呼吸道九聯(lián)檢sop(編輯修改稿)
2025-10-03 23:07 本頁面
【文章內容簡介】 熒光顯微鏡觀察結果。 圖1圖1：九項呼吸道感染病原體IgM抗體檢測試劑盒檢測原理2. 試劑盒組成及用途組分成分和用途載玻片檢測的物理載體，覆有聚四氟乙烯并包被有針對檢測物的特異性抗原，包裝袋內有一袋硅膠以防潮。質控品用于證明試劑盒及試驗的有效性，含有人血清及防腐劑。吸附劑羊抗人IgG用來吸附人IgG避免干擾IgM 檢測，含有防腐劑。FITC結合物熒光素標記的抗人免疫球蛋白結合物，含有染色液、防腐劑和蛋白穩(wěn)定劑。和抗原抗體復合物反應，并顯色。封閉介質甘油緩沖液，便于觀察。磷酸鹽緩沖液(PBS)用于洗滌步驟，從反應介質中除去未結合的免疫球蛋白和結合物。3. 操作步驟 實驗前準備1）實驗所需物品準備：1000ml量筒、1000ml燒杯、離心管、微量移液器、溫育濕盒、洗瓶、水平搖床、恒溫箱、蓋玻片、熒光顯微鏡。2）PBS洗液的準備：將1瓶PBS粉末倒入燒杯中，加入1L蒸餾水中，搖勻直至完全溶解，配好后儲存在28186。C備用。3）使用前，將所有試劑平衡至室溫，將恒溫箱調至37℃。 實驗步驟1）樣本的稀釋：按1:1比例稀釋血清標本，即15181。L血清加入15181。L PBS中。陰陽性對照不需要稀釋。2）用吸附劑處理稀釋后的血清：將30181。L稀釋后的血清加入150181。L吸附劑中，徹底混勻。陰陽性對照不需吸附劑處理。處理后的血清要離心1015分鐘除去沉淀，以防干擾檢測。3）在載玻片的每孔中加15181。L吸附劑處理過的血清。在一個載玻片的每孔中加入15181。L不稀釋的陽性對照，在另一個載玻片的每孔中加入15181。L不稀釋的陰性對照。4）將載玻片放入濕盒中，37℃溫育90分鐘。5）用PBS洗液的緩慢水流沖洗載玻片（避免直接沖入孔內）后，浸泡在PBS中并放置在水平搖床上輕輕搖動10分鐘。將載玻片用蒸餾水緩慢水流沖洗（避免直接沖入孔內）。6）載玻片自然晾干。7）每孔加入15181。L FITC結合物溶液（不需稀釋）。8）將載玻片放入濕盒，37℃溫育30分鐘。9）重復6和7的洗滌步驟。10）加幾小滴封閉介質，小心蓋上蓋玻片。11）盡快用熒光顯微鏡在400倍放大率下觀察結果。如果不能立即觀察，可將其避光放置于28186。C不超過24小時。4．結果判斷每一次試驗都應設立陽性和陰性對照，以確認試驗和試劑盒的有效性。觀察到的熒光模式應為：陽性對照：腺病毒、流感病毒、呼吸道合胞病毒或副
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