【文章內容簡介】 中 SUVs。 （殘存的乙醇用透析法除去） 優(yōu)點：簡單快速 ,脂質濃度受限。缺點 : 水相包封率極低，乙醇難除。 乙醚注入法 脂質乙醚液 細孔針頭 慢慢 注入 55～ 60℃ 的緩沖液中 乙醚蒸發(fā) 單層脂質體 (直徑 50～ 200nm)。 優(yōu)點：脂質濃度不受限，水相包封率高； 缺點：制備時間長。 脂質體的制備方法 四、 冷凍干燥法 磷脂 高度分散在緩沖鹽溶液中 超聲波處理 冷凍干燥（干燥物） 分散到含藥物的水性介質中 脂質體 冷凍溫度、速度及時間等因素影響脂質體的包封率和穩(wěn)定性。 加入凍結保護劑，能降低凍融過程對脂質體的損害。 甘露醇 、 D葡萄糖 此外還有： pH梯度法 和 前體脂質體法 等。 脂質體的制備方法 一、脂質體的粒徑和分布 ? 脂質體的粒徑大小和分布均勻程度，直接影響脂質體在機體組織的行為和處置。 ? 粒徑 ﹤ 100nm，在血液循環(huán)時間長； ? 粒徑 ﹥ 200nm，在血液循環(huán)時間短（易被巨嗜細胞作為外來異物吞噬）。 第四節(jié) 脂質體的質量研究 檢測方法 光學顯微鏡法 電子顯微鏡法 激光散射法（ 塵粒計數(shù)法 ） 電感應法 （庫爾特計數(shù)器） 光感應法 （如粒度測定儀） 負染法 冰凍蝕刻法 光學顯微鏡法 將脂質體混懸液稀釋（約 5倍），取 1滴放入載玻片上或滴入細胞計數(shù)板內，放上蓋玻片，觀察脂質體粒徑大小和數(shù)目，然后按其大小分檔計數(shù)，以視野見到的粒子總數(shù)，求出各檔次百分數(shù)。 僅適用于大的脂質體。 電子顯微鏡法 用負染法和冰凍蝕刻法， 用于分析小脂質體 。 負染法： 用溶液懸浮脂質體 ， 樣品滴在有支持膜的銅網上，濾紙吸去 多余的液體，再滴 重金屬染料， 濾紙吸去多余液體，自然干燥 30min， 用電鏡觀察脂質體的結構和粒徑分布。 脂質體的質量研究 （ 粒徑和分布） 激光散射法 （塵粒計數(shù)法） 將脂質體混懸液稀釋后霧化，定量噴到計數(shù)儀散射腔， 自動計數(shù)儀記錄各檔次粒子的粒徑、數(shù)目，計算分布概率或 繪制粒徑分布圖。 此外，還有 電感應法 （庫爾特計數(shù)器）、 光感應法 （粒 度測定儀）等 脂質體的質量研究 （ 粒徑和分布） 二、脂質體的包封率 （ 重量包封率 ） 包封率： 是指包入脂質體內的藥物量與投料量的重量百分比。 方法：測定脂質體中的藥量，經色譜柱或離心分離測定介質中未包入的藥量，計算。 脂質體的質量研究 （ 包封率） 包封率 脂質體中包封的藥量 脂質體中包封與未包封的總藥量 = 100% 影響脂質體包封率的因素 ⑴ 脂質體的結構類型 脂質體的結構類型不同，其包封率也不同。 順序： LUVs(大單） ﹥MLV （多層） ﹥SUVs （小單） ⑵ 脂質體制備方法 處方擬訂后，制備方法就可決定結構類型。故制備方法也與包封率有關，順序為： 乙醚注入法 ﹥ 逆相蒸發(fā)法 ﹥ 干膜法 ﹥ 乙醇注入法 ﹥ 超聲法 冷凍干燥法的冷凍過程使包封率下降。 脂質體的質量研究 （ 包封率） ⑶ 類脂膜的組成與電性 ①膜的組成 與脂質體的結構密切相關，因此，對包封率有影響。 如 PC中加入 Ch可提高包封率； ②脂質材料與脂質體表面的電性對離子型藥物的包封率影響很大 如：如水相離子型藥物的電性與脂質體表面的電性相反時， 可能由于靜電結合的原因，包封率高。 脂質體的質量研究 （影響 包封率的因素） ⑷ 藥物的性質和濃度 膜材固定、制備方法固定的脂質體，其包封率則由 被包封的藥物的性質決定。 ①溶解性：脂溶性的藥物包封率高； ②電性：藥物的電性與脂質體膜的電性相反時，藥物包封率高； ③分子量：分子量大的比分子量小的藥物包封率高； ④一般情況下，藥物濃度增加，包封率下降。 脂質體的質量研究 （影響 包封率的因素） 三、脂質體的包封容積 包封容積為每摩爾脂質形成脂質體后所包裹溶液的體積。 測定方法：用脂質體包封水溶性的熒光標記物，直接測定水 相的體積。 四、脂質體的藥脂包封比率 指一定重量的脂質所包封藥物重量百分比。 脂質體的質量研究 藥脂包封比率 = 100% 脂質體中包封的藥量 處方中類脂的總量 五、脂質體的滲漏率 滲漏率表示脂質體在貯存期間包封率的變化情況，是 脂質體不穩(wěn)定性的重要指標。 （在膜材中加入一定量的膽固醇，能夠加固脂質雙層膜， 減少膜的流動性，可降低滲漏率。） 脂質體的質量研究 滲漏率 = 貯存后滲漏到介質中的藥量 貯存前包封的藥量 100% 六、磷脂的氧化程度 采用氧化指數(shù)為指標。 氧化指數(shù) =A233nm /A215nm 氧化指數(shù)＜ 避免脂質氧化的措施： ① 用純化的脂質和新鮮蒸餾的有機溶劑。 ②制備過程中避免高溫。③在無氧條件下制備。 ④用氮氣使水溶液脫氧。⑤脂質體在惰性氣體中保存。 ⑥加入抗氧化劑，減少膜氧化脂質水平。 ⑦盡量使用飽和脂質。 ⑧去除殘余有機溶劑。 脂質體的質量研究 β 欖香烯脂質體的質量研究 β 欖香烯脂質體透射電鏡照片 β 欖香烯脂質體 粒度分布圖 β 欖香烯脂質體ξ 電位 (177。 )% 三批樣品平均包封率 (177。 ) nm （ 177。 ） mV 形態(tài) 粒徑 表面電位 包封率 室溫（ 25℃ ） 4周后滲漏 100% 穩(wěn)定性 考察 冰箱（ 4℃ ） 4周后滲漏約 5% 第五節(jié) 特殊性能脂質體 熱敏感性脂質體（溫度敏感脂質體） pH敏感脂質體（酸敏感脂質體） 多糖被復的脂質體（糖基脂質體） 免疫脂質體 長循環(huán)脂質體（長效脂質） 光敏脂質體 磁性脂質體 特殊性能脂質體 一、熱敏感性脂質體 （溫度敏感脂質體）。 設計