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正文內(nèi)容

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量監(jiān)測(cè)(編輯修改稿)

2025-01-28 00:24 本頁(yè)面
 

【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 級(jí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物是否符合原定級(jí)別 , 即是否有原級(jí)別不應(yīng)有的病原體的入侵 ,以便及早采取措施 , 以免疫情擴(kuò)大而蒙受更大的損失 。 另一方面 , 要避免科學(xué)工作者誤用下合適的動(dòng)物 , 避免人獸共患病病原體感染飼養(yǎng)人員 , 保障這些人員的健康 。 3/16/2023 33 2. 對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼養(yǎng)設(shè)施的監(jiān)測(cè) , 為確保這些設(shè)施能否控制微生物污染提供依據(jù) 。 3. 對(duì)引進(jìn)的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)行檢疫 , 避免病原體入侵原有的動(dòng)物群 。 4. 如動(dòng)物群發(fā)生疾病 , 為了確證病原 , 對(duì)患病動(dòng)物進(jìn)行病原學(xué)診斷 , 積累對(duì)疾病的認(rèn)識(shí) ,收集菌株和毒株 , 進(jìn)一步研究病原 , 為診斷試劑和疫苗的制備提供菌株和毒株 。 3/16/2023 34 二、監(jiān)測(cè)方法 ( 一 ) 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物病毒學(xué)檢測(cè)方法 1. 血清學(xué)檢測(cè) 適用于各級(jí)各類實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的經(jīng)常性檢測(cè)和疫情普查 。 常用方法有:酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)、 免疫熒光試驗(yàn) (IFA)、 免疫酶染色試驗(yàn) (IEA)、 血凝試驗(yàn) (HA)、 血凝抑制試驗(yàn)(HI)、 病毒中和試驗(yàn) 、 補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn) 、 瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn) 。 3/16/2023 35 2. 病原學(xué)檢測(cè) 適用于動(dòng)物群中有疾病流行 , 需要檢出病毒或確認(rèn)病毒存在的情況 。 檢測(cè)方法有:病毒分離與鑒定 , 病毒顆粒 、 抗原或核酸的檢出 , 潛在病毒的激活 , 抗體產(chǎn)生試驗(yàn)等 。 例如:采用免疫組化的方法在光鏡下檢查病變組織中的特異性抗原 。采用 HA或 HI方法檢查患病動(dòng)物排泄物或組織懸液中的血凝素抗原;采用電鏡或免疫電鏡技術(shù)檢查組織或排泄物中的病毒顆粒;采用聚丙烯酰胺凝膠電泳 (PAGE)檢查病毒基因組;采用核酸分子雜交技術(shù)或聚合酶鏈反應(yīng) (PCR)檢出組織或排泄物中的病毒核酸 。 3/16/2023 36 ( 二 ) 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物細(xì)菌學(xué)檢測(cè)方法 最常用的方法是病原菌的分離與培養(yǎng)或進(jìn)行動(dòng)物接種 。 部分病原菌 , 如:鼠傷寒沙門菌 、 鼠棒狀桿菌 、 布氏桿菌 、 沙門菌 、 氣管敗血波氏桿菌等 , 可采取血清學(xué)方法 , 但仍需結(jié)合分離培養(yǎng)結(jié)果最后做出診斷 。 對(duì)于泰澤菌 , 由于不能在人工培養(yǎng)基上生長(zhǎng) , 因此宜采用組織壓片 、 鏡檢的方法進(jìn)行檢查 , 并結(jié)合病理檢查結(jié)果最后做出診斷 。 3/16/2023 37 ( 三 ) 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物真菌學(xué)檢測(cè)方法 目前主要采用沙氏培養(yǎng)基分離培養(yǎng) 。 皮膚真菌一般在 25℃ 培養(yǎng) , 深部真菌在 37℃培養(yǎng) 。 不同的真菌具有一定的菌落特點(diǎn) ,鏡下染色檢查可進(jìn)行種屬鑒定 , 有時(shí) , 還需借助于生物化學(xué)反應(yīng)結(jié)果和免疫學(xué)方法進(jìn)行最后診斷 。 3/16/2023 38 ( 四 ) 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物寄生蟲(chóng)學(xué)檢測(cè)方法 1. 體外寄生蟲(chóng) 肉眼觀察法 、 透明膠紙粘取法 、 拔毛取樣法 、皮屑刮取法 、 黑背景檢查法 、 解剖鏡下通體檢查法等 , 主要檢查蚤 、 虱 、 螨等節(jié)肢動(dòng)物 。 2. 體內(nèi)寄生蟲(chóng) 主要檢查蠕蟲(chóng)和原蟲(chóng) , 可用直接涂片法 (糞便 、血液 、 臟器 、 腸內(nèi)容物 )、 飽和鹽水漂浮法或沉淀法 、 透明膠紙肛門周圍粘取法 、 組織或器官剖面壓印法 、 病變組織切片或壓片法 、 尿液的離心法 (如查鼠膀胱線蟲(chóng) )等 。 3/16/2023 39 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的微生物 、 寄生蟲(chóng)檢測(cè)具體操作方法詳見(jiàn) 《 國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物微生物學(xué)和寄生蟲(chóng)學(xué) 的 檢 測(cè) 方 法 ( 嚙 齒 類 和 兔 類 )》( GB/ 1) 。 檢測(cè)方法歸納起來(lái)有病原學(xué)檢測(cè)和血清學(xué)檢測(cè) 。 細(xì)菌 、 真菌和寄生蟲(chóng)以病原學(xué)檢測(cè)為主 ,血清學(xué)檢測(cè)為輔 。 隨著血清學(xué)方法技術(shù)的提高 ,有些病原感染的檢測(cè)也逐漸使用血清學(xué)方法 ,如支原體 、 泰澤菌 、 弓形蟲(chóng)等 。 病毒的常規(guī)定期檢測(cè)以血清學(xué)為主 , 疾病診斷以病原學(xué)檢測(cè)為主 。 3/16/2023 40 三、監(jiān)測(cè)要求 1. 選定監(jiān)測(cè)項(xiàng)目 任何一種實(shí)驗(yàn)動(dòng)物都有許多致病性微生物 、寄生蟲(chóng) , 結(jié)合具體情況選擇合適的檢測(cè)項(xiàng)目 ,既達(dá)到保證動(dòng)物質(zhì)量的目的 , 又可節(jié)省人力物力 。 各國(guó) 、 各地和單位都有一定的檢測(cè)項(xiàng)目 ,雖不盡相同 , 但主要方法類同 。 我國(guó)經(jīng)過(guò)十多年來(lái)對(duì)各地實(shí)驗(yàn)動(dòng)物感染病原微生物 、 寄生蟲(chóng)情況的調(diào)查 , 結(jié)合其他國(guó)家的規(guī)定和經(jīng)驗(yàn) , 制定了我國(guó)嚙齒類和兔類微生物學(xué) 、 寄生蟲(chóng)學(xué)等級(jí)標(biāo)準(zhǔn) , 貓 、 犬 、 猴等中型實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 , 衛(wèi)生部醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理委員會(huì)亦有初步規(guī)定 。 3/16/2023 41 2. 采樣數(shù)量和頻度 檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性 , 要采取合適的動(dòng)物數(shù)量 。采樣動(dòng)物數(shù)可根據(jù)動(dòng)物群體的污染程度而有所不同 。 例如:某種病原體感染率為 1% 的動(dòng)物群體 , 如要確實(shí)查出來(lái) , 最少也得查 100只動(dòng)物 ,但實(shí)際上 , 如果病原體具有中等程度的傳染力 ,若能檢查 10只左右 , 大概就可以達(dá)到目的 。 按照國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定 , 動(dòng)物數(shù)量超過(guò) 100只的生產(chǎn)繁殖單元取樣如下:普通級(jí)動(dòng)物不能少于 10只;清潔級(jí)動(dòng)物檢測(cè) 5~ 10只;飼養(yǎng)于小隔離罩內(nèi)的無(wú)菌動(dòng)物和無(wú)特定病原體動(dòng)物隨機(jī)抽檢 2只;飼養(yǎng)于生產(chǎn)繁殖單元的抽檢 5~ 10只 。 3/16/2023 42 除了采樣的數(shù)量 , 還必須考慮到檢測(cè)的間隔時(shí)間 。 一般來(lái)說(shuō) , 一旦病原體侵入動(dòng)物群體引起感染 , 初期分離病原體較容易 , 抗體的檢出率上升 。 2~ 3個(gè)月后可因某些個(gè)體抗體水平的降低以及新出生的非感染個(gè)體的增加等原因 ,抗體檢出率下降 , 據(jù)此 , 檢測(cè)間隔時(shí)間以 3個(gè)月一次為宜 。 至少每年檢查 2次 , 選在春 、 秋季疾病多發(fā)季節(jié)為宜 。 3/16/2023 43 采樣時(shí) , 宜在動(dòng)物群中不同方位隨機(jī)采取育成動(dòng)物 , 選擇至少 4個(gè)不同的位置采集樣品或采用前哨動(dòng)物放人群內(nèi) , 不時(shí)調(diào)換位置 ,飼養(yǎng)一定時(shí)間后解剖檢查抗體或病原 。 運(yùn)輸途中保證動(dòng)物的安全和避免污染 。 引種的動(dòng)物則需有檢疫隔離期 , 小鼠 、 大鼠和豚鼠 l~ 7天 , 兔 21天 , 犬 、 貓 21~ 28天 , 猴l~ 9周 。 3/16/2023 44 一般來(lái)說(shuō) , 無(wú)論病原學(xué)或血清學(xué)檢測(cè) , 檢測(cè)結(jié)果陽(yáng)性者表示該群動(dòng)物有該病原體感染的存在 。 但作為疾病病原體的確定 , 還需要進(jìn)一步分析 。 如果檢測(cè)結(jié)果陰性 , 一般來(lái)說(shuō)可作為無(wú)此病原體存在的依據(jù) 。 但檢測(cè)結(jié)果亦受多種因素的影響 。 如:取材數(shù)量 、 感染率的高低 、 取材頻率 、 取材對(duì)象 (動(dòng)物年齡 、 疾病的早晚期等 )、方法學(xué)的選擇 (病原學(xué)或血清學(xué)檢測(cè) )、 方法學(xué)的敏感性等 , 均與檢測(cè)結(jié)果有密切相關(guān) 。 3/16/2023 45 第三節(jié) 飼料質(zhì)量監(jiān)控 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物作為生物體離不開(kāi)營(yíng)養(yǎng) , 飼料是實(shí)驗(yàn)動(dòng)物攝人營(yíng)養(yǎng)素的主要來(lái)源 。 只有良好的營(yíng)養(yǎng)才能使實(shí)驗(yàn)動(dòng)物保持良好的健康狀態(tài) , 而健康的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物才能確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠 。 因此 ,加強(qiáng)飼料質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)化管理 , 是實(shí)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物標(biāo)準(zhǔn)化的重要環(huán)節(jié) 。 3/16/2023 46 一、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼料生產(chǎn)加
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