、南美墨天牛等。 ?松墨天牛是最重要的傳播介體。傳播距離 1～2km，主要分布于日本、中國吉林及韓國等。 ?卡羅來納墨天牛在美國是主要的傳播介體 ?傳播方式： ?補充取食期傳播； ?產(chǎn)卵期傳播 發(fā)生規(guī)律：線蟲隨天牛取食自傷口侵入，通過皮層和松脂道進入木質(zhì)部， 6～ 9d后，木質(zhì)部細胞死亡，停止分泌松脂，出現(xiàn)外部癥狀，線蟲數(shù)量急劇增加， 30d達到最高峰。后期，環(huán)境條件不適應(yīng)，線蟲以 3齡幼蟲越冬。高溫干旱利于發(fā)病，夏季 40d內(nèi)降水少于 30mm， 55d以上平均氣溫高于 25℃ ，會嚴重發(fā)生。發(fā)病最適溫度 20～ 30℃ ，低于 20℃ ，高于 33℃ 不發(fā)病。 檢疫和防治： （ 1）嚴格檢疫制度，不從病區(qū)輸入松苗和松原材 （ 2）在天牛成蟲期，噴灑 ％殺螟松乳劑，每株 2～ 3kg；飛機噴灑，濃度提高到 3％，每公頃 60kg，持效期 1個月以上。 （ 3）晚夏和秋季用殺螟松噴灑病樹，每平方米樹表用藥 400～ 600ml，可完全殺死樹皮下的天牛幼蟲。 （ 4）汰除病樹，殘留樹樁要低，并剝?nèi)錁兜臉淦?，連同樹梢集中燒毀。原木可用溴甲烷熏蒸，或加工成 2cm以下的薄板。此項措施應(yīng)在天牛羽化前完成。 復(fù)習思考題 1．試述馬鈴薯金線蟲的分布，癥狀特點，病害的發(fā)生發(fā)展規(guī)律，檢疫方法和檢疫處理的措施。 2．試述香蕉穿孔線蟲的分布，癥狀特點，病害的發(fā)生發(fā)展規(guī)律，檢疫方法和檢疫處理的措施。 3．試述松材萎蔫線蟲在國內(nèi)外的分布狀況，癥狀特點，病害的發(fā)生發(fā)展規(guī)律，檢疫方法和檢疫處理的措施。 ，試分析如何有效防治？