生化自動化與標準化(編輯修改稿)
2025-03-02 20:40 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 助波長。二、測定方法2023/2/28 星期日 24n 連續(xù)監(jiān)測法屬于動態(tài)監(jiān)測法，或叫速率法，適用酶活性和代謝產(chǎn)物檢測，測定產(chǎn)物生成或底物消耗速度，多有酶參與，此法測酶的活力而不是酶的濃度（質(zhì)量）。在零級反應期單位時間內(nèi)的吸光度變化 (反應速率 △ A/min)才與酶活力呈正比。二、測定方法2023/2/28 星期日 25n 測定時間的選擇：監(jiān)測時間應根據(jù)所用儀器不影響檢測速度和結果的準確性選在時間反應進程曲線的線性期。通常： 延遲時間： 3060秒 監(jiān)測時間： 120秒二、測定方法2023/2/28 星期日 26n 酶活力計算有兩種方法絕對法：酶活力 (U/L)=△ A(反應液體積 /樣品體積 ) (1000/消光系數(shù) )相對法： (U/L或 mmol/L)=[△ A(測定 )/△ A(標準 )］ 標準物的活力或濃度二、測定方法2023/2/28 星期日 27n 即零級反應速率法 ,亦稱斜率法在較長反應時間區(qū)段內(nèi) (90180秒 )，每隔一定時間 (5~30秒 )讀取一次吸光度值，至少讀取4點，得到 3個以上 △ A，最后算出反應速率△ A/min。二、測定方法2023/2/28 星期日 28n 主要用于其反應過程不成線性，這樣只注意其反應的起始點和終止點，而忽視其中間過程的線性變化。如：測定苦味酸法測 Cr，反應過程中 Vit C、丙酮酸、蛋白質(zhì)等均可與苦味酸生成紅色化合物而干擾反應，通常選擇 1min內(nèi)的兩點進行測定。二、測定方法2023/2/28 星期日 29AlTAS+R1R2A2(吸光度）（時間）速率法A/min=[(A2A1 )(空白 )]/(t2t1)二、測定方法A2TAS+R1A1R2(吸光度）（時間）兩點速率 Ax= A2A1tt2023/2/28 星期日 31n 速率 B法測定／及樣品空白自動補償：在第一反應 (干擾反應 )一直維持線性的前提下，可以從第二反應 (主反應 )速率中扣除第一反應速率的延續(xù)影響。如用于消除膽紅素轉化為膽綠素吸光度下降、對肌酐苦味酸法測定的負干擾等二、測定方法2023/2/28 星期日 32n 雙項同測法：指在不同時間向同一個比色杯加入幾種試劑，(一個通道內(nèi)一次進行兩項反應相關的終點法) 。比如同測游離脂肪酸和甘油三酯。二、測定方法：=某點吸光度 比色杯水空白=(終點測定吸光度 終點空白吸光度)一 (始點測定吸光度 始點空白吸光度 ) (帶試劑空白 ) =
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