20xx年醫(yī)學專題—肝細胞癌中卵圓細胞表面標記的表達及意義(編輯修改稿)
2024-11-19 05:59 本頁面
【文章內容簡介】 探索肝細胞癌卵圓細胞可能的起源。
1 材料與方法
材料
病理組織
20例肝細胞癌組織及4例正常肝臟標本均取自南方醫(yī)院外科。肝細胞癌為主要研究對象，取正常肝組織作正常對照。肝癌組織標本均在患者首次手術時從肝內取材(所有病人術前均未行化療和放療)，主要觀察腫瘤組織和癌旁組織。所有組織用10%中性福爾馬林液固定，石蠟包埋，切片(4 m)備用。
主要試劑
第一抗體是鼠抗人CK7IgG 、CK19 IgG、CK18 IgG、CD34 IgG、ckit IgG，由北京中山生物公司提供，稀釋比例為1:100。正常山羊血清封閉液為武漢博士德生物公司產品。第二抗體免疫組化檢測試劑及顯色劑DAB為北京中山生物公司產品。
實驗方法
標本常規(guī)脫蠟、水化。PBS洗滌(5 min 2次)，用3 % H2O2 阻斷內源性過氧化酶，用微波修復抗原，PBS洗滌(2min 3次)，滴加羊血清封閉液，室溫下孵育10 min。滴加一抗IgG，37℃水浴孵育2 h， PBS洗滌(2min 3次)，滴加生物素二抗羊抗鼠IgG，37℃水浴孵育20min。PBS洗滌(2min 3次)，滴加試劑SABC，37℃水浴孵育20 min，PBS洗滌(2min 3次)，DAB顯色。蘇木素輕度復染50s，經脫水、透明處理后用中性樹脂封片，待鏡下觀察。用PBS代替一抗作陰性對照，用已知ckit 和CD34表達呈陽性的胃腸道間質瘤組織作陽性對照，細胞漿和(或)細胞膜呈棕黃色為陽性染色。取5個有代表性的高倍鏡視野，觀察100個細胞并計算陽性細胞數(shù)，平均陽性細胞數(shù) 10%為陽性。
統(tǒng)計學處理
。組間患者的年齡比較應用獨立樣本t檢驗。各組間比較采用兩獨立樣本秩和檢驗或Fisher’s精確概率檢驗。P 。
2 結果
臨床病理特征
20例肝細胞癌組織均經術后病理確診，其中高分化癌4例，中分化癌12例，低分化癌4例。20例患者中，男性15例，女性5例。合并肝硬化者10例，腫瘤直徑大于3 cm 者12例(表1)。切片經蘇木精伊紅染色后在光鏡下觀察，癌細胞胞漿呈嗜伊紅性，核深染色大小不等，多見核分裂相。
免疫組化結果
在20例肝細胞癌組織中CK18表達均呈陽性，CK18表達于細胞漿及細胞膜，呈棕黃色，CK18表達陽性細胞呈彌漫性分布(圖1)。在20例肝細胞癌組織細胞中，除了在小膽管上皮表達CK19外，沒有1例腫瘤細胞表達CK19(圖2)。正常肝組織的肝細胞表達CK18，膽管上皮表達CK19。
CK7 多表達于細胞漿，顏色為棕黃(圖3)。CK7 陽性細胞呈點狀、片狀分布，或呈彌漫性分布，可以位于癌組織中央?yún)^(qū)域，也可以位于癌結節(jié)的外緣。還可見到較腫瘤細胞小，而形態(tài)呈卵圓形的CK7表達陽性細胞分布在癌結節(jié)外，其細胞核大，胞質少，核漿比高 (圖4)。表1顯示，14例肝細胞癌CK7表達陽性，表達率為70%(14/20)，在4例正常肝臟的實質細胞內未見CK7表達，CK7表達與患者年齡、性別無關，與腫瘤大小、是否合并肝硬化以及組織學分級也不相
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