db21t17493-20xx黃瓜綠斑駁花葉病毒檢驗檢測技術規(guī)程doc(編輯修改稿)
2024-08-11 11:29 本頁面
【文章內容簡介】 子內可存活240d～540d，病殘體在土壤內深埋420d，病毒仍有侵染活性。 病毒粒體形態(tài)電鏡觀察病毒粒體為棒狀，長約300nm，寬15nm。 為害癥狀 西瓜染病癥狀幼葉出現(xiàn)淡黃色花葉，其后出現(xiàn)斑駁、花葉、葉脈綠帶狀、濃綠凹凸斑等，隨葉片老化癥狀減輕。有時也呈葉脈綠帶狀。果實表面濃綠圓斑，果蒂處有時壞死，種子周圍的果肉呈赤紫色水漬狀，成熟時變?yōu)榘岛稚霈F(xiàn)空洞，并且呈絲狀纖維化，腐爛變味，不能食用。 甜瓜染病癥狀感病后莖端新葉出現(xiàn)黃斑，但隨新葉老化癥狀減輕。成株側枝葉出現(xiàn)不整形或星狀黃花葉，生育后期頂部葉片有時再現(xiàn)大型黃色輪斑。果實有兩類癥狀，一種在果實表面出現(xiàn)綠色斑。另一種在綠色部的中心出現(xiàn)灰白色部分。 黃瓜染病癥狀感病初期新葉出現(xiàn)黃色小斑點，以后黃色部分擴展成花葉，并發(fā)生濃綠瘤狀突起，出現(xiàn)葉脈綠帶。發(fā)病輕時果實只出現(xiàn)淡黃色圓形小斑點，嚴重時出現(xiàn)濃綠色瘤狀突起變成畸形。 傳播途徑 傳播方法CGMMV有多種傳播方式：；（包括植物間接觸、農事操作、汁液）；（如菟絲子、黃瓜葉甲）；；（嚙齒動物的糞便、栽培營養(yǎng)液、河水、灌溉水、被污染的包裝容器、用作肥料的牛糞）。其中帶毒種子是遠距離傳播主要途徑。接觸性傳染是近距離傳播主要途徑。該病毒在種子、病株殘體、土壤中均可越冬，成為第二年的初侵染來源。帶毒種子是主要初侵染源。在田間， CGMMV 能很容易地通過病株的汁液接觸傳播，人工嫁接和授粉等方式易再傳染。因此，田間農事操作如整枝、上架、摘心、授粉、嫁接、摘果均可導致該病毒的再次傳播。發(fā)病受溫度影響，在16℃時侵染至發(fā)病需2～3周，顯病較輕；在28℃～35℃下接種1周即可發(fā)病，癥狀重。CGMMV適生性和抗逆性極強，所有株系都是極端穩(wěn)定的，其致死溫度 90 ~ 100℃，稀釋限點106 ~ 107，常溫下病毒侵染力可保持數(shù)月，在 0℃可保持數(shù)年，－20℃病毒仍能存活，一旦條件適宜還能繼續(xù)傳播蔓延。田間一旦發(fā)病，如未進行特殊的殺滅處理，病株殘體中的病毒可存活多年，即便將病根埋在土壤內 365d以上，病毒仍保持侵染能力。 鑒別寄主 黃瓜 新葉出現(xiàn)黃色小斑點，后呈花葉并帶有濃綠色突起，葉脈間褪色呈葉脈綠帶狀。 西瓜 莖端幼葉出現(xiàn)淡黃色花葉，其后出現(xiàn)濃綠凸凹斑，隨葉片老化癥狀減輕。果實表面濃綠圓斑，中央有壞死點，種子周圍的果肉呈赤紫色水漬狀，成熟時變?yōu)榘岛稚霈F(xiàn)空洞。 甜瓜 新葉出現(xiàn)黃斑，但隨葉片老化呈葉脈綠帶狀。 瓠瓜 葉片出現(xiàn)花葉，有綠色突起，脈間黃化呈葉脈綠帶狀。幼葉出現(xiàn)淡黃色花葉，其后出現(xiàn)濃綠凹凸斑，隨葉片老化癥狀減輕。 莧色藜 經(jīng)西瓜株系、Yodo株系和印度C株系侵染后出現(xiàn)細小局部壞死斑，而歐洲黃瓜株系不出現(xiàn)這種癥狀；無系統(tǒng)侵染。 蔓陀羅 Yodo株系和日本的黃瓜株系在接種后7d產生能擴散的局部褪綠斑；無系統(tǒng)侵染。附錄C(規(guī)范性附錄)黃瓜綠斑駁花葉病毒雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附測定（Double antibody sandwich ELISA）標準 儀器設備離心機、電子天平（1/10 000g）、酶標儀等。 用具可調移液器（20181。L～200181。L、200181。L～1000181。L）及相關吸頭、研缽、離心管（、10mL）、量筒、燒杯等。 試劑無水碳酸鈉 ，碳酸氫鈉 ，疊氮化鈉 ，蒸餾水定容至1000mL，4℃貯存。 2洗滌緩沖液（PBST）磷酸氫二鈉（無水） （十二水） ，磷酸二氫鉀（無水） ，氯化鈉 ，氯化鉀 ，吐溫20 蒸餾水定容至1000mL，室溫貯存。 提取緩沖液雞蛋清粉 ，PVP （分子量 2440,000），無水亞硫酸鈉 ，疊氮化鈉 ，吐溫20 1X PBST中，4℃貯存。 酶標抗體緩沖液牛血清蛋白 ，PVP（分子量 2440,000） ，疊氮化鈉 ，溶解于1000mL 1X PBST中，4℃貯存。 底物緩沖液二乙醇胺 ，疊氮化鈉 ，蒸餾水定容至800mL，4℃貯存。 取樣方
環(huán)評公示相關推薦
鄂ICP備17016276號-1