組織學(xué)緒論ppt課件(編輯修改稿)
2025-06-08 12:49 本頁面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 標(biāo)本，標(biāo)記抗體即與組織細(xì)胞中的相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合，可分別在熒光顯微鏡、普通的相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合，可分別在熒光顯微鏡、普通光鏡和電鏡下觀察。光鏡和電鏡下觀察。免疫細(xì)胞化學(xué)的方法免疫細(xì)胞化學(xué)的方法n 免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)主要有直接法和間接法（免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)主要有直接法和間接法（ 圖圖 15）。直接法是）。直接法是標(biāo)記某抗原的特異性抗體（又稱第一抗體），用標(biāo)記的第一抗標(biāo)記某抗原的特異性抗體（又稱第一抗體），用標(biāo)記的第一抗體孵育標(biāo)本以檢測(cè)其中的抗原成分。在間接法中，第一抗體不體孵育標(biāo)本以檢測(cè)其中的抗原成分。在間接法中，第一抗體不標(biāo)記；以第一抗體作為抗原免疫另一動(dòng)物，制備抗第一抗體的標(biāo)記；以第一抗體作為抗原免疫另一動(dòng)物，制備抗第一抗體的抗體，即第二抗體，并標(biāo)記第二抗體。染色時(shí)，先后以第一抗抗體，即第二抗體，并標(biāo)記第二抗體。染色時(shí)，先后以第一抗體和標(biāo)記的第二抗體處理標(biāo)本，在抗原存在部位形成抗原體和標(biāo)記的第二抗體處理標(biāo)本，在抗原存在部位形成抗原 第一第一抗體抗體 標(biāo)記第二抗體復(fù)合物，以達(dá)到檢測(cè)該抗原的目的（標(biāo)記第二抗體復(fù)合物，以達(dá)到檢測(cè)該抗原的目的（ 圖圖 16））。 n 為了在一張組織切片上同時(shí)顯示兩種抗原物質(zhì)，以發(fā)現(xiàn)其定位為了在一張組織切片上同時(shí)顯示兩種抗原物質(zhì)，以發(fā)現(xiàn)其定位、形態(tài)、甚至功能上的相互關(guān)系，可使用免疫細(xì)胞化學(xué)雙重染、形態(tài)、甚至功能上的相互關(guān)系，可使用免疫細(xì)胞化學(xué)雙重染色（色（ double staining）（）（ 圖圖 17）。）。n 電鏡免疫細(xì)胞化學(xué)常用膠體金標(biāo)記技術(shù)（電鏡免疫細(xì)胞化學(xué)常用膠體金標(biāo)記技術(shù)（ 圖圖 18）。）。（六）原位雜交（六）原位雜交 n 原位雜交是一種在組織細(xì)胞原位進(jìn)行的核酸分子雜交技術(shù)原位雜交是一種在組織細(xì)胞原位進(jìn)行的核酸分子雜交技術(shù)，敏感度高，特異性強(qiáng)，是當(dāng)前分子生物學(xué)研究的重要手，敏感度高，特異性強(qiáng)，是當(dāng)前分子生物學(xué)研究的重要手段。原位雜交的原理是兩條單核苷酸鏈通過堿基互補(bǔ)原則段。原位雜交的原理是兩條單核苷酸鏈通過堿基互補(bǔ)原則緊密結(jié)合，形成穩(wěn)定的雜交體。根據(jù)這一原理，用一條堿緊密結(jié)合，形成穩(wěn)定的雜交體。根據(jù)這一原理，用一條堿基序列已知、經(jīng)特定標(biāo)記的核苷酸鏈為探針，與組織切片基序列已知、經(jīng)特定標(biāo)記的核苷酸鏈為探針，與組織切片、細(xì)胞制備或染色體標(biāo)本中的待檢、細(xì)胞制備或染色體標(biāo)本中的待檢 DNA或或 mRNA片段進(jìn)行片段進(jìn)行雜交，然后顯示標(biāo)記物，從而獲得待檢核酸的分布和含量雜交，然后顯示標(biāo)記物，從而獲得待檢核酸的分布和含量等信息等信息 (圖圖 19) 。按照探針分子的性質(zhì)，可將其分為。按照探針分子的性質(zhì)，可將其分為 cDNA探針、探針、 cRNA探針和寡核苷酸探針。探針和寡核苷酸探針。 （七）放射自顯影術(shù)（七）放射自顯影術(shù)n 放射自顯影術(shù)放射自顯影術(shù) (Autoradiography)可通過研究機(jī)體對(duì)放射性核可通過研究機(jī)體對(duì)放射性核素標(biāo)記物的攝取和代謝過程來檢測(cè)機(jī)體、細(xì)胞和組織的生素標(biāo)記物的攝取和代謝過程來檢測(cè)機(jī)體、細(xì)胞和組織的生物學(xué)特性及功能狀況。物學(xué)特性及功能狀況。（八）活體組織和活細(xì)胞研究方法（八）活體組織和活細(xì)胞研究方法1．組織（細(xì)胞）培養(yǎng)術(shù)．組織（細(xì)胞）培養(yǎng)術(shù)n 將組織或細(xì)胞放置在體外適當(dāng)?shù)臈l件下培養(yǎng)的技術(shù)統(tǒng)稱組將組織或細(xì)胞放置在體外適當(dāng)?shù)臈l件下培養(yǎng)的技術(shù)統(tǒng)稱組織培養(yǎng)術(shù)。利用機(jī)械分散法或酶（如胰酶和膠原酶等）消織培養(yǎng)術(shù)。利用機(jī)械分散法或酶（如胰酶和膠原酶等）消化法分離組織中某種細(xì)胞，使其成為單細(xì)胞懸液，然后接化法分離組織中某種細(xì)胞，使其成為單細(xì)胞懸液，然后接種于培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)板，使之貼壁生長或懸浮生長，稱為細(xì)種于培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)板，使之貼壁生長或懸浮生長，稱為細(xì)胞培養(yǎng)（胞培養(yǎng)（ 圖圖 110）。細(xì)胞培養(yǎng)一般在二氧化碳培養(yǎng)箱中進(jìn)）。細(xì)胞培養(yǎng)一般在二氧化碳培養(yǎng)箱中進(jìn)行，嚴(yán)防微生物污染，同時(shí)要有合適的溫度、行，嚴(yán)防微生物污染，同時(shí)要有合適的溫度、 O2和和 CO2濃濃度、濕度等。培養(yǎng)細(xì)胞的營養(yǎng)來自培養(yǎng)基，可根據(jù)培養(yǎng)細(xì)度、濕度等。培養(yǎng)細(xì)胞的營養(yǎng)來自培養(yǎng)基，可根據(jù)培養(yǎng)細(xì)胞的種類選用不同的培養(yǎng)基。胞的種類選用不同的培養(yǎng)基。2. 組織工程組織工程n 組織工程是用細(xì)胞培養(yǎng)術(shù)在體外模擬構(gòu)建組織或器官的技組織工程是用細(xì)胞培養(yǎng)術(shù)在體外模擬構(gòu)建組織或器官的技術(shù)，它是生物醫(yī)學(xué)和材料科學(xué)交叉融合的產(chǎn)物，也是目前術(shù)，它是生物醫(yī)學(xué)和材料科學(xué)交叉融合的產(chǎn)物，也是目前生物醫(yī)學(xué)研究的熱點(diǎn)。國內(nèi)、外學(xué)者應(yīng)用組織工程技術(shù)已生物醫(yī)學(xué)研究的熱點(diǎn)。國內(nèi)、外學(xué)者應(yīng)用組織工程技術(shù)已開展了許多人造組織和器官的研制，如皮膚、軟骨、骨、開展了許多人造組織和器官的研制，如
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