【文章內容簡介】 ，還有很多種，如三氯甲烷（氯仿），香柏油，苯酚，松節(jié)油等。： 透明時間不夠，石蠟不能完全進入組織，影響到包埋切片 ；但是如果透明過度，組織發(fā)硬發(fā)脆影響切片質， .： 第一次組織脫水后透明； 第二次切片染色透明。（四）浸蠟，在熔化的石蠟內浸漬的過程，稱浸蠟。2. 組織經過透明后要浸入石蠟內,目的是去除組織中的透明劑(二甲苯)而代之以石蠟,并滲入組織內部,把軟組織變?yōu)橛羞m當?shù)挠捕鹊南瀴K以便切片. ,石蠟的溶點為5460度左右,浸蠟作用可起到填充、支撐的作用。 組織經酒精、二甲苯的作用后，其中有許多物質被溶解去，如脂肪及脂類物質、糖原等。因而遺留下許多腔隙，妨礙了切片。在切片時由于誘導劑的作用下石蠟可以浸入到物質的各個角落，當石蠟冷卻時，浸入到各處的石蠟就填充在各處的空隙，包括血管和器官等。使組織保持原有的形狀，也使包埋后蠟塊保持平整，便于切片。使切片能完整的切除并保持切片的美觀浸蠟的方法①傳統(tǒng)浸蠟法 將透明好的組織放入熔化的石蠟中浸漬一定的時間。②真空負壓浸蠟法 將透明好的組織放入浸蠟缸中，然后移入真空負壓箱內，或者脫水機自身配有的真空負壓裝置進行浸蠟。 浸蠟時間，真空負壓數(shù)見表。注意 ? 為了盡可能排除透明劑，浸蠟可以分兩級或三級進行。以熔點較低（54度以下）的軟石蠟作為第一步，然后再換為熔點較高（6062度）的石蠟作為第二步，第三步。浸蠟時間1－4小時，或更長，并使之過夜則較易切割 。但過長會使組織脆硬，切片時易破碎，過短，浸蠟不夠，難以制成高質量切片。（五） 包埋? 包埋，就是將已經經過固定，脫水，透明，浸蠟的組織塊從最后的蠟浴取出置入充滿熔融石蠟的包埋框內，包埋成塊，使組織和包埋劑相熔一體并迅速冷卻，這個程序稱為包埋。? 包埋劑凝固后，進一步加強了組織的硬度和韌度而便于進行切片。包埋時的注意事項：所使用的鑷子，包埋框，最好放于37的恒溫箱內，以免這些物質過冷（在冬天時）而過早冷卻包埋的石蠟，影響包埋的質量，這種現(xiàn)象在沒有石蠟包埋機的單位較為明顯。打開脫水盒，取出組織塊，將一平整的大的一面朝下，并用鑷子壓平，使其保持在一水平面上。 每包埋完一塊，應附上標簽，以免出差錯或張冠李戴。如為塑料包埋盒，則可少去這一步，極為方便。對于管腔的組織如血管、腸、氣管等應豎起來包埋對于皮膚及胃、腸、等組織應辯認好方向。仔細包埋。細小多塊的組織，可包埋在一個蠟塊，但應保持在同一平面上，以免影響切片。包埋完后，蠟面凝固，便可放入水中加速硬化，如帶有冷凍設備的包埋機，則可少去這一步。包埋時組織塊不能使其冷卻凝固，應保持組織塊上的蠟處于熔化狀態(tài)，這樣包埋時才能和包埋蠟溶為一體。如果組織塊自身的蠟先凝固，包埋后的蠟塊切片時組織與邊蠟分離切不成佳片嚴重的會崩掉，影響切片。修切蠟塊 應用包埋框包埋的組織塊，切片前一定要將其切好，才有利于切片。有利于切片，使切片能連續(xù)切出。減少損傷刀口延長刀口的壽命，以利多切蠟塊。有利于切片的裱貼。例如一張載片要裱兩塊組織時，修切好的蠟塊，就能使它們擺得整齊。? 1.組織取材2毫米厚度，固定于福爾馬林數(shù)小時 后再換以新鮮福爾馬林固定數(shù)小時。2.組織流水沖洗6－12小時。3.70％酒精2－4小時。4.85％酒精2－4小時。5.95％酒精（Ⅰ）2－4小時。6.95％酒精（Ⅱ）2－4小時。7.100％酒精（Ⅰ）2－4小時。8.100％酒精（Ⅱ）2小時。9.二甲苯（Ⅰ）－1小時。10.二甲苯（Ⅱ）。11.浸蠟（Ⅰ）2小時。12.浸蠟（Ⅱ）2小時。13.組織包埋。? 快速切片診斷是在數(shù)十分中或半小時左右制成切片并作出診斷的一種手段，主要用于手術中決定手術的切除范圍和手術方式?？焖偾衅姆椒òū鶅銮衅涂焖偈炃衅?。? 制作快速石蠟切片時，切取組織應該薄小，從固定、脫水到浸蠟的全過程都要加溫，一般是先將各種試劑在超聲波快速石蠟脫水儀中預熱，恒溫下操作，整個過程大約在10－15分鐘即可完成? 快速石蠟包埋法操作過程（1）先取病變組織于AAF中固定3－5分鐘。（2）95％酒精1分鐘。（3）無水酒精1分鐘（4）正丁醇1/3丙酮2/3混合液1分鐘（5）二甲苯1分鐘（6）浸蠟1－2分鐘（7）包埋 （六） 組織切片切片機類型： 旋轉式切片機 滑動式切片機（六） 組織切片? 石蠟切片的步驟：，將修好蠟塊置冰箱冷凍后放在切片機上，調整到稍離開切片能夠切到的位置上，注意蠟塊組織切面與切片刀口成510度夾角。，旋緊刀架，固定好機頭。，一般35181。m為宜。切片的步驟：搖動切片機手輪先進行修整切片，直到切出完整的最大組織切面后，再進行切制。實踐中可用右手轉動切片機手輪，左手用毛筆托起蠟片，協(xié)調地進行切片操作。切下的切片帶，一端用鑷子輕輕拉起，應盡可能將切片帶拉直展開，用毛筆將切片帶從刀口向上挑起，拉下切片帶，然后輕拖鋪于水箱內展平，水溫4555℃為宜。石蠟切片的步驟：? 切片附貼前，可先涂蛋白甘油，防止切片在染色時脫片；附貼后放溫箱內（65℃左右）烘烤1030min，也可置于微波爐內溫火一分鐘后切片上石蠟完全融化，然后染色。冰凍切片法：? 常用低溫冷凍切片機? 快速將新鮮組織固定在冷凍切片機中，冷凍數(shù)分鐘即可切片，數(shù)分鐘即可完成，稍后進行快速染色。? 常用于手術中快速診斷或組織化學染色和保存脂肪做特殊染色 組織切片注意事項: 持蠟器一定要將蠟塊挾緊挾牢，以免使其跳動而影響切片。刀一定要保持無口、鋒利，一次性刀片做到這一點較容易，大刀片要做到上述要求就比較困難。因此就要認真地磨好刀才能保證切片的質量。裱片的水溫不能過高或偏低，高者可溶化所切出的切片，低者則展不開切片，使切片留有皺紋，最適的水溫應是比石蠟的溶點低25℃，如石蠟的溶點為6062℃，裱片的水溫則可達5557℃，余者類推。對于細小的組織，應特別小心修切，防止一刀切下，全部皆休的情況。對于多塊細小的組織，原則上是每一細小的組織都應有一個切面。修切的時候更應特別小心。每切完一塊，裱于載片后應隨時刻上編號，以防止差錯或混亂的現(xiàn)象發(fā)生，減少差錯的苗頭。挑切片的毛筆，應選用細小柔軟的毛筆為佳，用時向上挑，決不能往下，以免刀口傷及毛筆。石蠟切片常可出現(xiàn)的問題石蠟切片不能形成帶狀的原因是室溫低，蠟塊周邊不整齊。石蠟切片，切片卷起的原因是刀的傾斜角度過大或刀不快。石蠟切片出現(xiàn)的皺折的原因是石蠟溶點低，純度不足。石蠟切片出現(xiàn)厚薄不均勻的主要原因是組織塊挾不牢固或組織堅硬如肌瘤等。石蠟切片出現(xiàn)波浪狀的原因是組織塊太硬或骨組織末完全脫鈣。石蠟切片，當切片放入水中裱片時，切片周圍的蠟迅即向四邊散開，其主要原因是組織脫水不徹底，浸蠟浸不進去。包埋蠟中含有二甲苯。石蠟切片，當切片切出后蠟塊向上時，把已切出的切片帶走并損壞的原因是切片刀背面留有殘余石蠟。組織切片常見的人為性色素沉著物是福爾馬林色素，常見的器官是肝、脾。組織切片常見的外源性色素是碳末，常見的器官是肺。石蠟切片時切片刀的最宜角度是 5℃30℃1一般所稱呼的標準室溫是20℃1組織浸蠟的溫度最好為1石蠟溶點的最高度高23℃即65℃。冰凍切片一、種類：低溫恒冷箱切片法二氧化碳冰凍切片法甲醇循環(huán)制冷冰凍切片法半導體冰凍切片法氯乙烷冰凍切片法二、冰凍切片的目的在手術進行中。突然發(fā)現(xiàn)病人的病變與原診斷不相符合或者懷疑時需要病理給予確定。了解淋巴結內是否有轉移的腫瘤細胞或者轉移的程度，以利于確定以后的治療措施。對于已確定惡性腫瘤的病人則需要了解其手術范圍是否足夠，上下切緣是否有殘存的腫瘤細胞。在剖腹探查所發(fā)現(xiàn)的腫塊。顯示組織中的脂肪類物質。某些酶的顯示如ATP酶琥珀酸脫氫酶等。神經病理學中的某些染色法。對某些物質所進行的免疫熒光的研究。三、冰凍切片的操作（1）本室現(xiàn)有ShandonAS620E型冷凍切片機的主要性能。左邊的切片臺可達到60左右，冷凍箱內在0～30間可任意調節(jié)，箱面上有電子控制板，裝有急速冷凍，即放上標本啟動該鍵機器馬上進行冷凍工作并持續(xù)10分鐘；有冷凍臺溫度顯示冷凍箱內溫度顯示；有即時除霜內溫度顯示；有即時除霜鍵，啟動該鍵機器可持續(xù)工作15分鐘，將工作間頂部后面的制冷柵上的霜除掉；有照明鍵，啟動該鍵可照明工作間；有消毒鍵當進行一星期的工作后，啟動該鍵可對工作間進行消毒；有工作間面的密鎖鍵啟動鍵可將工作間鎖住，除此之外該機的左邊有四個按鍵兩個為快速自動進退、兩個為微小進退、另有一個手動旋鈕，調節(jié)修塊時的進退。（2）切片取末經固定的組織不能太大太厚，厚者冰凍費時，大者難以切完整。最好2424 4mm。（3）取出組織支承器，放平擺好組織周邊滴上包埋劑，速放入冷凍臺上冰凍，小組織應先取一組織支承器滴上包埋劑讓其凍成一個小臺再放上細小組織，滴上包埋劑。（4）將冷凍好的組織塊夾緊于切片機上修平切面。（5）調好厚度，根椐不同的組織而定，一般在510um.（6）調好防卷板，制作冰凍切片的調節(jié)，關建在于防卷板的調節(jié)，這就要求要細心，準確，將其調校，調校至適當?shù)奈恢?，此時切片。冰凍切片在第一時間順利地在刀與防卷板之間通過，平整地躺在持刀器的鐵板上。這時便可掀起防卷板，取一載片，將其附貼上即可。（7）用于附貼切片的載片，不能存放入冷凍的地方，于室溫存放即可。因為當附貼切片時，從室溫中取出的溫差，當溫度較高的載片附貼上溫度低的切片時，由于兩種物質溫度的差別，當它們碰撞在一起時，分子間的彼此轉移而產生了一種吸附力。使切片與載片牢固地附貼在一起。如果用冷藏的載片附貼切片，就沒有這種現(xiàn)象發(fā)生。