【文章內(nèi)容簡介】 取F1代南美白對蝦親 本DNAF2代南美白對蝦TSV病毒感染TSV抗性篩選感病組抗病組提取DNA提取DNARAPD分析擴增的DNA片斷差異獲得抗TSV病毒的RAPD標記轉(zhuǎn)化為共顯性的SCAR標記標記鑒定建立抗的品系抗病毒基因純合型的個體（2）SPR南美白對蝦的良種選育對選育建立或引進的抗TSV的SPR品系，采用家系選擇、性狀固定、性能測定后，建立后備品系；DNA特征帶譜分析，篩選出各品系的特異性分子遺傳標記；運用同樣的方法進行新一輪的品系選育、養(yǎng)殖效果檢驗、種質(zhì)鑒定與評價，建立良種品系；對選育出的種群（品系）進行遺傳結(jié)構的分子生物學特性分析，研究和建立優(yōu)良種群（品系）的延續(xù)保護技術。南美白對蝦良種選育的技術路線引進對蝦后備親蝦第四次挑選親蝦第五次挑選配組9～10M后備親蝦出售第三次挑選親蝦出售繁育90～120d商品蝦成蝦第二次挑選幼蝦第一次挑選蝦苗研究解決的主要問題① 采用家系選擇法，篩選南美白對蝦抗病家系。② 采用RAPDSCAR、AFLP或SSR等方法，研究抗TSV病毒的分子遺傳標記；定向選育，選育出抗TSV病毒的SPR南美白對蝦新品系。③ 采用家系選擇，篩選建立生產(chǎn)性能良好的SPR南美白對蝦后備品系。④運用RAPD、AFLP、SSR等技術，獲得后備品系和重要經(jīng)濟性狀的分子遺傳標記，結(jié)合家系選擇與個體選擇，篩選建立遺傳性狀穩(wěn)定、高產(chǎn)、對桃拉病毒抗性強的SPR南美白對蝦優(yōu)良品系。⑤ 進行繁群遺傳結(jié)構的動態(tài)監(jiān)測，確定繁群的適宜大小、親蝦選擇標準，優(yōu)化配組，評估對蝦繁群的種質(zhì)現(xiàn)狀，建立原良種保存技術。技術關鍵南美白對蝦抗TSV病毒的分子遺傳標記的篩選，以及優(yōu)質(zhì)、高產(chǎn)、抗病等優(yōu)異基因的聚合選育。創(chuàng)新內(nèi)容① 利用分子標記輔助育種，精細定位抗病基因，篩選抗病品種，比傳統(tǒng)方法準確可靠，并能大大縮短良種選育的周期。② 通過常規(guī)育種技術與分子標記輔助選擇技術相結(jié)合，聚合優(yōu)質(zhì)、高產(chǎn)、抗病等的優(yōu)異基因，選育出具有市場競爭力的新品種和新組合。③ 采用無特定病原 SPF南美白對蝦作為選育材料，選育得到的新品種不攜帶《國際水生動物衛(wèi)生法典》所規(guī)定的6種危害嚴重的疫病原。（三）課題考核指標主要技術指標（包括形成的新產(chǎn)品、新裝置、新材料、新工藝、專利、技術標準、論文專著等數(shù)量、質(zhì)量指標及其水平等）①建立南美白對蝦抗TSV病毒的分子遺傳標記；②選育出1～2個抗TSV病毒的優(yōu)良品系，抗病力達到85%以上；③發(fā)表（SCI）論文3篇；④編寫SPR南美白對蝦良種標準（省級地方標準）。主要經(jīng)濟指標（包括技術及成果應用所形成的小試、中試、生產(chǎn)線年生產(chǎn)規(guī)模、經(jīng)濟效益、示范基地數(shù)量指標等）①項目完成后，年生產(chǎn)銷售SPR南美白對蝦親蝦2萬組；②SPR南美白對蝦親蝦售價按100元／組計，達產(chǎn)期，年銷售收入200萬元；③利潤總額120萬元；④按進口SPF南美白對蝦50美元／對計，年節(jié)匯100萬美元。四、課題環(huán)境與基礎條件（一）國內(nèi)外現(xiàn)狀（包括國內(nèi)外同類技術、產(chǎn)品研發(fā)水平，專利狀況，研究方向和重點等情況）自上世紀90年代初就在全球蔓延、肆虐的病毒性蝦病，至今仍然困擾著我們，并嚴重制約了對蝦養(yǎng)殖業(yè)的健康、可持續(xù)發(fā)展。運用分子標記輔助選育技術，快速建立性狀優(yōu)良、抗病力強的對蝦品系，為養(yǎng)殖業(yè)提供SPF和SPR蝦苗是解決這一問題的最有效途徑。DNA分子標記具有標記數(shù)量多、多態(tài)性高等優(yōu)點，因此發(fā)展迅速、得到廣泛應用。美國運用RFLP、RAPD、微衛(wèi)星DNA等技術對南美白對蝦的遺傳多樣性和種群的遺傳結(jié)構進行了研究，建立了23個種群特異性SSR標記，選育出36個經(jīng)濟性狀優(yōu)良的SPF南美白對蝦品系，選育結(jié)果使南美白對蝦對TSV抗病性達到80－90%；法國海洋開發(fā)研究院通過感染試驗篩選獲得了抗病種群，利用常規(guī)的選擇育種技術結(jié)合分子標記技術，經(jīng)過了15代的選育，建立了抗IHHNV的藍對蝦品系；澳大利亞聯(lián)邦科學和工業(yè)研究院通過對日本對蝦的選育，使商業(yè)化養(yǎng)殖中每代的生長表現(xiàn)平均提高10%～15%。我國黃海水產(chǎn)研究所進行了中國對蝦抗WSSV分子標記的初步研究，選育獲得了對白斑綜合癥病毒有一定抗性的中國對蝦群體；廣西研究所經(jīng)過三年的選育，建立了養(yǎng)殖性能優(yōu)良的SPF南美白對蝦繁殖群體。有關抗特定病原南美白對蝦的良種選育，國內(nèi)目前尚未見報道。（二）國內(nèi)外市場現(xiàn)狀分析南美白對蝦殼薄體肥，肉質(zhì)鮮美、營養(yǎng)豐富，深受消費者特別是歐美人士的歡迎，暢銷于國際水產(chǎn)品貿(mào)易市場，成為世界各地養(yǎng)蝦業(yè)者競相養(yǎng)殖的對象。在我國的沿海省區(qū)南美白對蝦已成為養(yǎng)殖對蝦的主導品種。全球?qū)ξr貿(mào)易市場一直是供不應求，年需求量約為210萬噸，年供應量約為170萬噸，存在較大的缺口，對蝦產(chǎn)品的貿(mào)易空間很大。對蝦是我國最重要的出口創(chuàng)匯水產(chǎn)品，年出口量曾經(jīng)達到5萬噸以上。在我國出口農(nóng)產(chǎn)品中，對蝦的出口創(chuàng)匯額占16％左右。目前，廣西沿海對蝦養(yǎng)殖面積25萬畝以上，按年養(yǎng)殖2造、放養(yǎng)量5萬尾／畝計，蝦苗的年需求量約為250億尾。按照農(nóng)業(yè)部《無公害食品 對蝦養(yǎng)殖技術規(guī)范》，無公害對蝦養(yǎng)殖必須采用高健康（SPF或SPR）蝦苗，但是，令人擔憂的是廣西的高健康蝦苗的良種覆蓋率尚不足15%。因而，開發(fā)高健康SPR對蝦良種，對于我區(qū)養(yǎng)蝦業(yè)的健康發(fā)展，推進無公害對蝦養(yǎng)殖基地的建設，提高水產(chǎn)品質(zhì)量，提升我區(qū)養(yǎng)殖對蝦的國際市場競爭力等均具有重要意義。（三）與國內(nèi)外同類產(chǎn)品或技術的競爭分析南美白對蝦是廣西養(yǎng)殖對蝦的主導品種，同時也是廣西主要的出口水產(chǎn)品，其養(yǎng)殖面積占全區(qū)沿海對蝦養(yǎng)殖總面積的85%以上，采用高健康蝦苗是規(guī)避病害風險的重要措施。高健康SPF/SPR蝦苗的生產(chǎn)在我國方興未艾，產(chǎn)品供不應求。（四）課題實施應當具備的條件（人員條件、資金條件、基礎條件及其他相關條件）水產(chǎn)養(yǎng)殖、遺傳學、分子生物學等多學科人才；遺傳分析儀、PCR擴增儀、電泳設備、凝膠成像系統(tǒng)等儀器設備；南美白對蝦繁育與養(yǎng)殖試驗基地；開展課題所需的科研經(jīng)費。（五）現(xiàn)有條件(包括前期所取得與課題相關的成果和技術積累情況，相關領域的試驗及示范基地建設情況，以及本課題技術水平、所處地位等情況)2004年，我們完成了農(nóng)業(yè)部下達的948項目《SPF南美白對蝦的引進》，在引