【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 固，使學(xué)生熟練掌握生化 與分子生物學(xué)儀器 設(shè)備的基本操作，具備基本的分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技能，提高綜合分析解決實(shí)際問(wèn)題的能力。 2．能根據(jù)需要選學(xué)參考書(shū)，查閱手冊(cè)，通過(guò)獨(dú)立思考，深入鉆研有關(guān)問(wèn)題，學(xué)會(huì)自己獨(dú) 立分析問(wèn)題、解決問(wèn)題，具有一定的創(chuàng)新能力。 3．能正確使用儀器設(shè)備，掌握測(cè)試原理，熟練 分析有關(guān)數(shù)據(jù)，撰寫(xiě)分子生物學(xué)研究報(bào)告 。 4． 學(xué)生在實(shí)驗(yàn)前認(rèn)真作好實(shí)驗(yàn)預(yù)習(xí)、實(shí)驗(yàn)記錄和實(shí)驗(yàn)報(bào)告，遵守實(shí)驗(yàn)室規(guī)則，了解分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室安全常識(shí)， 預(yù)防實(shí)驗(yàn)事故的發(fā)生， 并能對(duì)一般實(shí)驗(yàn)事故進(jìn)行處理。 二．課程實(shí)驗(yàn)?zāi)康囊? 《分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)》是繼《分子生物學(xué)》課程之后開(kāi)設(shè)的獨(dú)立實(shí)驗(yàn)課程，是理論教學(xué)的深化和補(bǔ)充，具有較強(qiáng)的實(shí)踐性，是一門(mén)重要的專業(yè) 基礎(chǔ) 課，可作為生物類專業(yè)的學(xué)生的必修課。 隨著生物技術(shù) 的 迅速發(fā)展，生物及農(nóng)科類大學(xué)生不僅需要 掌握 分子生物學(xué)等 基本理論知識(shí)，而且還需要掌握 相應(yīng) 的實(shí)驗(yàn)技能及一定的科學(xué)研究能力。通過(guò)該課程的學(xué)習(xí)，使學(xué)生鞏固和加深生物科學(xué)及生物技術(shù)理論知識(shí)，通過(guò)實(shí)踐進(jìn)一步加強(qiáng)學(xué)生獨(dú)立分析問(wèn)題和解決問(wèn)題的能力、綜合設(shè)計(jì)及 14 創(chuàng)新能力的培養(yǎng)，同時(shí)注意培養(yǎng)學(xué)生實(shí)事求是、嚴(yán)肅認(rèn)真的科學(xué)作風(fēng)和良好的實(shí)驗(yàn)習(xí)慣，為今后工作打下良好的基礎(chǔ)。 三．適用專業(yè)： 生物技術(shù)專業(yè)或其他相關(guān)專業(yè) ； 四．主要儀器設(shè)備： 低溫離心機(jī) 、 微量移液器系列 、 制冰機(jī) 、 自動(dòng)滅菌鍋 、 純水系統(tǒng) 、 PCR 儀 、 通風(fēng)廚 、 凈化工作臺(tái) 、 恒溫振蕩器 、 隔水式培養(yǎng)箱 、 紫外分析儀 、 電子天平 、 pH計(jì) 、 恒溫水浴鍋 、 紫外透視成像儀 、雙穩(wěn)定時(shí)電泳儀及電泳槽 、 快速核酸蛋白自動(dòng)分析儀 （或微量分光光度計(jì)）、 家用冰箱 、 液氮生物容器及液氮 、 旋渦混合儀 、 手掌離心機(jī) 、 微波爐， 等等 。 五．實(shí)驗(yàn)方式與基本要求 ，為單獨(dú)設(shè)課。任課教師需向?qū)W生講清課程的性質(zhì)、任務(wù)、要求、課程安排和進(jìn)度、平時(shí)考核內(nèi)容、綜 合考察內(nèi)容、實(shí)驗(yàn)守則及實(shí)驗(yàn)室安全制度及其學(xué)生的 應(yīng)急能力等。 2．該課以 綜合性實(shí)驗(yàn)為主，實(shí)驗(yàn)前學(xué)生必須進(jìn)行預(yù)習(xí)，了解釋實(shí)驗(yàn)的具體內(nèi)容和操作流程。每次實(shí)驗(yàn)前，老師 講述實(shí)驗(yàn)的基本原理、方法、操作技巧、關(guān)鍵注意事 項(xiàng)等 ，強(qiáng)調(diào)重點(diǎn)及難點(diǎn)，演示儀器的具體操作，學(xué)生領(lǐng)會(huì)之后方可進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作。 3．實(shí)驗(yàn) 2~3 人 1組，在規(guī)定時(shí)間內(nèi)，由學(xué)生獨(dú)立完成，出現(xiàn)問(wèn)題，教 師要引導(dǎo)學(xué)生獨(dú)立分析、解決，不得包辦代替。 4． 有的實(shí)驗(yàn)可開(kāi)展 課前預(yù)備實(shí)驗(yàn)，通過(guò)對(duì)預(yù)備實(shí)驗(yàn)的果的 分析 ，結(jié)合學(xué)生嘗試性的采用不同實(shí)驗(yàn)方案的結(jié)果對(duì)照，來(lái)培養(yǎng)學(xué)生設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)及改進(jìn)實(shí)驗(yàn)方案的能力。 5．任課教師要認(rèn)真上好每一堂課，實(shí)驗(yàn)前清點(diǎn)學(xué)生人數(shù)，實(shí)驗(yàn)中按要求做好學(xué)生實(shí)驗(yàn)情況及結(jié)果記錄，實(shí)驗(yàn)后認(rèn)真填寫(xiě)實(shí)驗(yàn)開(kāi)出記錄。 6．通過(guò)本課程的實(shí)驗(yàn)試教和實(shí)驗(yàn)操作，并結(jié)合多媒體實(shí)驗(yàn)教學(xué)，要求學(xué) 生熟練掌握下列分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)： 核酸 的瓊脂糖凝膠電泳 、核酸的比色法鑒定、植物基因組總 DNA的分離純化 與綜合鑒定、采用 PCR 法從復(fù)雜基因組擴(kuò)增特定基因片段、 大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞的制備 與 轉(zhuǎn)化 、藍(lán)白班篩選、單克隆培養(yǎng)及菌液 PCR、 質(zhì)粒 DNA的提取、重組載體的酶切鑒定、 植物組織總 RNA的提取等。 六．考核與報(bào)告 本課程為考查課，實(shí)驗(yàn)報(bào)告占 60%，實(shí)驗(yàn)操作占 30%；考勤占 10%； 實(shí)驗(yàn)成績(jī)分 ： A、 B、 C、D、 E（即： 優(yōu)、良、中、及格、不及格五級(jí) ） 。 量化標(biāo)準(zhǔn)詳見(jiàn)有關(guān)規(guī)定。 15 七．實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目設(shè)置與內(nèi)容 序 號(hào) 實(shí)驗(yàn)名稱 內(nèi)容提 要 實(shí)驗(yàn) 學(xué)時(shí) 每組 人數(shù) 實(shí)驗(yàn) 屬性 實(shí)驗(yàn)者類別 開(kāi)出 要求 1 CTAB 法提取植物基因組總 DNA及 純化 用 CTAB 法提取植物基因組 總 DNA粗提物 ， 一半的初提物用 RNase A處理去除 RNA， 用苯酚：氯仿 /異戊醇法去除蛋白 ， 采用乙醇沉淀法得到高質(zhì)量的植物基因組總 DNA。 5 2~3 綜合 本科 必做 2 DNA 質(zhì)量的 瓊脂糖凝膠電泳 和 比色法鑒定 分別以 自己 提取 的 植物基因組總 DNA初提物和純化物為材料，進(jìn)行瓊脂糖凝膠 電泳 分析 DNA的多少、完整性、主體分子量大小、 RNA去除程度等，同時(shí)進(jìn)行 分光光度計(jì)檢測(cè) 后計(jì) 算DNA濃度 及 純度，綜合評(píng)價(jià) DNA質(zhì)量，評(píng)價(jià)上一實(shí)驗(yàn) DNA 提取和純化操作的成功度，并計(jì)算植物材料 DNA提取的得率 。 3 2~3 綜合 本科 必做 3 大腸桿菌 培養(yǎng)及感受態(tài)細(xì)胞 的 制備 2 次振蕩培養(yǎng)大腸桿菌單克隆菌液，采用經(jīng)典的 CaCl2兩次重懸 法制備感受態(tài)。 4 2~3 綜合 本科 必做 4 轉(zhuǎn)化對(duì)照質(zhì)粒 評(píng)價(jià) 大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞 采用已提取好的 純品 CCC 型已知對(duì)照質(zhì)粒， 轉(zhuǎn)化 自己制備的大腸桿菌感受態(tài)， 涂LB+Amp 平板 培養(yǎng) ，計(jì)算 轉(zhuǎn)化率，評(píng)價(jià)所 制備 感受態(tài)的感受效率。 4 2~3 綜合 驗(yàn)證 本科 必做 5 從植 物基因組DNA 擴(kuò)增特異基因片段 與檢測(cè) 以 自己 提取 的 植物基因組 總 DNA為模版，采用 PCR法擴(kuò)增一個(gè)已知基因的特異 片段 ，電泳檢測(cè) 成功與否 。 3 2~3 綜合 驗(yàn)證 本科 必做 6 特異基因片段 的瓊脂糖凝膠 回收及與 T載體的連接重組 上一實(shí)驗(yàn)的 電泳 后從瓊脂糖凝膠上切下目的基因片段的膠塊，采用膠回收試劑盒 純化回收 目的基因片段， 電泳檢測(cè)回收效率 ，然后將其與 T載體進(jìn)行連接，形成重組載體 。 2 2~3 綜合 本科 必做 7 重組載體轉(zhuǎn)化大腸桿菌、藍(lán)白斑 篩選 將 上一實(shí)驗(yàn)的重組 T載體轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn) 1制備的大腸桿菌感受態(tài)，涂含 Amp、Xgal、 IPTG 的 LB 平板 培養(yǎng) ， 根據(jù)藍(lán)白斑計(jì)算重組率 。 3 2~3 綜合 本科 必做 8 白斑單克隆培養(yǎng)及菌液 PCR 檢測(cè) 挑取 上一實(shí)驗(yàn)的 白斑 單 克隆進(jìn)行LB+Amp 液體培養(yǎng) ，以菌液為模板直接進(jìn)行目標(biāo)基因片段的 PCR檢測(cè) ， 對(duì)比分析 PCR 陽(yáng)性率與白班篩選結(jié)果。 3 2~3 驗(yàn)證 本科 必做 16 9 陽(yáng)性克隆的質(zhì)粒抽提 與檢測(cè) 將 上一實(shí)驗(yàn)鑒定的 PCR 陽(yáng)性的白斑單克隆菌液 ，采用堿裂解法抽提質(zhì)粒，采用電泳及分光光度法測(cè)定質(zhì)粒的濃度 ，并評(píng)價(jià)質(zhì)粒的 質(zhì)量 。 3 2~3 綜合 驗(yàn)證 本科 必做 10 重組載體的酶切鑒 定 將 上一實(shí)驗(yàn) 抽提 的重組 質(zhì)粒，用限制性內(nèi)切酶進(jìn)行酶切，通過(guò)電泳圖譜法分析確認(rèn)重組質(zhì)粒上是否能切下預(yù)測(cè)大小的目的基因片段。 2 驗(yàn)證 綜合 驗(yàn)證 本科 必做 11 Trizol 法提取植物總 RNA及分析 采用 TRizol試劑，一步法提取植物葉片中總的 RNA，采用電泳法和分光光度法對(duì) RNA的質(zhì)量和濃度進(jìn)行評(píng)價(jià)。 4 2~3 綜合 本科 必做 12 利用 RAPD 標(biāo)記初步鑒定植物材料的親緣關(guān)系 采用幾個(gè)植 物基因組 總的 DNA 樣品為材料，以 RAPD標(biāo)記引物對(duì)他們進(jìn)行 RAPD PCR、電泳操作；分析樣品之間的電泳圖譜比較 ，確定相互親緣關(guān)系。 4 2~3 綜合 驗(yàn)證 本科 視情況增 開(kāi) 13 植物表達(dá)載體轉(zhuǎn)化根癌農(nóng)桿菌及PCR 檢測(cè) 兩次培養(yǎng)根癌農(nóng)桿菌菌液，制備感受態(tài)細(xì)胞，并轉(zhuǎn)化已構(gòu)建好的植物表達(dá)載體，涂Kan+Str+Rif的 LB 培養(yǎng)基 平板，挑取單克隆進(jìn)行菌液培養(yǎng)，對(duì)菌液直接進(jìn)行 PCR堅(jiān)定，確認(rèn)植物表達(dá)載體已轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌并形成工程菌株。 6 2~3 綜合 驗(yàn)證 本科 視情況增 開(kāi) 八．說(shuō)明 1．《分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)》是繼《分子生物學(xué)》開(kāi)設(shè)之后的必修課程，學(xué)生通過(guò)理論學(xué)習(xí)后，已初步掌握了分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)原理的基本內(nèi)涵和簡(jiǎn)單實(shí)驗(yàn)的設(shè)計(jì)方法。 2．《分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)》 的 實(shí)驗(yàn)內(nèi)容，不同專業(yè)、不同學(xué)時(shí)的班級(jí)可根據(jù)先修課的講授內(nèi)容或多或少，或易或難，擇優(yōu)選做。 3．在《分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)》教學(xué)中，應(yīng)注意不斷深化和擴(kuò)展教學(xué)內(nèi)容，注意向?qū)W生介紹生物領(lǐng)域新的研究進(jìn)展、新技術(shù)，激發(fā)學(xué)生學(xué)習(xí)興趣和熱情。 4．在實(shí)驗(yàn)室全面開(kāi)放的條件下，提出供學(xué)生選做的課題，加強(qiáng)學(xué)生創(chuàng)新能力的培養(yǎng)，因材施教，注意學(xué)生的個(gè)性。 九．制定人： 柴友榮 審核人： 王三根 批準(zhǔn)人： 朱利泉 十、制定時(shí)間： 2020 年 12 月 17 《開(kāi)放性實(shí)驗(yàn)》 課程實(shí)驗(yàn)教學(xué)大綱 一．課程簡(jiǎn)介及 基 本要求 開(kāi)放性 實(shí)驗(yàn)課是 針對(duì)全 校本科生開(kāi)設(shè)的一門(mén) 理論 與實(shí)驗(yàn)相促進(jìn)的實(shí)驗(yàn)課程 。學(xué)生通過(guò)實(shí)驗(yàn)課，掌握并應(yīng)用講課中所學(xué)到的基礎(chǔ)理論和基本知識(shí) ，對(duì)文科類、工科類及非生物或者非農(nóng)科類的專業(yè)學(xué)生，可以對(duì)生物學(xué)有一個(gè)總體的直觀上認(rèn)識(shí) ； 學(xué)生能夠 學(xué)會(huì)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)、實(shí)驗(yàn)記錄和實(shí)驗(yàn)報(bào)告的寫(xiě)作 ，使學(xué)生 對(duì)自己所學(xué)專業(yè)知識(shí)做出有機(jī)的補(bǔ)充；為學(xué)生今后的生物科技方面知識(shí)量的補(bǔ)充或者為其在科學(xué)研究 和教學(xué)工作打下堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。 1． 學(xué)生通過(guò)生動(dòng)的實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象和現(xiàn)實(shí)的動(dòng)手操作，進(jìn)一步加深對(duì)所學(xué)的抽象的理論知識(shí)的理解和鞏固，使學(xué)生熟練掌握生化設(shè)備的基本操作，具備基本的分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn) 技能，提高綜合分析解決實(shí)際問(wèn)題的能力。 2．能根據(jù)需要選學(xué)參考書(shū)，查閱手冊(cè)，通過(guò)獨(dú)立思考，深入鉆研有關(guān)問(wèn)題，學(xué)會(huì)自己獨(dú)立分析問(wèn)題、解決問(wèn)題，具有一定的創(chuàng)新能力。 3． 學(xué)生在實(shí)驗(yàn)前認(rèn)真作好實(shí)驗(yàn)預(yù)習(xí)、實(shí)驗(yàn)記錄和實(shí)驗(yàn)報(bào)告，遵守實(shí)驗(yàn)室規(guī)則，了解 開(kāi)放性 實(shí)驗(yàn)室安全常識(shí)，并能對(duì)一般實(shí)驗(yàn)事故進(jìn)行處理。 二．課程實(shí)驗(yàn)?zāi)康囊? 《 開(kāi)放性 實(shí)驗(yàn)》是 一門(mén)針對(duì)全校所有專業(yè)本科生獨(dú)立開(kāi)設(shè)的 實(shí)驗(yàn)課程，是理論教學(xué)的深化和補(bǔ)充，具有較強(qiáng)的實(shí)踐性，是一門(mén)重要的 實(shí)踐 課，可作為生物類 或者農(nóng)科 專業(yè) 的學(xué)生的選 修課 及 非生物專業(yè) 的興趣課 。隨著生物技術(shù)迅速發(fā) 展，生物及農(nóng)業(yè)科大學(xué)生不僅需要掌握數(shù)字生物科學(xué)技術(shù)方面的基本理論知識(shí)，而且還需要掌握基本的實(shí)驗(yàn)技能及一定的科學(xué)研究能力。通過(guò)該課程的學(xué)習(xí)，使學(xué)生鞏固和加深生物科學(xué)及生物技術(shù)理論知識(shí)，通過(guò)實(shí)踐進(jìn)一步加強(qiáng)學(xué)生獨(dú)立分析問(wèn)題和解決問(wèn)題的能力、綜合設(shè)計(jì)及創(chuàng)新能力的培養(yǎng)，同時(shí)注意培養(yǎng)學(xué)生實(shí)事求是、嚴(yán)肅認(rèn)真的科學(xué)作風(fēng)和良好的實(shí)驗(yàn)習(xí)慣，為今后工作打下良好的基礎(chǔ)。 三． 針對(duì) 專業(yè) 學(xué)生 ： 生物、農(nóng)、林、水產(chǎn)、 醫(yī)學(xué)、 畜牧各專業(yè) ； 理、工、藝術(shù)、文、經(jīng)濟(jì)類相關(guān)專業(yè)對(duì)生物學(xué)感興趣的學(xué)生 。 四．主要儀器設(shè)備： 凝膠成像儀、分光光度計(jì)、電泳 儀、垂直板電泳槽、研磨儀、脫色搖床、制冰機(jī)、張力測(cè)定儀、臺(tái)式離心機(jī)等 。 五．實(shí)驗(yàn)方式與基本要求 18 1．該課以綜合性實(shí)驗(yàn)為主，教材中僅僅給出實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目的基本原理和操作方法，實(shí)驗(yàn)前學(xué)生必須進(jìn)行預(yù)習(xí)，簡(jiǎn)要了解釋實(shí)驗(yàn)具體內(nèi)容，經(jīng)授課教師講述實(shí)驗(yàn)的具體要求和強(qiáng)調(diào)重點(diǎn)及難點(diǎn)、演示儀器的具體操作，學(xué)生領(lǐng)會(huì)之后方可進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作。 2．實(shí)驗(yàn) 2 人 1 組，在規(guī)定的時(shí)間內(nèi)，由學(xué)生獨(dú)立完成，出現(xiàn)問(wèn)題，教師要引導(dǎo)學(xué)生獨(dú)立分析、解決，不得包辦代替。 七．實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目設(shè)置與內(nèi)容 序 號(hào) 實(shí)驗(yàn)名稱 內(nèi)容提要 實(shí)驗(yàn) 學(xué)時(shí) 每組 人數(shù) 實(shí)驗(yàn) 屬性 實(shí) 驗(yàn) 者類別 開(kāi)出 要求 1 豆蛋白的沉淀及應(yīng)用 用熱水將大豆的可溶性成分提取，加 入凝固劑將蛋白質(zhì)沉淀制得豆腐 。 3 綜合 本科 選 做 2 果汁的生化鑒定 果汁中的維生素 C 與對(duì) 亞硝基二甲替苯胺、對(duì) 二甲胺基苯甲醛反應(yīng)，產(chǎn)物呈紅色；果汁中的果膠可以從它的水溶液中被酒精沉淀出來(lái)。以此來(lái)鑒定果汁。 3 2 驗(yàn)證 本科 選做 3 飴糖的制備 利用大麥芽產(chǎn)生的淀粉梅，麥芽糖酶將熟化的淀粉分解產(chǎn)生具甜味的飴糖 3 2 綜合 本科 選做 4 味精 的摻偽及判斷 從外觀、 pH 值、谷氨酸的比旋光度的多少判斷味精的摻偽 。 3 2 驗(yàn)證 本科 選做 5 蜂蜜 的生化簽定 從感官、快速簡(jiǎn)易、熒光檢驗(yàn)和酶檢 驗(yàn)等鑒別蜂蜜的真假 。 3 2 驗(yàn)證 本科 選做 6 唾液的生物活性觀察 在不同環(huán)境條件下，唾液對(duì)食物的分解。 3 2 驗(yàn)證 本科 選做 八．說(shuō)明 1．《 開(kāi)放性 實(shí)驗(yàn)》 注重 加強(qiáng)學(xué)生 興趣 的培養(yǎng)，因材施教，注意學(xué)生的個(gè)性； 選修學(xué)生可以根據(jù)個(gè)人興趣 ，擇優(yōu)選做。 2． 在《 開(kāi)放性 實(shí)驗(yàn)》教學(xué)中，應(yīng)注意不斷深化和擴(kuò)展教學(xué)內(nèi)容，注意向?qū)W生介紹生物領(lǐng)域新的研究進(jìn)展、新技術(shù)，激發(fā)學(xué)生學(xué)習(xí)興趣和熱情。 九．制定人： 董李平 審核人： 王三根 批 準(zhǔn)人： 朱利泉 十、制定時(shí)間： 2020 年 12 月 19 《創(chuàng)新性實(shí)驗(yàn)》 課程實(shí)驗(yàn)教學(xué)大綱 課程名稱（中文） 創(chuàng)新性實(shí)驗(yàn) 課程性質(zhì) 獨(dú)立設(shè)課 課程屬性 研究型 一．課程 基 本要求 針對(duì) 全校 生物、農(nóng)、林、水產(chǎn)、畜牧 類 各專業(yè)或 相關(guān)專業(yè) 有 著 濃厚興趣，并且具備一定 科研 實(shí)力 或潛在能力的學(xué)生 所 開(kāi)設(shè)的 實(shí)驗(yàn) 課程 。 序 號(hào) 實(shí)驗(yàn)名稱 內(nèi)容提要