抗體的選擇和保存指南(編輯修改稿)
2025-09-19 00:55 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 果要長期保存則最好是在20度 or 80度。最關(guān)鍵的一點(diǎn)是要根據(jù)說明書推薦的方式來正確的保存抗體！但是，腹水形式的產(chǎn)品請在收到后立即凍起來！因為該類產(chǎn)品含有大量的蛋白酶，長期在4度保存會導(dǎo)致抗體的降解！4. 大部分抗體的運(yùn)輸條件：一般的運(yùn)輸過程需要12周的時間，所以是在4度的條件下來完成的。 4度運(yùn)輸最主要的目的是為了避免反復(fù)凍融對抗體活性的損害（如果使用干冰運(yùn)輸，那么收到時抗體是凍起來的，為了分裝就需要解凍。這就多了一次凍融的過程）。所以運(yùn)輸過程中絕對避免干冰運(yùn)輸！特殊抗體的保存條件： 6. 酶聯(lián)抗體：永遠(yuǎn)保存在4度，避免凍起來。否則會導(dǎo)致酶活性的下降或者喪失 7. 偶聯(lián)抗體：所有偶聯(lián)抗體都是在棕色管中或使用錫箔紙避光保存。尤其是熒光抗體，對光極為敏感，因此在所有的實(shí)驗階段也是要避光操作的！ 8. IgG3的同型對照：永遠(yuǎn)保存在4度，避免凍起來。因為如果出現(xiàn)凍融過程，該抗體非常容易形成多聚體無論是保存還是運(yùn)輸，絕對避免反復(fù)凍融！ 反復(fù)凍融會導(dǎo)致抗體變性，導(dǎo)致多聚體形成，從而降低抗體的結(jié)合能力！抗體保存其它相關(guān)信息： 關(guān)于加入甘油保存：有些人會加50%的甘油到抗體中來避免反復(fù)凍融，甘油在20度 會降低冰點(diǎn)。這對很多抗體可能是可行的。但是abcam僅對非常小的一部分抗體檢測過其在這種條件下的穩(wěn)定性；而abcam只對按照推薦條件保存的抗體提供質(zhì)量保證！加入甘油的溶液不建議在80度保存，因為這已經(jīng)超過了甘油的冰點(diǎn)。如果您要加入甘油來保存抗體的話，請謹(jǐn)慎注意無菌操作，避免污染！關(guān)于蛋白保護(hù)劑： 蛋白在高濃度時更不容易降解（1 mg/ml 或者更高），這就是為什么在抗體中加入BSA之類作為穩(wěn)定劑的原因了；另一方面，加入的蛋白也可以減少抗體由于管壁吸附所造成的損失。但是如果抗體要用來標(biāo)記的話，則不能加入蛋白穩(wěn)定劑，因為這些穩(wěn)定劑會和抗體一起競爭結(jié)合標(biāo)記物。關(guān)于疊氮化鈉（sodium azide）的使用： 為了防止微生物污染，疊氮化鈉經(jīng)常被加入到抗體中（% (w/v)）。％%的疊氮化鈉，在說明書的“Storage buffer”中有標(biāo)明的。在下述情況中不能使用疊氮化鈉：9. 如果抗體用于染色或處理活細(xì)胞，用于體內(nèi)研究： 疊氮化鈉在抵抗微生物的同時，對其它大部分有機(jī)物也是有毒的，因為它阻斷了線粒體的cytochrome electron transport system.10. 要偶聯(lián)帶有氨基基團(tuán)的抗體： 疊氮化鈉會干擾任何含有氨基基團(tuán)的偶聯(lián)，因此在進(jìn)行偶聯(lián)之前，應(yīng)將疊氮化鈉去除。偶聯(lián)后的抗體可以加入疊氮化鈉保存，％。對于需要偶聯(lián)的抗體，thimerosal (merthiolate)可以替代疊氮化鈉作為保護(hù)劑！注：疊氮化鈉的去除方式： 可以通過凝膠電泳或過濾的方式去除！IgG的分子量是150kDa (IgM 是~ 600kDa)。 疊氮化鈉的分子量只有65Da。使用cut off 14kDa的濾膜即可將疊氮化鈉從抗體中去除抗體說明書樣本Product Name NFkB p105 / p50 antibody [E381] (注:E381是指克隆號)Product type Primary antibodiesDescription Rabbit monoclonal [E381] to NFkB p105 / p50Immunogen A synthetic peptide corresponding to residues in the nuclear factor NFkB p50 subunit.Reacts with Hu, Ms, Rat (注:人 小鼠 大鼠)Specificity This antibody will detect both forms:
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