病毒感染對(duì)免疫系統(tǒng)的影響(編輯修改稿)
2025-06-22 13:47 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 身免疫性疾病 例如 ， 慢性肝炎患者中有部分患者存在對(duì)肝細(xì)胞蛋白的自身抗原或細(xì)胞免疫 。 腮腺炎病毒感染后期可發(fā)生腦炎 ，都屬于免疫病理?yè)p傷 第 25章病毒感染的檢查方法與防治原則 第一節(jié) 病毒的診斷 病毒性感染的診斷有助于指導(dǎo)臨床確診 、合理治療以及為控制病毒性疾病的流行制定有效的措施 。 經(jīng)典的病毒學(xué)診斷方法包括病毒的分離鑒定及血清學(xué)診斷 。 目前較常用的血清抗體 IgM診斷雖具有快速 、 簡(jiǎn)便等優(yōu)點(diǎn) ， 但診斷方法繁瑣 、 費(fèi)時(shí) 。 隨著分子病毒學(xué)的發(fā)展而建立的一些快速診斷方法 ， 極大的推動(dòng)了病毒感染的診斷 采取標(biāo)本時(shí) ， 應(yīng)注意無(wú)菌操作 ， 但對(duì)本身帶有雜菌 (如咽拭子 、 糞便 ) 或易受污染的標(biāo)本 ， 應(yīng)使用抗生素 。 一般加青霉素 、 鏈霉素霉素 (100μg/ml) ， 或根據(jù)需要加慶大霉素 、 二性霉素 、 制霉菌素等 病毒在室溫中易失去活性 ， 故采取標(biāo)本后應(yīng)立即送實(shí)驗(yàn)室 ， 如標(biāo)本需較長(zhǎng)時(shí)間運(yùn)送 ， 可用保溫瓶 (內(nèi)放冰塊和食鹽 ， 或固態(tài)二氧化碳和酒精 ) 存放 。病變組織可放 50%中性甘油中保存 。 若標(biāo)本不能立即送檢和作分離培養(yǎng) ， 應(yīng)存放在－ 70℃ 冰箱或液氮罐內(nèi) 應(yīng)在發(fā)病初期和病后 23w內(nèi)各取 1份血清 ， 以便對(duì)比雙份血清抗體效價(jià)的動(dòng)態(tài)變化 。 血清抗體標(biāo)本應(yīng)保存在 20℃ 二 、 病毒的分離與鑒定 由于病毒具有嚴(yán)格的細(xì)胞內(nèi)寄生性 ，故應(yīng)根據(jù)不同的病毒選用敏感動(dòng)物 、 雞胚或組織細(xì)胞培養(yǎng)等進(jìn)行病毒的分離與鑒定 。 但因這些方法復(fù)雜 、 要求嚴(yán)格及需時(shí)較長(zhǎng) ， 故不能廣泛應(yīng)用于臨床診斷 ，只用于實(shí)驗(yàn)室研究或流行病學(xué)調(diào)查 。 當(dāng)有下述情況時(shí)需進(jìn)行病毒的分離與鑒定： ① 分離病毒對(duì)診治病人有 指導(dǎo)性意義 ， 尤其病程較長(zhǎng)者； ② 發(fā)現(xiàn)第 1例新的病毒 或?qū)σ驯幌麥绲牟《拘约膊? (如天花 )懷疑 “ 死灰復(fù)燃 ” 時(shí)； ③ 為鑒別 臨床上具有相同癥狀的疾病 ， 以明確何種病毒感染； ④ 監(jiān)測(cè) 所用的病毒活疫苗 ， 及時(shí)發(fā)現(xiàn)回復(fù)毒力的變異株等 在 流感病毒的分離培養(yǎng) 中最，敏感的而而特異的是雞胚接種，并用血凝和血凝抑制試驗(yàn)以 確定病毒。此外，細(xì)胞培養(yǎng)也可應(yīng)用， 接種動(dòng)物分離培養(yǎng)的方法目前很少應(yīng)用，但狂犬病毒及乙型腦炎病毒的分離與鑒定中還需應(yīng)用動(dòng)物接種，并結(jié)合用特異抗體作中和試驗(yàn)或作免疫熒光染色以鑒定病毒種類(lèi) (三 ) 檢查病毒性抗原及抗體的方法 1 檢測(cè)抗原 ：近年來(lái) ， 采用標(biāo)記技術(shù) ， 即用熒光素 、 放射性同位素 、 過(guò)氧化物酶特異標(biāo)記的抗體 ， 檢測(cè)標(biāo)本中相應(yīng)的抗原 ， 如檢測(cè)病毒感染局部脫落細(xì)胞或分泌物細(xì)胞中的抗原 ， 也可用酶聯(lián)免疫測(cè)定法或免疫測(cè)定 ELISA或乳膠凝集法檢測(cè)抗原 。 此方法具有敏感 、 特異 、 快速等優(yōu)點(diǎn) 。 2 檢測(cè)抗體 ：用病毒特異性抗原可以檢測(cè)感染者血清中的 IgM， 檢測(cè)病毒特異性 IgM抗體可診斷急性感染 ， 特別是 IgM抗體的存在對(duì)證實(shí)孕婦感染風(fēng)疹病毒尤為重 。 另外 ， 檢測(cè)早期抗體可以快速診斷病原體 利用特異抗原檢測(cè) IgG類(lèi)抗體 ， 則需早期和恢復(fù)期雙份血清 ， 且抗體效價(jià) 4倍以上增高方有診斷意義 。 此外 ， 分子生物學(xué)檢測(cè)技術(shù) 、 氣相色譜技術(shù)等， 均可用來(lái)分析和鑒定病毒感染 四 檢測(cè)病毒的核酸的方法 利用病毒基因作為探針用核酸雜交的方法檢測(cè)標(biāo)本中有無(wú)相應(yīng)的病毒核酸 ，進(jìn)行疾病的診斷 1 核酸雜交技術(shù) 雙鏈 DNA在高溫及堿性溶液中，堿基對(duì)間的氫鍵被破壞，兩鏈分開(kāi)變成單鏈的過(guò)程叫變性；在中性鹽溶液中，當(dāng)溫度慢慢冷卻至室溫時(shí)單鏈 DNA又重新組合成雙鏈的過(guò)程叫復(fù)性。核酸分子雜交技術(shù)的原理就是利用 DNA可以變性、復(fù)性的特性，制成用同位素或非同位素標(biāo)記的單鏈 DNA片段基因探針 與固定在硝酸纖維素膜上待測(cè)的變性 DNA雜交，再用放射自顯影技術(shù)或其他顯色法來(lái)確定與探針 DNA同源的 DNA 核酸雜交技術(shù)不僅具有特異、敏感和快速等優(yōu)點(diǎn)，而且能定量與分型。如 斑點(diǎn)核酸雜交細(xì)胞內(nèi)原位雜交 、 DNA印跡雜、 RNA印跡雜交等 2 核酸擴(kuò)增法 80年代中期 ， 美國(guó)Cetus公司首創(chuàng)一種 DNA擴(kuò)增技術(shù) － PCR，這一技術(shù)能使 pg水平的核酸在短時(shí)間內(nèi)達(dá)到 ng水平而被檢出 。 近年來(lái)還發(fā)展了一系列以 PCR為基礎(chǔ)的其他體外核酸擴(kuò)增技術(shù) 。 已被廣泛應(yīng)用于病毒性感染的診斷與研究中 對(duì)以測(cè)定基因核酸序列的病毒，可設(shè)計(jì)相應(yīng)的病毒基因的引物 ,作多聚酶鏈反應(yīng) ( PCR),其原則為先加入標(biāo)本中提取的核酸，對(duì) RNA則需先轉(zhuǎn)錄成 DNA， 加入耐熱的 DNA多聚酶后，在一定溫度及條件下作 PCR。 通過(guò)擴(kuò)增病毒基因片段可診斷標(biāo)本中是否存在病毒核酸。但需注意操作污染而出現(xiàn)的假陽(yáng)性 檢
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