組織學緒論ppt課件(編輯修改稿)
2025-06-08 12:49 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 標本，標記抗體即與組織細胞中的相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合，可分別在熒光顯微鏡、普通的相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合，可分別在熒光顯微鏡、普通光鏡和電鏡下觀察。光鏡和電鏡下觀察。免疫細胞化學的方法免疫細胞化學的方法n 免疫細胞化學技術(shù)主要有直接法和間接法（免疫細胞化學技術(shù)主要有直接法和間接法（ 圖圖 15）。直接法是）。直接法是標記某抗原的特異性抗體（又稱第一抗體），用標記的第一抗標記某抗原的特異性抗體（又稱第一抗體），用標記的第一抗體孵育標本以檢測其中的抗原成分。在間接法中，第一抗體不體孵育標本以檢測其中的抗原成分。在間接法中，第一抗體不標記；以第一抗體作為抗原免疫另一動物，制備抗第一抗體的標記；以第一抗體作為抗原免疫另一動物，制備抗第一抗體的抗體，即第二抗體，并標記第二抗體。染色時，先后以第一抗抗體，即第二抗體，并標記第二抗體。染色時，先后以第一抗體和標記的第二抗體處理標本，在抗原存在部位形成抗原體和標記的第二抗體處理標本，在抗原存在部位形成抗原 第一第一抗體抗體 標記第二抗體復(fù)合物，以達到檢測該抗原的目的（標記第二抗體復(fù)合物，以達到檢測該抗原的目的（ 圖圖 16））。 n 為了在一張組織切片上同時顯示兩種抗原物質(zhì)，以發(fā)現(xiàn)其定位為了在一張組織切片上同時顯示兩種抗原物質(zhì)，以發(fā)現(xiàn)其定位、形態(tài)、甚至功能上的相互關(guān)系，可使用免疫細胞化學雙重染、形態(tài)、甚至功能上的相互關(guān)系，可使用免疫細胞化學雙重染色（色（ double staining）（）（ 圖圖 17）。）。n 電鏡免疫細胞化學常用膠體金標記技術(shù)（電鏡免疫細胞化學常用膠體金標記技術(shù)（ 圖圖 18）。）。（六）原位雜交（六）原位雜交 n 原位雜交是一種在組織細胞原位進行的核酸分子雜交技術(shù)原位雜交是一種在組織細胞原位進行的核酸分子雜交技術(shù)，敏感度高，特異性強，是當前分子生物學研究的重要手，敏感度高，特異性強，是當前分子生物學研究的重要手段。原位雜交的原理是兩條單核苷酸鏈通過堿基互補原則段。原位雜交的原理是兩條單核苷酸鏈通過堿基互補原則緊密結(jié)合，形成穩(wěn)定的雜交體。根據(jù)這一原理，用一條堿緊密結(jié)合，形成穩(wěn)定的雜交體。根據(jù)這一原理，用一條堿基序列已知、經(jīng)特定標記的核苷酸鏈為探針，與組織切片基序列已知、經(jīng)特定標記的核苷酸鏈為探針，與組織切片、細胞制備或染色體標本中的待檢、細胞制備或染色體標本中的待檢 DNA或或 mRNA片段進行片段進行雜交，然后顯示標記物，從而獲得待檢核酸的分布和含量雜交，然后顯示標記物，從而獲得待檢核酸的分布和含量等信息等信息 (圖圖 19) 。按照探針分子的性質(zhì)，可將其分為。按照探針分子的性質(zhì)，可將其分為 cDNA探針、探針、 cRNA探針和寡核苷酸探針。探針和寡核苷酸探針。 （七）放射自顯影術(shù)（七）放射自顯影術(shù)n 放射自顯影術(shù)放射自顯影術(shù) (Autoradiography)可通過研究機體對放射性核可通過研究機體對放射性核素標記物的攝取和代謝過程來檢測機體、細胞和組織的生素標記物的攝取和代謝過程來檢測機體、細胞和組織的生物學特性及功能狀況。物學特性及功能狀況。（八）活體組織和活細胞研究方法（八）活體組織和活細胞研究方法1．組織（細胞）培養(yǎng)術(shù)．組織（細胞）培養(yǎng)術(shù)n 將組織或細胞放置在體外適當?shù)臈l件下培養(yǎng)的技術(shù)統(tǒng)稱組將組織或細胞放置在體外適當?shù)臈l件下培養(yǎng)的技術(shù)統(tǒng)稱組織培養(yǎng)術(shù)。利用機械分散法或酶（如胰酶和膠原酶等）消織培養(yǎng)術(shù)。利用機械分散法或酶（如胰酶和膠原酶等）消化法分離組織中某種細胞，使其成為單細胞懸液，然后接化法分離組織中某種細胞，使其成為單細胞懸液，然后接種于培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)板，使之貼壁生長或懸浮生長，稱為細種于培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)板，使之貼壁生長或懸浮生長，稱為細胞培養(yǎng)（胞培養(yǎng)（ 圖圖 110）。細胞培養(yǎng)一般在二氧化碳培養(yǎng)箱中進）。細胞培養(yǎng)一般在二氧化碳培養(yǎng)箱中進行，嚴防微生物污染，同時要有合適的溫度、行，嚴防微生物污染，同時要有合適的溫度、 O2和和 CO2濃濃度、濕度等。培養(yǎng)細胞的營養(yǎng)來自培養(yǎng)基，可根據(jù)培養(yǎng)細度、濕度等。培養(yǎng)細胞的營養(yǎng)來自培養(yǎng)基，可根據(jù)培養(yǎng)細胞的種類選用不同的培養(yǎng)基。胞的種類選用不同的培養(yǎng)基。2. 組織工程組織工程n 組織工程是用細胞培養(yǎng)術(shù)在體外模擬構(gòu)建組織或器官的技組織工程是用細胞培養(yǎng)術(shù)在體外模擬構(gòu)建組織或器官的技術(shù)，它是生物醫(yī)學和材料科學交叉融合的產(chǎn)物，也是目前術(shù)，它是生物醫(yī)學和材料科學交叉融合的產(chǎn)物，也是目前生物醫(yī)學研究的熱點。國內(nèi)、外學者應(yīng)用組織工程技術(shù)已生物醫(yī)學研究的熱點。國內(nèi)、外學者應(yīng)用組織工程技術(shù)已開展了許多人造組織和器官的研制，如皮膚、軟骨、骨、開展了許多人造組織和器官的研制，如
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