20xx年醫(yī)學專題—膜蛋白的提取方法-全攻略(編輯修改稿)
2025-11-17 22:28 本頁面
【文章內容簡介】 蛋白質的提取效率來確定，但在某些情況下，還要考慮到以后的純化步驟。雖然許多膜蛋白必須在去垢劑存在的情況下進行純化，但最終仍可能需要除去去垢劑。這常常會引起蛋白質失活，但如果蛋白質是用于測序的，他將不是一個問題。如果不是用于測序的，， triton X100在280nm處有吸收，如果某蛋白質的測試與280nm處的吸收有關，就應避免使用這類去垢劑. 將膜制劑與胞質蛋白及細胞核分離后，而無需考慮胞質蛋白、無論在種類上還是數(shù)量上，都比酸溶解法所得到的蛋白（5000Da）%，所以充分的膜蛋白的提取，無疑對于研究膜蛋白的結構和功能都是非常重要的. 酸溶解法簡單，可靠，但有時含有其他蛋白。一般的都是利用4℃時所有的蛋白質原則上都溶于Triton X114水溶液，在溫度超過20℃時，此溶液分為水相和去污相；此時親水性蛋白溶于水相，疏水的膜蛋白溶于去污劑相中。利用此性質可提取膜蛋白。3 )膜蛋白色譜(Chromatography of Membrane Protein,CMP)：CMP分離強疏水性蛋白、多肽混合物的層析系統(tǒng)，一般有去垢劑（如SDS）溶解膜蛋白后形成SDS融膜蛋白，并由羥基磷灰
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