【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 l單克隆抗體 :由一個(gè) B細(xì)胞分化增殖的子代細(xì)胞(漿細(xì)胞 )產(chǎn)生針對(duì)單一抗原決定簇的抗體。 l由于 B細(xì)胞壽命很短 ,使它的實(shí)際應(yīng)用受到限制。采用淋巴細(xì)胞雜交瘤技術(shù) ,將產(chǎn)生特定抗體的 B細(xì)胞與能無限生長(zhǎng)的骨髓瘤細(xì)胞融合 ,形成 B細(xì)胞雜交瘤。這樣 ,既能產(chǎn)生抗體 ,又能無限增殖。通常所說的單克隆抗體 ,就是這種克隆化的B細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞所產(chǎn)生的抗體。抗原脾B淋巴細(xì)胞 腫瘤細(xì)胞(缺乏 HGPRT酶 )融合HAT培養(yǎng)基B淋巴細(xì)胞死亡 腫瘤細(xì)胞死亡雜交生存雜交瘤細(xì)胞 A 雜交瘤細(xì)胞 B 雜交瘤細(xì)胞 C培養(yǎng)克隆單一細(xì)胞利用 ELISA篩選分泌抗體株雜交瘤細(xì)胞分泌單克隆抗體（六）抗體的抗原性l抗體是一種動(dòng)物針對(duì)某種抗原產(chǎn)生的。為免疫球蛋白 ,結(jié)構(gòu)復(fù)雜 ,分子量大 ,對(duì)第二種動(dòng)物來說就能構(gòu)成抗原。l用一種動(dòng)物的抗體免疫異種動(dòng)物 ,就能獲得抗這種抗體的抗體 ,這種抗體稱為抗抗體或二級(jí)抗體。 二、細(xì)胞因子l機(jī)體的免疫細(xì)胞和非免疫細(xì)胞合成和分泌的多種能調(diào)節(jié)細(xì)胞生理功能的小分子多肽物質(zhì) (糖蛋白 )統(tǒng)稱為細(xì)胞因子。l能夠產(chǎn)生細(xì)胞因子細(xì)胞主要有三類：? 活化的免疫細(xì)胞 ；? 基質(zhì)細(xì)胞類 ,包括血管內(nèi)皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、上皮細(xì)胞等；? 某些腫瘤細(xì)胞 。l抗原刺激、感染、炎癥等許多因素都可刺激細(xì)胞因子的產(chǎn)生 ,且各細(xì)胞因子之間也可彼此促進(jìn)合成和分泌。(一 )淋巴因子?淋巴細(xì)胞產(chǎn)生的細(xì)胞因子 ,又稱淋巴因子 (LK)?目前發(fā)現(xiàn)的淋巴因子有 20多種 ,分別作用于巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、粒細(xì)胞、血管壁等 ,有的還直接作用于靶細(xì)胞或病毒。(二 )白細(xì)胞介素 (IL)?介導(dǎo)白細(xì)胞間相互作用的細(xì)胞因子稱為白細(xì)胞介素?目前發(fā)現(xiàn)的已有 18種 ,用 IL1……IL18 等表示。?活化 TH細(xì)胞、 B細(xì)胞、單核巨噬細(xì)胞等產(chǎn)生。有的增強(qiáng)細(xì)胞免疫功能 , 有的促進(jìn)體液免疫 ,有的對(duì)兩者均有促進(jìn)作用。?巨噬細(xì)胞趨化因子 (MCF) ?移動(dòng)抑制因子 (MIF) ?特異性巨噬細(xì)胞武裝因子 (SMAF) ?促有絲分裂因子 (MF) ?轉(zhuǎn)移因子 (TF)?淋巴毒素 (LT)?腫瘤壞死因子 (TNF)?干擾素 (IFN)?皮膚反應(yīng)因子 (SRF)?穿孔素?集落刺激因子 (CSF)第四節(jié)、特異性免疫的抗感染作用 體液免疫的抗感染作用特異性免疫抗感染作用細(xì)胞免疫的抗感染作用 :病毒、毒素中和 :抗體 Fc段與吞噬細(xì)胞 Fc段受體結(jié)合促進(jìn)對(duì)抗原物的吞噬清除。 :補(bǔ)體介導(dǎo) : :抗體介導(dǎo)IgE→ Ⅰ ,IgA、 M、 A→ Ⅱ 、Ⅲ :細(xì)胞外細(xì)菌感染 ,主要依靠體液免疫 。細(xì)胞內(nèi)寄生菌 ,主要依靠細(xì)胞免疫。 T細(xì)胞活化 ,釋放多種淋巴因子 ,破壞細(xì)胞內(nèi)寄生菌。 :Tc細(xì)胞特異性殺傷病毒或裂解感染病毒的細(xì)胞。效應(yīng) T細(xì)胞釋放淋巴因子第五節(jié)、特異性免疫獲得途徑特異性免疫主動(dòng)獲得被動(dòng)獲得天然主動(dòng) :患傳染病、隱性傳染獲得人工主動(dòng) :接種疫苗、類毒素獲得天然被動(dòng) :經(jīng)胎盤、初乳或卵黃獲得人工被動(dòng) :接種抗毒素、高免血清、卵黃獲得 第八章、變態(tài)反應(yīng) ?學(xué)習(xí)目標(biāo)：掌握變態(tài)反應(yīng)的概念及變態(tài)反應(yīng)的類型；了解各型變態(tài)反應(yīng)的發(fā)病機(jī)制；了解臨床常見疾病及防治方法。u變態(tài)反應(yīng) (超敏反應(yīng)或過敏反應(yīng) ):指機(jī)體對(duì)某些抗原初次應(yīng)答后 ,再次接受相同抗原刺激時(shí) ,發(fā)生的一種以機(jī)體生理功能紊亂或組織細(xì)胞損傷為主的特異性免疫應(yīng)答。u變應(yīng)原 :引起變態(tài)反應(yīng)的抗原物質(zhì)?？梢允峭耆乖?,也可以是半抗原。反應(yīng)具有免疫學(xué)反應(yīng)的特異性和記憶性的特征 ,可涉及細(xì)胞和體液免疫的整個(gè)過程 ,但以某一種類型的反應(yīng)為主。u根據(jù)變態(tài)反應(yīng)發(fā)病機(jī)制不同 ,可 將變態(tài)反應(yīng)分為 I(速發(fā) )型、 II(細(xì)胞毒 )型、 III(免疫復(fù)合物型 )、 IV(遲發(fā) )型 ,其中前三型均由體液免疫介導(dǎo) ,第 IV型由細(xì)胞免疫介導(dǎo)。一、 Ⅰ 型變態(tài)反應(yīng)（速發(fā)型）(一 )主要特點(diǎn)、消退快 ,一般不易造成組織細(xì)胞的損傷 ,多表現(xiàn)為功能的紊亂； IgE和 IgG4,參與的細(xì)胞為肥大細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞等；；；。IgE與肥大細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞表面的 Fc受體結(jié)合變應(yīng)原與細(xì)胞表面的 IgE特異性結(jié)合細(xì)胞脫顆粒 ,膜磷脂代謝 (降解 )平滑肌收縮 ,腺體分泌增加 ,血管擴(kuò)張 ,血管通透性增加 ,嗜酸性粒細(xì)胞浸潤(rùn)變應(yīng)原 初次再次消化道(過敏性胃腸炎 )全身性(過敏性休克 )呼吸道(哮喘、變應(yīng)性鼻炎 )皮膚(蕁麻疹 )致敏階段發(fā)敏階段機(jī)體 IgE組胺、 LTs、 PGE PAF、激肽原酶、 ECFA等橋聯(lián)反應(yīng)產(chǎn)生 (二 )Ⅰ 型變態(tài)反應(yīng)發(fā)生機(jī)制過敏原處理和表達(dá)抗原表達(dá) 產(chǎn)生 IgE 激活肥大細(xì)胞 釋放介質(zhì)（三）常見疾病216。常見的過敏反應(yīng)有兩類 : 一是因大量過敏原 (如靜脈注射 )進(jìn)人體內(nèi)而引起的急性全身性反應(yīng) ,比如青霉素過敏反應(yīng) 。 二是局部過敏反應(yīng) ,這類反應(yīng)盡管較廣泛 ,但易被臨床獸醫(yī)忽視。主要有由飼料、霉菌、花粉等。216。過敏癥、花粉癥、支氣管哮喘、蕁麻疹、過敏性胃腸炎等。二、 Ⅱ 型超敏反應(yīng) (細(xì)胞毒型 )lII型超敏反應(yīng)是由 IgG或 IgM類抗體與靶細(xì)胞表面相應(yīng)抗原結(jié)合后 ,在補(bǔ)體、吞噬細(xì)胞和 NK細(xì)胞參與作用下 ,引起的以細(xì)胞溶解或組織損傷為主的病理性免疫反應(yīng)(一 )主要特點(diǎn)、 IgM類抗體直接作用于細(xì)胞表面的抗原或半抗原；、單核吞噬細(xì)胞及其它細(xì)胞。 (二 )Ⅱ 型超敏反應(yīng) 發(fā)生機(jī)制細(xì)胞表面固有抗原或吸附于細(xì)胞表面的抗原、半抗原?相應(yīng)抗體 (IgG、 IgM)激活補(bǔ)體 調(diào)理吞噬 NK細(xì)胞吞噬細(xì)胞刺激或阻斷作用溶解靶細(xì)胞 吞噬破壞 靶細(xì)胞 ADCC作用靶細(xì)胞損傷靶細(xì)胞功能改變Ⅱ 型變態(tài)反應(yīng)造成細(xì)胞損傷的各種方式（三）常見疾??；； ,因感染或藥物引起的血細(xì)胞減少癥；； 。三、 Ⅲ 型超敏反應(yīng) (免疫復(fù)合物型 )u由中等大小可溶性免疫復(fù)合物沉積于局部或全身毛細(xì)血管基底膜后 ,通過激活補(bǔ)體和血小板、嗜堿性、嗜中性粒細(xì)胞參與作用下 ,引起的以充血水腫、局部壞死和中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)為主要特征的炎癥反應(yīng)和組織損傷。(一 )主要特點(diǎn) IgG、 IgM類抗體結(jié)合形成中等大小可溶性復(fù)合物 ,沉積于全身或局部血管的基底膜； ,吸引白細(xì)胞和血小板聚集； ,病程較長(zhǎng)。(二 )Ⅲ 型超敏反應(yīng)發(fā)病機(jī)制中等大小可溶性免疫復(fù)合物沉積于組織結(jié)合并激活補(bǔ)體系統(tǒng)嗜堿性粒細(xì)胞、肥大細(xì)胞、血小板激活血管活性胺類毛細(xì)血管通透性增加局部充血水腫中性粒細(xì)胞侵潤(rùn)吞噬免疫復(fù)合物 ,釋放溶酶體酶局部充血破壞 局部缺血、出血微血栓形成激活內(nèi)源性凝血系統(tǒng)、血小板凝集催化作用釋放血管炎免疫復(fù)合物引起的組織損傷（三）常見疾病u急性血清病、鏈球菌感染后的腎小球腎炎、過敏性休克樣反應(yīng)、自身免疫復(fù)合物病 (犬天皰瘡、全身性紅斑狼瘡 )等疾病。四、 IV型超敏反應(yīng) (遲發(fā)型 )lⅣ 型超敏反應(yīng)是由效應(yīng) T細(xì)胞與相應(yīng)抗原作用后，引起的以單核細(xì)胞浸潤(rùn)和組織細(xì)胞損傷為主要特征的炎癥反應(yīng)。(一）主要特點(diǎn) T細(xì)胞與相應(yīng)致敏原作用而引起的以單核細(xì)胞（巨噬細(xì)胞和淋巴細(xì)胞）浸潤(rùn)和細(xì)胞變性壞死為主要特征；（一般在抗原刺激后 2472h發(fā)生），消退特慢；。（二） IV型超敏反應(yīng)發(fā)生機(jī)制 （三）常見疾?。耗承┌麅?nèi)寄生菌、病毒 (麻疹病毒等 )、真菌 (念珠菌等 )及血吸蟲等引起的感染。上述四型變態(tài)反應(yīng)可部分同時(shí)存在于同一個(gè)體 ,同一種變應(yīng)原亦可能引起不同型的變態(tài)反應(yīng)。如青霉素可引起過敏性休克 (1型 )、溶血性貧血(2型 )、血清病樣反應(yīng) (3型 )、接觸性皮炎 (4型 ) 五、防治原則（一）預(yù)防原則?；?：短期內(nèi)進(jìn)行小劑量、多次注射特異性變應(yīng)原進(jìn)行脫敏治療；?：采用多次、少量、長(zhǎng)間隔（ 57天）皮下注射特異性必要性進(jìn)行減敏治療；（二）藥物治療?：?：?：?。第九章、血清學(xué)試驗(yàn)?學(xué)習(xí)目標(biāo)：掌握凝集試驗(yàn)、沉淀試驗(yàn)、最適比例和帶現(xiàn)象的概念；掌握血清學(xué)試驗(yàn)的一般規(guī)律；了解補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)、中和試驗(yàn)、免疫標(biāo)記技術(shù)的原理及應(yīng)用。使學(xué)生能夠運(yùn)用免疫學(xué)方法鑒定微生物的感染和對(duì)病原微生物進(jìn)行預(yù)防。第一節(jié)、血清學(xué)試驗(yàn)概述 抗原和相應(yīng)抗體無論是在體內(nèi)或體外均能發(fā)生特異性結(jié)合 , 由于抗體存在于血清中 ,所以將體外的抗原抗體反應(yīng)統(tǒng)稱為 血清學(xué)反應(yīng) 。一、血清學(xué)反應(yīng)的一般規(guī)律（一）特異性和交叉性?抗原與抗體結(jié)合具有高度的特異性。一種抗原只能與由此決定簇所誘導(dǎo)產(chǎn)生的抗體結(jié)合?近緣種型之間往往含有部分相同的抗原成分，因而能引起交叉反應(yīng) ,次種反應(yīng)特性稱為 交叉性或類屬性 。（二）最適比例和帶現(xiàn)象?抗原抗體反應(yīng)是一種多價(jià)相互作用的結(jié)合?？乖贵w在比例適當(dāng)時(shí) ,抗原抗體結(jié)合后尚有未飽和的結(jié)合點(diǎn) ,可以繼續(xù)與游離的抗原、抗體或與其相鄰的未飽和的結(jié)合物連接 ,逐漸形成愈來愈大的復(fù)合物 ,出現(xiàn)肉眼可見的反應(yīng)。 當(dāng)抗原抗體比例最適時(shí) ,反應(yīng)物最多、反應(yīng)最明顯、出現(xiàn)最快 。?不論是抗原過剩 ,還是抗體過剩 ,聚合作用均將被阻滯而無可見反應(yīng) ,這種現(xiàn)象稱為 帶現(xiàn)象 。?由于抗體過剩所引起的抑制帶稱為 前帶 。凝集反應(yīng)往往出現(xiàn)前帶 ,故通常固定抗原 ,稀釋抗體。?由于抗原過剩所引起的抑制帶稱為 后帶 。沉淀反應(yīng)往往出現(xiàn)后帶。故通常固定抗體 ,稀釋抗原。（三）反應(yīng)的可逆性抗原抗體結(jié)合不是化學(xué)結(jié)合，是分子表面的結(jié)合。此種結(jié)合易受理化因素的影響，結(jié)合的溫度在 0~40℃ ， pH在 4~9范圍內(nèi)。如溫度超過 60℃ ， pH降到 3以下時(shí)，則抗原抗體復(fù)合物又可重新游離。分離后的抗原抗體仍然保留其理化性質(zhì)與免疫學(xué)活性。利用這一特點(diǎn)，可進(jìn)行免疫親和層析，以提純抗原或抗體。（四）反應(yīng)的二階段性?第一階段是抗原和抗體以各種比例相互結(jié)合 ,作用進(jìn)行快 ,幾秒至幾分鐘即可 ,但無可見反應(yīng)?第二階段是在參與反應(yīng)的介質(zhì)作用下出現(xiàn)各種可見反應(yīng) ,反應(yīng)進(jìn)行較慢 ,需幾分鐘、幾十分鐘或更久。第二階段反應(yīng)易受電解質(zhì)、溫度、 pH等的影響。（五）反應(yīng)的敏感性?抗原抗體不僅有高度的特異性 ,還具有極高的敏感性 。不僅可用于定性 ,還可用以檢測(cè)微量的抗原或抗體 ,其靈敏程度大大超過當(dāng)前所應(yīng)用的常規(guī)化學(xué)方法。 (檢出抗體的最小氮量 /ml)?血清學(xué)反應(yīng)可以用已知的抗體測(cè)未知的抗原 ,也可以用已知的抗原測(cè)未知的抗體。二、影響抗原