【導(dǎo)讀】EphA2是Lindberg于1990年用簡(jiǎn)并引物從人角化細(xì)胞。人EphA2基因定位于,有17個(gè)外顯子。Eph受體家族是已知最大的酪氨酸蛋白激酶受體。Eph家族受體激酶和他們EFN配體介導(dǎo)的細(xì)胞信號(hào)傳。和腫瘤的新生血管的形成等過程中發(fā)揮重要的和必不可少的作用。EphA2廣泛高表達(dá)于不同的腫瘤組織和細(xì)胞系，如。，是功能強(qiáng)大的癌基因。EphA2的高表達(dá)能誘導(dǎo)非轉(zhuǎn)化乳腺和前列腺上皮細(xì)。胞在體內(nèi)、外的惡性轉(zhuǎn)化，并促進(jìn)其侵襲轉(zhuǎn)移。應(yīng)用EphA2蛋白的抗體靶向抑制試驗(yàn)，下調(diào)EphA2. 降低腫瘤的惡性程度。其中男性78例，女性76例，年齡。層14例，漿膜層37例，外周組織5例。對(duì)照組設(shè)計(jì)：以已知EphA2陽性食管鱗癌和正常食管。免疫組化結(jié)果判定及定量分析：EPhA2免疫組化陽性。的總RNA，結(jié)果陰性。陽性判斷標(biāo)準(zhǔn)為：目的EphA2基因RT-PCR產(chǎn)物凝。量的細(xì)胞群表現(xiàn)為直方圖中獨(dú)立的峰,即每個(gè)峰表示一定DNA含量或倍體。單倍體細(xì)胞平均百分?jǐn)?shù)相比較,在其兩個(gè)標(biāo)準(zhǔn)差之內(nèi)為正常,否則為異常。DNA含量分析:以DNA指數(shù)表示細(xì)胞DNA相對(duì)含量，根?！蹹I≤1.1為DNA二倍體;DI<0.9

　　

【正文】 P 二倍體 異倍體 P 部位 升結(jié)腸 9 177。 1 8 橫結(jié)腸 2 177。 1 1 降結(jié)腸 0 177。 0 0 乙狀結(jié)腸 16 177。 2 14 直 腸 39 177。 3 36 腫瘤大體類型 隆起型 38 177。 3 35 潰瘍型 22 177。 2 20 浸潤(rùn)型 3 177。 1 2 管周型 3 177。 1 2 腫瘤體積 (直徑 cm) ＜ 5 32 177。 4 28 ≥5 34 177。 j 3 31 h： F=。 i： F=。 j:F=。 r: F=。 s:F=。t:F= 來自 中國(guó)最大的資料庫(kù)下載 正常大腸粘膜組織的細(xì)胞周期 分布 和 DNA倍體 大腸腺癌的細(xì)胞周期分布， 出現(xiàn)異倍體峰 來自 中國(guó)最大的資料庫(kù)下載 三 .大腸腺癌組織中 EphA2蛋白和EphA2mRNA表達(dá) 與 DNA倍體和 DI的關(guān)系 來自 中國(guó)最大的資料庫(kù)下載 大腸腺癌組織中 EphA2蛋白和 EphA2mRNA表達(dá) 與 DNA倍體和 DI的關(guān)系 EphA2 例數(shù) DI (X177。 S) DNA倍體 P 二倍體 異倍體 P 蛋白表達(dá) 陽性 40 177。 4 36 陰性 26 177。 3 23 mRNA表達(dá) 陽性 22 177。 4 18 陰性 44 177。 3 41 a: F=。b: F=。c: F=。d: F= 來自 中國(guó)最大的資料庫(kù)下載 四 .大腸腺癌 DNA倍體與 SPF、 PI的關(guān)系 來自 中國(guó)最大的資料庫(kù)下載 大腸腺癌 DNA倍體與 SPF、 PI的關(guān)系 DNA倍體 例數(shù) SPF( X177。 S) P PI(X177。 S) P 二倍體 7 177。 177。 異倍體 59 177。 177。 注： a: χ2 =。 b: χ2 = 來自 中國(guó)最大的資料庫(kù)下載 來自 中國(guó)最大的資料庫(kù)下載 EphA2蛋白的表達(dá)結(jié)果分析 來自 中國(guó)最大的資料庫(kù)下載 一 . EphA2在正常大腸粘膜上皮中的表達(dá)結(jié)果分析 在正常大腸粘膜上皮低表達(dá)，陽性率僅為 %（ 38/154），且陽性細(xì)胞 III級(jí)染色僅占 %，陽性細(xì)胞大部分定位于大腸粘膜隱窩上皮基底部的胞漿 ,少量陽性細(xì)胞亦可見于表面粘膜腺體，提示可能 EphA2作用于增殖期上皮細(xì)胞，也可能參與細(xì)胞分化。 EphA2在正常大腸粘膜上皮和血管內(nèi)皮細(xì)胞的 表達(dá)和分布模式提示， EphA2可能 參與了正常大腸粘膜上皮的增殖過程。 來自 中國(guó)最大的資料庫(kù)下載 二 . EphA2在大腸腺 癌中 的表達(dá)結(jié)果分析 (1) EphA2廣泛高表達(dá)于許多人類腫瘤，無論從腫瘤細(xì)胞還是腫瘤組織的檢測(cè)都高表達(dá)，包括：乳腺癌、惡性黑色素瘤、前列腺癌、食管癌、肺癌和宮頸癌。本研究發(fā)現(xiàn)，相比正常大腸粘膜上皮， EphA2在腺癌組織中高表達(dá)，統(tǒng)計(jì)學(xué)分析差異有明顯顯著性(P)，表明 EphA2高表達(dá)可能與大腸腺粘膜上皮的癌變相關(guān)。 來自 中國(guó)最大的資料庫(kù)下載 EphA2高表達(dá) 與大腸腺癌的生長(zhǎng)方式、癌的組織學(xué)分級(jí)、癌細(xì)胞浸潤(rùn)深度相關(guān)，表明EphA2的高表達(dá)導(dǎo)致癌細(xì)胞惡性程度和侵襲性增加，使其更易發(fā)生浸潤(rùn)。 EphA2高表達(dá) 與淋巴道轉(zhuǎn)移、血道轉(zhuǎn)移、種植性轉(zhuǎn)移無關(guān)，表明 EphA2的高表達(dá)與大腸腺癌癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移潛能無關(guān)。 二 . EphA2在大腸腺 癌中 的表達(dá)結(jié)果分析(2) 來自 中國(guó)最大的資料庫(kù)下載 三 . EphA2蛋白在大腸腺癌組織中血管內(nèi)皮細(xì)胞的陽性表達(dá)結(jié)果分析 本研究發(fā)現(xiàn)在 大腸腺 癌組織中 ， EphA2陽性表達(dá)也見于 血管內(nèi)皮細(xì)胞，通過 大腸腺 癌細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞 EphA2陽性表達(dá)細(xì)胞計(jì)數(shù)對(duì)比，兩者呈正相關(guān)，表明EphA2參與腫瘤組織中的血管形成，從而促進(jìn)腫瘤的生長(zhǎng)、發(fā)展。 來自 中國(guó)最大的資料庫(kù)下載 EphA2mRNA 的結(jié)果分析 來自 中國(guó)最大的資料庫(kù)下載 一、 EphA2mRNA表達(dá)與大腸腺癌臨床病理學(xué)因素關(guān)系的結(jié)果分析 應(yīng)用 RTPCR技術(shù)，本研究發(fā)現(xiàn)在大腸腺癌組織中， EphA2mRNA表達(dá)與大腸腺癌患者的發(fā)病年齡相關(guān)，可能隨著腫瘤患者年齡變化，與體細(xì)胞存在基因突變的積累或基因修復(fù)系統(tǒng)功能低下或 DNA甲基化相關(guān)。 EphA2mRNA表達(dá)與大腸腺癌的浸潤(rùn)深度相關(guān)，表明： EphA2調(diào)節(jié)大腸腺癌細(xì)胞的遷移和黏附能力，參與大腸腺癌的演進(jìn)過程。 來自 中國(guó)最大的資料庫(kù)下載 二、 EphA2mRNA表達(dá)與其蛋白表達(dá)的關(guān)系 EphA2蛋白 0級(jí)表達(dá)的 mRNA水平明顯低于蛋白表達(dá) 1～ 3級(jí)的 mRNA，但二者在蛋白表達(dá)1～ 3級(jí)的樣本中 mRNA水平并無差異，這與前述的報(bào)道類似，提示在大腸腺癌中 EphA2蛋白與其 mRNA表達(dá)水平不完全一致。這種結(jié)果的確切機(jī)制還不是很清楚， EphA2mRNA的表達(dá)水平高而蛋白水平低，提示二者 在 大腸腺癌中并不完全在轉(zhuǎn)錄水平調(diào)節(jié)， 某種轉(zhuǎn)錄后翻譯水平的調(diào)控機(jī)制可能存在。 來自 中國(guó)最大的資料庫(kù)下載 FCM的結(jié)果分析 來自 中國(guó)最大的資料庫(kù)下載 一、大腸腺癌組織中 DNA倍體、細(xì)胞周期、癌細(xì)胞增殖率與臨床病理因素的關(guān)系 (1) 大腸腺癌中異倍體細(xì)胞群占 %，明顯高于正常大腸粘膜組織。表明大腸腺癌有較高的惡性程度，但異倍體細(xì)胞群增高與臨床病理因素?zé)o關(guān)，可能是取材標(biāo)本組織成份為腫瘤細(xì)胞與間質(zhì)正常細(xì)胞混合群體，影響檢測(cè)分析。 來自 中國(guó)最大的資料庫(kù)下載 本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明癌組織中異倍體癌ＰＩ及ＳＰＦ明顯高于二倍體癌組織，而我們 66例大腸腺癌標(biāo)本中 %出現(xiàn)異倍體癌，表明大腸腺癌癌細(xì)胞增殖分裂能力異常強(qiáng)大，具有無限分裂增殖的特性。 一、大腸腺癌組織中 DNA倍體、細(xì)胞周期、癌細(xì)胞增殖率與臨床病理因素的關(guān)系 (2) 來自 中國(guó)最大的資料庫(kù)下載 二、 EphA2表達(dá)與 DNA倍體、細(xì)胞增殖的關(guān)系 大腸腺癌組織中 DNA倍體、 DI值、及細(xì)胞殖率明顯增高，表明癌細(xì)胞增值能力強(qiáng)，具有無限分裂增殖的特性。但與 EphA2基因的表達(dá)無關(guān)，提示 EphA2基因的表達(dá)與細(xì)胞的增值速度無關(guān)。 來自 中國(guó)最大的資料庫(kù)下載 來自 中國(guó)最大的資料庫(kù)下載 1． EphA2蛋白的陽性表達(dá)在大腸腺癌組織中明顯高于正常大腸粘膜組織，且 EphA2蛋白的高表達(dá)與癌的 大體類型、分化程度 及浸潤(rùn)深度相關(guān)，提示 EphA2的高表達(dá)可能與大腸腺癌的癌變有關(guān)，并提示癌細(xì)胞具有更強(qiáng)的侵襲力。 2． EphA2蛋白也定位于 大腸腺癌的 血管內(nèi)皮細(xì)胞，提示EphA2基因表達(dá)參與了 大腸腺癌的微血管生成，有望成為大腸腺癌基因治療的新靶點(diǎn)。 來自 中國(guó)最大的資料庫(kù)下載 4． EphA2表達(dá)與 KAI1的 表達(dá)無相關(guān)性，提示 在大腸腺 癌中， EphA2和 KAI1可能通過不同的調(diào)節(jié)通路參與大腸腺癌的發(fā)生及浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移。 5．大腸腺癌組織中 DNA異倍體、 DI值及細(xì)胞增殖率明顯增高，表明癌細(xì)胞增殖能力強(qiáng)，但與 EphA2基因的表達(dá)無關(guān)，提示 EphA2基因的表達(dá)與細(xì)胞的增殖速度無關(guān)。 來自 中國(guó)最大的資料庫(kù)下載 謝謝！ 陳壬寅：