水中細(xì)菌總數(shù)的測定和大腸菌群的檢測(編輯修改稿)
2025-08-26 02:38 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 00+++2800++9200++9400+++18000++23000+++96000+++238000++++＞238000表5大腸菌群檢索表（中度污染水）接種水樣量/mL每升水樣中大腸菌群數(shù)備注101＜90（10，1， mL各一份）+90+90+95++180++190++220+230+++280++920++940+++1800++2300+++9600+++23800++++＞23800表6大腸菌群檢索表（輕度污染水）接種水樣量/mL每升水樣中大腸菌群數(shù)備注100101＜9（100，10，1，）+9+9+++18++19++22+23+++28++92++94+++180++230+++960+++2380++++＞2380表7 大腸菌群變異不大的水源水陽性管數(shù)012345678910每升水樣中大腸菌群數(shù)＜10112236516992120160230＞230備注接種水樣總量100mL(10mL10份)操作步驟同生活用水或食品生產(chǎn)用水的檢驗(yàn)。同時應(yīng)注意，接種量1mL及1mL以內(nèi)用單倍乳糖膽鹽發(fā)酵管；接種量在1mL以上者，應(yīng)保證接種后發(fā)酵管(瓶)中的總液體量為單倍培養(yǎng)液量。然后根據(jù)證實(shí)有大腸菌群存在的陽性管(瓶)數(shù)，查表表表6或表7，報(bào)告每升水樣中的大腸菌群數(shù)(MPN)。 附：濾膜法 濾膜法所使用的濾膜是一種微孔濾膜。將水樣注入已滅菌的放有濾膜的濾器中，經(jīng)過抽濾，細(xì)菌即被均勻地截留在膜上，然后將濾膜貼于大腸菌群選擇性培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)。再鑒定濾膜上生長的大腸菌群的菌落，計(jì)算出每升水樣中含有的大腸菌群數(shù)(MPN)。 (1)準(zhǔn)備工作： 1)濾膜滅菌：將3號濾膜放入燒杯中，加入蒸餾水，置于沸水浴中蒸煮滅菌3次，每次15min。前兩次煮沸后需換無菌水洗滌23次，以除去殘留溶劑。 2)濾器滅菌：準(zhǔn)備容量為500mL的濾器，用點(diǎn)燃的酒精棉球火焰滅菌，也可用121℃高壓滅菌20min。 3）培養(yǎng)：將品紅亞硫酸鈉培養(yǎng)基放入37℃培養(yǎng)箱內(nèi)預(yù)溫3060min。 (2)過濾水樣：1)用無菌鑷子夾取滅菌濾膜邊緣部分，將粗糙面向上貼放于已滅菌的濾床上，輕輕地固定好濾器漏斗。水樣搖勻后，取333mL注入濾器中，加蓋，打開濾器閥門，在—50kPa壓力下進(jìn)行抽濾。 2)水樣濾完后再抽氣約5s，關(guān)上濾器閥門，取下濾器，用無菌鑷子夾取濾膜邊緣部分，移放在品紅亞硫酸鈉培養(yǎng)基上，濾膜截留細(xì)菌面向上與培養(yǎng)基完全緊貼，兩者間不得留有間隙或氣泡。若有氣泡需用鑷子輕輕壓實(shí)，倒放在37℃培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)1618h。 (3)結(jié)果判定： 1)挑選符合下列特征的菌落進(jìn)行革蘭氏染色，鏡檢。 ①紫紅色，具有金屬光澤的菌落。②深紅色，不帶或略帶金屬光澤的菌落。 ③淡紅色，中心顏色較深的菌落。 2)凡是革蘭氏陰性無芽胞桿菌，需再接種于乳糖蛋白胨半固體培養(yǎng)基，37℃培養(yǎng)68h，產(chǎn)氣者，則判定為大腸菌群陽性。 3)1L水樣中大腸菌群數(shù)等于濾膜法生長的大腸菌群菌落數(shù)乘以3。食品中細(xì)菌總數(shù)的測定錄入時間:2010925 11:26:31 來源：生物信息網(wǎng)一、目的與要求：1學(xué)習(xí)并掌握細(xì)菌的分離和活菌計(jì)數(shù)的基本方法和原理2了解菌落總數(shù)測定在對被樣品進(jìn)行衛(wèi)生學(xué)評價(jià)中的意義二、原理：菌落總數(shù)是指食品經(jīng)過處理，在一定條件下培養(yǎng)后，所得1g或1ml檢樣中所含細(xì)菌菌落總數(shù)。菌落總數(shù)主要作為判別食品被污染程度的標(biāo)志，也可以應(yīng)用這一方法觀察細(xì)菌在食品中繁殖的動態(tài)，以便對被檢樣品進(jìn)行衛(wèi)生學(xué)評價(jià)時提供依據(jù)。菌落總數(shù)并不表示樣品中實(shí)際存在的所有細(xì)菌總數(shù)，菌落總數(shù)并不能區(qū)分其中細(xì)菌的種類，所以有時被稱為雜菌數(shù)，需氧菌數(shù)等。三、材料 1食品檢樣
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