小白鼠肝細(xì)胞線粒體的超活染色及觀察-實(shí)驗(yàn)報(bào)告doc(編輯修改稿)
2025-08-14 02:24 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 詹納斯綠B 詹納斯綠B是毒性較小的堿性染料，可專一性的對線粒體進(jìn)行超活染色，這是由于線粒體內(nèi)的細(xì)胞色素氧化酶系的作用，使染料始終保持氧化狀態(tài)（即有色狀態(tài)藍(lán)綠色）；而線粒體周圍的細(xì)胞質(zhì)中，這些染料被還原呈無色的色基（即無色狀態(tài)）。 另外，中性紅也屬于堿性染料，對植物液泡系的染色有專一性。 【實(shí)驗(yàn)步驟】 大體流程用詹納斯綠B染色2030min剪下合適大小的肝組織小塊洗凈斷頭法處死小白鼠取肝組織 取著色部分加Ringer溶液制成懸液制片，高倍鏡觀察 具體操作 用斷頭法處死小白鼠，置于解剖盤中，剪開腹腔，取出小白鼠肝組織，放入小燒杯中，用Ringer液沖洗去血污。 在干凈的凹面載玻片的凹穴中，滴加1/5000詹納斯綠B溶液，再將上述洗凈的肝組織移入染液中（注意：不可將組織塊完全浸沒，要是組織塊至少三分之一的部分露在染液外，這樣細(xì)胞內(nèi)的線粒體酶系可充分得到氧化，易被染色）進(jìn)行染色，一般染色20—30min，以組織塊邊緣被染成藍(lán)綠色為準(zhǔn)。 吸去染液，用剪刀將組織塊著色部分剪下重置小燒杯中，用剪刀將組織充分剪碎制成懸液。 取上述細(xì)胞懸液滴片，加上蓋玻片，在高倍鏡下觀察。 【實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析】 理想狀態(tài)下小鼠肝細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)中的線粒體應(yīng)被染成藍(lán)綠色，在高倍鏡（10*4
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