常見(jiàn)緩沖溶液配制(編輯修改稿)
2025-07-24 14:39 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 容到100ml。:配制等摩爾的Na2EDTA和NaOH溶液（），混合后形成EDTA的三鈉鹽。2H2O和20g的NaOH，并溶于水中，定容至1L。1mol/L HEPES：，用NaOH調(diào)pH（），然后用水定容至100ml。1mol/L HCl：。25mg/ml IPGT：溶解250mg的IPGT（異丙基硫代βD半乳糖苷）于10ml水中，分成小份貯存于20℃。1mol/LMgCl2: MgCl26H2O于足量的水中，定容到100ml。100mmol/L PMSF：溶解174mg的PMSF（苯甲基磺酰氟）于足量的異丙醇中，定容到10ml。分成小份并用鋁箔將裝液管包裹 或貯存于20℃。20mg/ml蛋白酶K（proteinase K）：，輕輕搖動(dòng)，直至蛋白酶K完全溶解。不要渦旋混合。加水定容到10ml，然后分裝成小份貯存于20℃。10mg/mlRnase（無(wú)DNase）（DNase－free RNase）：溶解10mg的胰蛋白R(shí)NA酶于1ml的10mmol/L的乙酸鈉水溶液中（pH ）。溶解后于水浴中煮沸15min，使DNA酶失活。用1mol/L的Tris－，于20℃貯存。（配制過(guò)程中要戴手套）5mol/L氯化鈉（NaCl）：，定容至100ml。10N氫氧化鈉（NaOH）：（磁力攪拌器攪拌），氫氧化鈉完全溶解后用水定容至1L。10％SDS（十二烷基硫酸鈉）：，用磁力攪拌器攪拌直至完全溶解。用水定容至1L。2mol/L山梨（糖）醇（Sorbitol）：（糖）醇于足量水中使終體積為100ml。100％三氯乙酸（TCA）:在裝有500gTCA的試劑瓶中加入100ml水，用磁力攪拌器攪拌直至完全溶解。（稀釋液應(yīng)在臨用前配制）％ X－gal（5溴4氯3吲哚－β半乳糖苷）：溶解25mg的X－gal于1ml的二甲基甲酰胺（DMF）,用鋁箔包裹裝液管，貯存于20℃。100Denhardt試劑（Denhardt39。s regent）成分及終濃度 配制100ml溶液各成分的用量 2％聚蔗糖（Ficoll，400型） 2％聚乙烯吡咯烷酮（PVP40） 2％BSA（組分V） 水 2g 2g 2g 加水至總體積為100ml 依照上表稱(chēng)取各組分，溶于水中定容。過(guò)濾除菌及雜質(zhì)，分裝成小份于20℃貯存。10標(biāo)準(zhǔn)DNA連接酶緩沖液（standard DNA ligase buffer）（粘端、平端連接）成分及終濃度 配制10ml溶液各成分的用量 100mmol/L MgCl2100mmol/L DTT2mmol/L ATP5mmol/L 鹽酸亞精胺（可選） （組分V）（可選） 水 5ml 1mol/L 貯液 1ml 1mol/L 貯液 1ml 1mol/L 貯液 200ul 100 mmol/L 貯液 50ul 1 mmol/L 貯液 10 mg/mL 貯液 將配制好的緩沖液分裝成小份，貯存于20℃ 。100 mmol/L dNTP 溶液（dNTP solutions） 可以購(gòu)買(mǎi)到100mmol/L純dNTPs貯液，80℃可貯存至少6個(gè)月。10mmol/L dNTP混合液成分及終濃度 配制20ul溶液各成分的用量 10mmol/L dATP10mmol/L dCTP 10mmol/L dGTP10mmol/L dTTP水 2ul 100 mmol/L dATP 貯液 2ul 100 mmol/L dCTP 貯液 2ul 100 mmol/L dGTP 貯液 2ul 100 mmol/L dTTP 貯液 12ul 20％PEG 8000/ NaCl成分及終濃度 配制10ml溶液各成分的用量 質(zhì)量濃度為20％聚乙二醇 水 20g 50ml 5 mol/L 氯化鈉 或 固體氯化鈉 補(bǔ)足100ml 加聚乙二醇于含有氯化鈉的燒杯中，加水至終體積100ml，用磁力攪拌器攪拌溶解。20SSC成分及終濃度 配制1L溶液各成分的用量 300mmol/L 檸檬酸三鈉（二水） 3mol/L 氯化鈉 水 補(bǔ)足1L 溶解檸檬酸三鈉（二水），加幾滴10N ，用水補(bǔ)足體積至1L。DEP
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