20xx年醫(yī)學(xué)專(zhuān)題—第三章細(xì)菌的生長(zhǎng)和遺傳變異-1(編輯修改稿)
2024-11-16 00:37 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 ,稀釋平板計(jì)數(shù)法—固體(g249。tǐ)培養(yǎng)法,第一步：菌樣巧妙(qiǎomi224。o)稀釋,,得到(d233。 d224。o)不同稀釋度 （10x）菌液,第二十八頁(yè)，共六十八頁(yè)。,各取1ml，均勻涂布于冷固體培養(yǎng)基平板上或與溫?zé)嵋簯B(tài)固體培養(yǎng)基混合(h249。nh233。)冷卻。,第三步：培養(yǎng)(p233。iyǎng),稀釋度過(guò)(d249。 ɡu242。)低，菌落密集無(wú)法計(jì)數(shù),可以計(jì)數(shù)，但數(shù)量過(guò)多，費(fèi)時(shí)費(fèi)力,數(shù)量合適，統(tǒng)計(jì)計(jì)算，作為結(jié)果,數(shù)量太少，誤差因素太大，不做計(jì)數(shù),第二步：接種平板,每一個(gè)細(xì)菌會(huì)生成一個(gè)菌落,一般計(jì)數(shù)平板的細(xì)菌生長(zhǎng)菌落數(shù)以30~300個(gè)為宜。,第二十九頁(yè)，共六十八頁(yè)。,第四步：計(jì)數(shù)(j236。 sh249。),細(xì)菌數(shù)量=？ 細(xì)菌數(shù)量=數(shù)出的菌落數(shù)/稀釋度 例如：105稀釋度時(shí)菌落數(shù)為125個(gè) 細(xì)菌數(shù)量=125/105=1.25107個(gè)/mL 平板計(jì)數(shù)法是采用(cǎiy242。ng)最廣的一種活菌計(jì)數(shù)法 如國(guó)標(biāo)法水中細(xì)菌總數(shù)的測(cè)定。 注意：作空白及取平行樣（2～3組）均值減小誤差,第三十頁(yè)，共六十八頁(yè)。,第三十一頁(yè)，共六十八頁(yè)。,間接(ji224。n jiē)計(jì)數(shù)法——一種活菌計(jì)數(shù)法,②濾膜法：過(guò)濾到濾膜上（把膜放在固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)），然后把濾膜貼到培養(yǎng)基上，細(xì)菌獲得(hu242。d233。)營(yíng)養(yǎng)而生長(zhǎng)，形成菌落?！竽c菌群測(cè)定,第三十二頁(yè)，共六十八頁(yè)。,間接(ji224。n jiē)計(jì)數(shù)法——一種活菌計(jì)數(shù)法,③液體計(jì)數(shù)法（MPN法，most probable number法）最可能數(shù)法 特點(diǎn)：液體培養(yǎng)、統(tǒng)計(jì)學(xué)查表計(jì)數(shù) 主要用于不能在平板培養(yǎng)基上形成菌落的菌 （硝化菌、反硝化菌、硫酸還原(hu225。n yu225。n)菌） 將菌接種于液體培養(yǎng)基，經(jīng)過(guò)一段時(shí)間培養(yǎng)，采用一定的技術(shù)來(lái)檢測(cè)是否有細(xì)菌生長(zhǎng)。例如硫酸鹽還原菌的檢測(cè)是利用它們生長(zhǎng)時(shí)產(chǎn)生的硫化亞鐵黑色特征進(jìn)行檢測(cè)，按MPN法進(jìn)行計(jì)數(shù)。,第三十三頁(yè)，共六十八頁(yè)。,,,,（1）稀釋(xīsh236。),（2）稀釋(xīsh236。)接種樣品,在液體表面(biǎomi224。n)加一層無(wú)菌液體石蠟隔絕氧氣,恒溫37℃培養(yǎng)14天,記錄變黑的試管情況,（3）培養(yǎng),1ml,+ 9ml,培養(yǎng)基,提問(wèn)：為什么有些試管變黑有些沒(méi)有？,稀釋程度、取樣概率,第三十四頁(yè)，共六十八頁(yè)。,(4)統(tǒng)計(jì)(tǒngj236。)－查表－計(jì)算,①統(tǒng)計(jì)數(shù)量指標(biāo)的確定 根據(jù)不同(b249。 t243。nɡ)稀釋度變黑試管，得到三位數(shù)及其中最低稀釋度 取重復(fù)管數(shù)都有菌生長(zhǎng)的最高稀釋度的生長(zhǎng)管數(shù)，為數(shù)量指標(biāo)的第一位數(shù)字，后面兩個(gè)稀釋度的生長(zhǎng)管數(shù)后兩位數(shù)提問(wèn)：上例情況而言統(tǒng)計(jì)數(shù)量是幾？ 320 104,第三十五頁(yè)，共六十八頁(yè)。,,,MPN三管法測(cè)數(shù)統(tǒng)計(jì)表（個(gè)菌/毫升(h225。o shēnɡ)）,水中大腸菌群、鐵細(xì)菌(x236。jūn)、硝化菌、亞硝化菌也用這種方法進(jìn)行數(shù)量統(tǒng)計(jì)。,上面例子中數(shù)量指標(biāo)“320” 對(duì)應(yīng)(du236。y236。ng)的細(xì)菌最可能數(shù)為9.5個(gè)菌/毫升， 最低稀釋度為104，折算出樣品中菌濃度為 9.5x 104個(gè)菌/毫升。,②查MPN表,第三十六頁(yè)，共六十八頁(yè)。,（二） 測(cè)生長(zhǎng)量法,（1）測(cè)體積：粗放(cūf224。ng)的方法，離心或自然沉降后觀察體積；,（2）測(cè)細(xì)胞干重(ɡ224。n zh242。nɡ)：離心法、過(guò)濾法兩種； 105~110186。C下干燥后稱(chēng)重（干重約為濕重的10~20%）,活性污泥濃度(n243。ngd249。)測(cè)定方法：,第三十七頁(yè)，共六十八頁(yè)。,細(xì)菌不完全(w225。nqu225。n)透光，一定范圍內(nèi)菌溶液的混濁度與菌數(shù)量成正比,（3）比濁法/光密度法 OD（optical density）Λ＝450~660nm, 可見(jiàn)光,第三十八頁(yè)，共六十八頁(yè)。,①制標(biāo)準(zhǔn)(biāozhǔn)曲線(xiàn)（OD~No）,②測(cè)菌液濁度，查圖表得出(d233。 chū)細(xì)菌數(shù)量,濁度儀或721分光光度儀,第三十九頁(yè)，共六十八頁(yè)。,（5）細(xì)胞(x236。bāo)含氮量 細(xì)菌含氮量12.5%、酵母為7.5% 粗蛋白量＝6.25N量,（6）DNA、蛋白質(zhì) 同一(t243。ngyī)細(xì)菌所
物理相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號(hào)-1