小鼠腎臟細(xì)胞系的建立doc(編輯修改稿)
2025-08-14 02:32 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 乙醇擦拭無菌操作臺(tái)臺(tái)面及四周，并開始實(shí)驗(yàn)。3） 無菌操作室的滅菌，一般用甲醛和高錳酸鉀熏蒸法定期熏蒸消毒，在實(shí)驗(yàn)室用甲醛和高錳酸鉀封閉消毒期間，不宜進(jìn)入消毒空間。消毒后通風(fēng)換氣，等氣味散盡后再出入。使用前用20%新潔爾滅對(duì)接種室內(nèi)墻壁、地板及設(shè)備擦拭，用70%乙醇噴霧，用紫外線滅菌20分鐘。照射期間關(guān)閉接種室的門窗。（2）、玻璃器皿的洗消： 1）自來水刷洗，除去灰塵。 2）烘干、泡鹽酸：烤箱中烘干，然后再浸入5％稀鹽酸中12小時(shí)以除去臟物、鉛、砷等物。3）刷洗、烘干：12小時(shí)后立即用自來水沖洗，再用洗滌劑刷洗，自來水沖干凈后用烤箱烘干。4）泡酸、清洗：用清潔液（重鉻酸鉀120g：濃硫酸200ml：蒸餾水1000ml）浸泡12小時(shí)，然后從酸缸內(nèi)撈出器皿用自來水沖洗15次，最后蒸餾水沖洗35次和用雙蒸水過3次。 5）烘干、包裝：洗干凈后先烘干，然后用牛皮紙（油光紙）包裝。6）高壓消毒：包裝好的器皿裝入高壓鍋內(nèi)蓋好蓋子，打開開關(guān)和安全閥，當(dāng)蒸氣成直線上升時(shí)，關(guān)閉安全閥，當(dāng)指針指向15磅時(shí)，維持2030分鐘。 7）高壓消毒后烘干（3）、橡膠和塑料： 橡膠和制品通常處理方法是：先用洗滌劑洗刷干凈，再分別用自來水和蒸餾水沖干凈，再用烤箱烘干，然后根據(jù)不同品質(zhì)進(jìn)行如下的處理程序：1） 針式濾器帽不能泡酸液,用NaOH泡612小時(shí),或者煮沸20分鐘,在包裝之前要裝好濾膜兩張，安裝濾膜時(shí)注意光面朝上(凹向上)，然后將螺旋稍微擰松一些，放入鋁盒中在高壓鍋內(nèi)15磅30分鐘消毒，再烘干備用。注意在超凈臺(tái)內(nèi)取出使用時(shí)應(yīng)該立即將螺旋旋緊。2） 膠塞烘干后用2％氫氧化鈉溶液煮沸30分鐘（用過的膠塞只要用沸水處理30分鐘），自來水洗凈，烘干。然后再泡入鹽酸液30分鐘，再用自來水，蒸餾水，三蒸水洗凈，烘干。最后裝入鋁盒內(nèi)高壓消毒，烘干備用。3） 膠帽，離心管帽烘干后只能在2％氫氧化鈉溶液中浸泡612小時(shí)（切記時(shí)間不能過長），自來水洗凈，烘干。然后再泡入鹽酸液30分鐘，再用自來水，蒸餾水，三蒸水洗凈，烘干。最后裝入鋁盒內(nèi)高壓消毒，烘干備用。4） 膠頭可用75％酒精浸泡5分鐘，然后紫外照射后使用即可。 三．實(shí)驗(yàn)步驟1. 取材1） 將小鼠引頸殺死。2） 將小鼠尾巴提在手上，身體全部浸入酒精30秒到一分鐘，時(shí)間不能過長，以免酒精進(jìn)入小鼠體內(nèi)。3） 用酒精燈火焰消毒后的手術(shù)剪刀在小鼠胸腔部位附近環(huán)行剪開皮膚。4） 將小鼠翻轉(zhuǎn)剝皮。5） 開腹6） 定位腎臟的
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