組織學(xué)緒論ppt課件(參考版)
2025-05-15 12:49本頁面
【正文】 期示蹤。種細(xì)胞，該基因的表達(dá)產(chǎn)物變成了這種細(xì)胞的示蹤標(biāo)記。近年來，人們將含有某一報告基因的逆轉(zhuǎn)錄病毒導(dǎo)入某。這些示蹤劑應(yīng)用方便、標(biāo)記明確、易于觀察，但會記物。常用尼羅藍(lán)術(shù)方法，如對神經(jīng)嵴細(xì)胞的遷移和分化研究。細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)、血液學(xué)、腫瘤學(xué)等的研究。流式細(xì)胞術(shù)廣泛應(yīng)用于群體中不同類型細(xì)胞的有關(guān)數(shù)據(jù)。其工作原理檢測系統(tǒng)和控制系統(tǒng)、細(xì)胞分選系統(tǒng)等組成。流式細(xì)胞儀由液流系統(tǒng)、激發(fā)光器件、信號速定量測定。按一定的數(shù)學(xué)公式推算出其立體數(shù)值。其中三維立體結(jié)構(gòu)的研究又稱體視學(xué)。其中三維立體結(jié)構(gòu)的研究又稱體視學(xué)。）。碘化丙啶只能進(jìn)入死細(xì)胞，使其核呈紅色熒光。碘化丙啶只能進(jìn)入死細(xì)胞，使其核呈紅色熒光。結(jié)合。色，常用此方法檢測培養(yǎng)細(xì)胞的存活率。如活細(xì)胞對臺盼藍(lán)拒染，而死細(xì)胞被染成藍(lán)變的死細(xì)胞?？椉t細(xì)胞并進(jìn)行計(jì)數(shù)，以判斷骨髓的造血功能。如取血液，培養(yǎng)的細(xì)胞直接進(jìn)行染色，稱體外活體染色。也可對分離的活細(xì)胞或體外巨噬細(xì)胞的分布和吞噬活性。如將墨汁注入動物體內(nèi)，被巨噬細(xì)胞吞噬，從而觀察等。定結(jié)構(gòu)和功能的組織或器官，用于組織修復(fù)。組織工程的）。國內(nèi)、外學(xué)者應(yīng)用組織工程技術(shù)已生物醫(yī)學(xué)研究的熱點(diǎn)。胞的種類選用不同的培養(yǎng)基。培養(yǎng)細(xì)胞的營養(yǎng)來自培養(yǎng)基，可根據(jù)培養(yǎng)細(xì)度、濕度等。細(xì)胞培養(yǎng)一般在二氧化碳培養(yǎng)箱中進(jìn)）。利用機(jī)械分散法或酶（如胰酶和膠原酶等）消織培養(yǎng)術(shù)。物學(xué)特性及功能狀況。探針和寡核苷酸探針。按照探針分子的性質(zhì)，可將其分為。根據(jù)這一原理，用一條堿緊密結(jié)合，形成穩(wěn)定的雜交體。原位雜交的原理是兩條單核苷酸鏈通過堿基互補(bǔ)原則段。）。）。染色時，先后以第一抗體和標(biāo)記的第二抗體處理標(biāo)本，在抗原存在部位形成抗原體和標(biāo)記的第二抗體處理標(biāo)本，在抗原存在部位形成抗原 第一第一抗體抗體 標(biāo)記第二抗體復(fù)合物，以達(dá)到檢測該抗原的目的（標(biāo)記第二抗體復(fù)合物，以達(dá)到檢測該抗原的目的（ 圖圖 16））。在間接法中，第一抗體不標(biāo)記；以第一抗體作為抗原免疫另一動物，制備抗第一抗體的標(biāo)記；以第一抗體作為抗原免疫另一動物，制備抗第一抗體的抗體，即第二抗體，并標(biāo)記第二抗體。直接法是標(biāo)記某抗原的特異性抗體（又稱第一抗體），用標(biāo)記的第一抗標(biāo)記某抗原的特異性抗體（又稱第一抗體），用標(biāo)記的第一抗體孵育標(biāo)本以檢測其中的抗原成分。免疫細(xì)胞化學(xué)的方法免疫細(xì)胞化學(xué)的方法n 免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)主要有直接法和間接法（免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)主要有直接法和間接法（ 圖圖 15）。最后，應(yīng)用標(biāo)記抗體孵育標(biāo)本，標(biāo)記抗體即與組織細(xì)胞中最后，應(yīng)用標(biāo)記抗體孵育標(biāo)本，標(biāo)記抗體即與組織細(xì)胞中的相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合，可分別在熒光顯微鏡、普通的相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合，可分別在熒光顯微鏡、普通光鏡和電鏡下觀察。常用的標(biāo)記物有熒光染料，如異硫氰酸熒光素?zé)晒馑?(FITC)、得克薩斯紅、得克薩斯紅 (Texas red)；酶類，如辣根過氧；酶類，如辣根過氧化物酶、堿性磷酸酶等；重金屬，如膠體金、鐵蛋白等。其次，要對抗體進(jìn)行標(biāo)記。進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色時，首先要獲得被檢多肽或蛋白質(zhì)等大分子物質(zhì)的抗體。 （五）免疫組織化學(xué)（五）免疫組織化學(xué)n 免疫組織化學(xué)是根據(jù)免疫學(xué)原理，應(yīng)用帶有可見標(biāo)記的特免疫組織化學(xué)是根據(jù)免疫學(xué)原理，應(yīng)用帶有可見標(biāo)記的特異性抗原異性抗原 抗體反應(yīng)，檢測組織、細(xì)胞中多肽和蛋白質(zhì)等抗體反應(yīng)，檢測組織、細(xì)胞中多肽和蛋白質(zhì)等大分子物質(zhì)的一種技術(shù)。 n 脂類常用蘇丹染料、油紅脂類常用蘇丹染料、油紅 O、尼羅藍(lán)等脂溶性染料染色。n 糖類物質(zhì)常用過碘酸糖類物質(zhì)常用過碘酸 Schiff反應(yīng)反應(yīng) (PAS反應(yīng)反應(yīng) )顯示（顯示（ 圖圖 14）。組織細(xì)胞中的糖類、脂類、蛋白質(zhì)、核酸、酶等均可與相應(yīng)試劑反應(yīng)，最后形成有色反應(yīng)終產(chǎn)核酸、酶等均可與相應(yīng)試劑反應(yīng)，最后形成有色反應(yīng)終產(chǎn)物或電子致密物，應(yīng)用光鏡或電鏡進(jìn)行觀察。（四）（四） 組織化學(xué)和細(xì)胞化學(xué)技術(shù)組織化學(xué)和細(xì)胞化學(xué)技術(shù)n 組織化學(xué)（組織化學(xué)（ histochemistry）和細(xì)胞化學(xué)（）和細(xì)胞化學(xué)（ cytochemistry）技）技術(shù)是應(yīng)用化學(xué)反應(yīng)原理檢測組織和細(xì)胞的化學(xué)成分并進(jìn)行術(shù)是應(yīng)用化學(xué)反應(yīng)原理檢測組織和細(xì)胞的化學(xué)成分并進(jìn)行定位和定量的技術(shù)。屏上成像。掃描電鏡發(fā)射的細(xì)電子束在樣品表面按順序逐點(diǎn)移動掃描，使樣品表面金屬膜發(fā)射出電子（稱二次序逐點(diǎn)移動掃描，使樣品表面金屬膜發(fā)射出電子（稱二次電子），二次電子信號被探測器收集，經(jīng)過放大，在熒光電子），二次電子信號被探測器收集，經(jīng)過放大，在熒光屏上成像。將小塊組織（直徑約 cm）經(jīng)固定和臨界點(diǎn)脫水干燥后，在其表面噴鍍薄層）經(jīng)固定和臨界點(diǎn)脫水干燥后，在其表面噴鍍薄層碳膜和金屬膜。2．掃描電鏡術(shù)．掃描電鏡術(shù)n 掃描電鏡術(shù)
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