雙水相萃取詳細(xì)資料(編輯修改稿)
2025-01-17 21:43 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 有不同的分配。 n 鹽的正負(fù)離子在兩相間的分配系數(shù)不同，由于各相應(yīng)保持電中性，因而在兩相中形成電位差，這對 帶電生物大分子 的分配，產(chǎn)生很大的影響。K＞ 1 分配在上相K+≈1 分配在下相在 電，卵蛋白帶負(fù)電。當(dāng)加入 NaCl時，其濃度低于 50mmol/L時可見上相電位低于下相電位，使溶菌酶分配在上相，從而分配系數(shù)增大。 而卵蛋白的分配系數(shù)減小。結(jié)論：加入適當(dāng)?shù)柠}類，會大大促進(jìn)帶相反電荷的生物大分子的分離。pH值對分配的影響源于兩個方面的原因：（一） pH值會影響蛋白質(zhì)中可以解離基團(tuán)的解離度，因而改變蛋白質(zhì)所帶的電荷和分配系數(shù)。（二） pH值會影響磷酸鹽的解離程度，改變 H2PO4和 HPO42之間的比例，而影響分配系數(shù)。npH的微小變化會使蛋白質(zhì)的分配系數(shù)改變 2～ 3個數(shù)量級。n 溫度影響相圖，特別在臨界點(diǎn)附近，因而也影響分配系數(shù)，n 溫度越高發(fā)生相分離所需的高聚物濃度越高 工業(yè)方面 小分子分離和純化 技術(shù)的新發(fā)展雙水相萃取系統(tǒng)的優(yōu)點(diǎn)? 直接從 cell碎片勻漿中萃取 prot、而無需將細(xì)胞碎片分離? 雙水 相 系統(tǒng)平衡時間短，含水量高，界面張力低，成相聚合物對蛋白質(zhì)有穩(wěn)定作用，為生物活性物質(zhì)提供了溫和的分離環(huán)境? 操作簡便，經(jīng)濟(jì)省時，易于放大 .由于很容易達(dá)到平衡，用商業(yè)上的離心機(jī)能使相分離完全，分配系數(shù)的值重演性很好，故可直接放大? 改變體系的 pH和電解質(zhì)濃度可進(jìn)行反萃取應(yīng)用范圍 ：胞內(nèi)酶的提?。p水相系統(tǒng)可用于除去細(xì)胞破碎后的勻漿液中的碎片以及酶的進(jìn)一步精制）運(yùn)用雙水相法萃取需滿足的條件 ：；，使在一定的相體積比時，經(jīng)過一次萃取就能得到較高的收率；。通常將蛋白質(zhì)分配在上相，而細(xì)胞碎片分配在下相（鹽）合理調(diào)整雙水相組成，從實(shí)用角度看，碎片分配在下相的好處多Y= 100% ☆ 目標(biāo)蛋白質(zhì)在上相的收率（ Y）為： 實(shí)際上 最困難的是 如何在保證碎片分配在下相的同時
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