20xx年醫(yī)學(xué)專題—流式微球聯(lián)合檢測炎癥性因子(編輯修改稿)
2024-11-17 22:25 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 triglyceride, cholesterol and bilirubin had a certain interference to detection, the low levels of triglyceride, cholesterol and bilirubin had a minor disturbance, and it had no significant difference with ELISA. Conclusion Cytometric bead array multiplex detection method to detect IL6, TNFα and MCP1 can be used in the clinical and expansion of flow cytometry.【Key words】Cytometric bead array。 Multiplex detection。 ILTNFα。MCP1.目前，冠心?。╟oronary artery heart disease, CHD）已成為危害我國人民群眾生命和健康的重大疾病[1]。近年來的研究，明確了血管壁的炎癥性變化在冠狀動(dòng)脈粥樣硬化及其并發(fā)癥的發(fā)生進(jìn)展過程中發(fā)揮了非常大的作用。許多炎癥性因子，如白細(xì)胞介素6（IL6）、腫瘤壞死因子α（TNFα）和單核細(xì)胞趨化因子1（MCP1）等炎性因子參與了動(dòng)脈粥樣硬化的形成過程。隨著流式細(xì)胞技術(shù)的不斷普及，對(duì)同一標(biāo)本進(jìn)行多參數(shù)的流式微球聯(lián)合檢測，具有廣闊的應(yīng)用前景。本文利用微球熒光編碼技術(shù)，結(jié)合流式細(xì)胞分析技術(shù)，建立了ILTNFα和MCP1的流式微球聯(lián)合檢測分析技術(shù)，具有靈敏度高，特異性強(qiáng)，節(jié)約成本等特點(diǎn)。1 材料和方法 標(biāo)本來源 血漿標(biāo)本采自2010年9月—2011年3月貴州省人民醫(yī)院心內(nèi)科已確診的心肌梗死患者和健康體檢者。清晨空腹采血，分離血漿，80℃保存待檢。 主要儀器和試劑 ILTNFα和MCP1標(biāo)準(zhǔn)品，ILTNFα和MCP1鼠抗人單克隆抗體（濃度均為100μg/ml），ILTNFα和MCP1生物素標(biāo)記的羊抗人二抗（），以上均為美國Ramp。D公司產(chǎn)品，熒光素（FITC）標(biāo)記羊抗鼠IgG（abcam公司，2mg/ml），羧基化微球（BioRad公司），PE標(biāo)記的親和素（eBioscience公司，），甘油三酯標(biāo)準(zhǔn)品、 膽紅素標(biāo)準(zhǔn)品和膽固醇標(biāo)準(zhǔn)品（天津一方科技有限公司），人ILTNFα和MCP1 ELISA檢測試劑盒（Ramp。D公司產(chǎn)品，批號(hào)分別為CKE10140H、CKE10110H和CKE10136H），BD Array流式細(xì)胞儀、酶標(biāo)儀等。 方法 試驗(yàn)條件的選擇分別取100181。l三種已用不同熒光素標(biāo)記的羧基化微球，參考文獻(xiàn)[2]激活微球，分別在濃度系列依次是0181。g、5181。g、10181。g、20181。g的三種鼠抗人單克隆抗體加入25ug/ml的FITC標(biāo)記羊抗鼠IgG50181。l，反應(yīng)后通過流式細(xì)胞儀檢測熒光強(qiáng)度中位數(shù)MFI（median
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