艾滋病檢測原理和技術(shù)規(guī)范廖華樂(編輯修改稿)
2025-06-22 18:19 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 試驗 （ Particle agglutination test， PA） 艾滋病檢測原理和技術(shù)規(guī)范 2022/6/23 20 PA的操作和結(jié)果判斷 艾滋病檢測原理和技術(shù)規(guī)范 2022/6/23 21 5 450/630nm下測定 OD值 混勻 ， 加蓋 ， 37℃ 溫育 洗板 3 加入底物 第二次特異性結(jié)合 4 加入終止液 1 加入樣品 洗板 2 加入酶標記物 加蓋 ， 37℃ 溫育 加蓋 ， 37℃ 溫育 第一次特異性結(jié)合 酶聯(lián)免疫分析 ELISA （雙抗原夾心、兩步法） 艾滋病檢測原理和技術(shù)規(guī)范 2022/6/23 22 快速法可否單獨使用？ ? 《 全國艾滋病檢測技術(shù)規(guī)范 》 （ 2022版）：將 PA、 dotEIA、膠體硒法納入快速檢測規(guī)范方法，因此可以使用。 ? 有研究指出： ? 任何一種快速試劑可以篩查出 99%以上的陰性樣本； ? 兩種快速試劑均為陽性時，可以篩查出 98%以上的陽性樣本； ? 兩種快速試劑結(jié)果不一致時，可用 ELISA復檢； ? 單獨使用或兩種同時使用時，特異性差別無顯著意義。 艾滋病檢測原理和技術(shù)規(guī)范 2022/6/23 23 ■ 針對各種病毒蛋白的特異抗體 ■ 區(qū)分 ELISA真陽性與假陽性 ■ 檢測 HIV1和 HIV2 HIV抗體確證試驗 Western Blot 免疫印跡法 艾滋病檢測原理和技術(shù)規(guī)范 2022/6/23 24 基因名稱 代號 功 能 基因產(chǎn)物片段 HIV1 HIV2 結(jié)構(gòu)基因 外膜蛋白基因 env 合成外膜蛋白 gp160 gp120 gp41 gp140 gp105 gp36 核蛋白基因 gag 合成核蛋白 p55 p24 p18 p56 p26 p16 逆轉(zhuǎn)錄酶基因 pol 合成逆轉(zhuǎn)錄酶 p65 p51 p31 p68 p53 p34 調(diào)節(jié)基因 反式激活因子 tat 加速病毒蛋白合成 毒力蛋白 表達調(diào)節(jié)基因 rev 促進整合的病毒選擇性地產(chǎn)生調(diào)節(jié)蛋白或毒粒成份 負調(diào)節(jié)因子 nef 減緩基因轉(zhuǎn)錄，使停止繁殖而處于潛伏狀態(tài) 毒粒感染性因子 vif 促進病毒感染另一個細胞 HIV的主要基因及其產(chǎn)物 （ HIV標志物） 艾滋病檢測原理和技術(shù)規(guī)范 2022/6/23 25 ssRNA 艾滋病檢測原理和技術(shù)規(guī)范 2022/6/23 26 全自動免疫印跡儀 艾滋病檢測原理和技術(shù)規(guī)范 2022/6/23 27 HIV抗體陽性診斷標準： ■ 2條 env （ gp160/gp120 + gp41） ■ 1條 env + p24 p55 p66 p31 p51 gp120 gp160 gp41 p17 p24 膜蛋白 （ env） 核蛋白 （ gag） 逆轉(zhuǎn)錄酶 （ pol） 艾滋病檢測原理和技術(shù)規(guī)范 2022/6/23 28 艾滋病檢測原理和技術(shù)規(guī)范 2022/6/23 29 篩查試驗： 診斷出陰性樣本， 并為陽性 /可疑樣本排除非特異條帶。 復檢 1（試劑 A）： 對陽性 /可疑樣本排除操作誤差。 復檢 2（試劑 B）： 對陽性 /可疑樣本排除試劑誤差。 確證試驗： 診斷出陽性樣本。 篩查試驗和確證試驗的作用 艾滋病檢測原理和技術(shù)規(guī)范 2022/6/23 30 臨床分期 流行病學 臨床表現(xiàn) 實驗室診斷 潛伏期 有明確感染史 HIV進入血液 未能檢出任何標記物 急性 HIV感染 有明確 感染史 上呼吸道感染癥狀 頸、腋等淋巴結(jié)腫大 頭疼、皮疹、肝脾腫大 后期抗 HIV陽轉(zhuǎn) 少數(shù)病例 P24陽性 CD4/CD81 外周血 WBC及淋巴細胞總數(shù)先降后回 無癥狀 HIV感染 有明確 感染史 呈潛伏感染狀態(tài) 無任何癥狀及體征 但免疫系統(tǒng)逐漸被破壞 抗 HIV陽性 ， P24陰性 CD4/CD81， CD4總數(shù)正常 艾滋病 有明確 感染史 全身淋巴結(jié)腫大 持續(xù)低熱 1個月 慢性腹瀉 45次 /日 3個月內(nèi)體重下降
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