【文章內(nèi)容簡介】 無機化合物的吸收光譜 1. d— d躍遷和 f－ f 躍遷 過渡金屬離子未充滿的 d軌道，由于受配位場（或晶體場）的影響而發(fā)生分裂，當吸收光時可發(fā)生 d— d躍遷，吸收波長取決于分裂能的大小， L越強，分裂能越大，吸收波長越短。 College of Bioengineering, Jimei University, CHINA 42 H2O的配位場小于 NH3 7 9 4 n m O)C u ( H 242 淺藍色?663nm )C u ( N H 243 深藍色?特點：吸收強度小。 M(H2O)6M+(Cr3+、 Co2+) 型水合離子分別為藍色和桃紅色。 College of Bioengineering, Jimei University, CHINA 43 2. 電荷遷移躍遷 在金屬配合物中，配體和金屬之間發(fā)生躍遷，一般是 L→M ， 吸收波長取決于 L給電子和 M接受電子能力。 SCN比Cl易給電子， FeSCN2+， 吸收波長長，在可見區(qū)， FeCl2+在紫外區(qū) 。 College of Bioengineering, Jimei University, CHINA 44 特點：靈敏度高，實際工作中常用。 常將 M與某 L（ 顯色劑）生成具有電荷遷移的配合物，然后進行含量測定 。 3. ? － ?* 躍遷 配體具有雙鍵的金屬絡(luò)合物 College of Bioengineering, Jimei University, CHINA 45 一、郎伯 比爾（ LambertBeer ） 定律 rta IIII ???0入射光強度 吸光強度 反光強度 透光強度 ＋ IS 散射光強度 均勻溶液，散射光小，可忽略 College of Bioengineering, Jimei University, CHINA 46 參比溶液： ，抵消池的反射光（ 10％） 。 ta III ??00IIT t?（ T為透光度） rta IIII ???0I a I 0 參比 College of Bioengineering, Jimei University, CHINA 47 溶液對光透光度： b、 c及入射光 λ(與 a有關(guān)） 等因素有關(guān)。 2. a的大小反映測量的靈敏度。 λ 不變，則只與 b（非平行光）、 c有關(guān)。 a b cIIT ??? 100溶液濃度 液層厚度 透光度 （ Transmittance) t College of Bioengineering, Jimei University, CHINA 48 abcIITA ???? 0lglg吸光度（ absorbance） 吸光系數(shù) 液層厚度 溶液濃度 College of Bioengineering, Jimei University, CHINA 49 abcIITA ???? 0lglg當 a、 c一定時， A∝ b Lambert’s law 當 a、 b一定時， A∝ c Beer’s law LambertBeer 定律可表述為：在一定條件下，物質(zhì)的吸光度與溶液的濃度和液層厚度的乘積成正比，稱為光吸收定律，是吸收光譜定量的依據(jù)。 College of Bioengineering, Jimei University, CHINA 50 LambertBeer 定律是均勻、非散射介質(zhì)對光吸收的基本定律，只有對入射光是單色光才完全適用 。 LambertBeer 定律適應(yīng)范圍： College of Bioengineering, Jimei University, CHINA 51 二、 吸光系數(shù) absorptivity 當濃度以 g/l表示時， k為吸收系數(shù)，用 a表示 ,單位為 L?cm1?g1 ，則 當濃度以 mol/l表示時， k為摩爾吸收系數(shù)，用 ε表示 ,單位為 L?cm1?mol1，則 A=lg(I0/It)=kbc A=lg(I0/It)=abc A=lg(I0/It)=εbc a 與 ε關(guān)系： a = ε/ M (M為摩爾質(zhì)量） College of Bioengineering, Jimei University, CHINA 52 ?與物質(zhì)的本性、溶劑和入射光的波長有關(guān)，即 （ 1）物質(zhì)不同， ?不同，是物質(zhì)在一定條件下的特性常數(shù)。 （ 2）溶劑不同，同一物質(zhì)的 ?不同，所以應(yīng)注明溶劑。 （ 3） ?不同，同一物質(zhì)的吸收系數(shù)也不同，所以吸收系數(shù)應(yīng)注明波長； College of Bioengineering, Jimei University, CHINA 53 （ 4）可作為定性鑒定的參數(shù)（區(qū)分 π→π ＊ 及 n→π ＊ ） （ 5） ε 在數(shù)值上等于濃度為 1mol/l,液層厚度為1cm時，溶液的吸光度。 （ 6） ε max越大表明該物質(zhì)吸光能力越強，用光度法測定該物質(zhì)靈敏度越高。 ε 105 超高靈敏；（ 6－ 10） 104高靈敏； 2 104 不靈敏。 College of Bioengineering, Jimei University, CHINA 54 三、 偏離比耳定律的原因 (濃度過大不適合 ) 當 c mol L1, 分子或離子間平均距離縮小 ，其電子云或電荷分布相互影響 ， 分子軌道能級之差發(fā)生變化 ， 從而改變最大吸收波長光的吸收能力 。 消除措施：濃度控制在上限以下 。 正偏離 負偏離 College of Bioengineering, Jimei University, CHINA 55 a．非單色光 212121121221121 00)(0000000021 10101010IIIIIIIIIIIIT ClEEClEClEClE????????????? －－－－21212100)(00110lglgIIIIClETA ClEE??????? ?當 E1=E2時， A=E1CL A～ C 有線性關(guān)系。 設(shè) ?1是需要的光：當 E1＞ E2時，測得的 A值低，負誤差；反之，產(chǎn)生正誤差。且 E1 與 E2越接近，誤差越小 單色光越純越好；一般使用靈敏度最大的吸收波長作為測定波長。 當 E1≠E 2時 A～ C 非線性，偏離比爾定律。 （光學(xué)因素） College of Bioengineering, Jimei University, CHINA 56 b．雜散光 儀器中常含有與所需波長相差較大的光，一般樣品不吸收， 所以不干擾測定。 c．散射光和反射光 渾濁溶液產(chǎn)生散射和反射，不能用空白消除影響 (被認為成吸光）， I變小，但 I0不變。 A變大，正誤差。 d. 非平行光 通過吸收池的非平行光影響光程 L，不同儀器測定 A值不同的主要原因。 College of Bioengineering, Jimei University, CHINA 57 a. 吸光物質(zhì)在溶液中發(fā)生化學(xué)變化引起的偏離 ???? ???? HC rOH C rOOHOCr 222 2442272黃色橙色 由于吸光物質(zhì)變成了不同的存在形式 消除措施：控制適當?shù)娘@色條件。 如酸度控制。 b. 配合物不穩(wěn)定也會引起的偏離 有些顯色配合物不穩(wěn)定 ,發(fā)生解離 （ 越稀 ） 。 消除措施：試液濃縮富集 。 College of Bioengineering, Jimei University, CHINA 58 紫外 — 可見分光光度計 紫外－可見分光光度計由上五部分組成。 ★對光源的要求 足夠光強、穩(wěn)定、連續(xù)輻射且強度隨波長變化小 ： 340～ 2500nm，多用在可見光區(qū)。 : 160～ 375nm，用于紫外光區(qū)。 College of Bioengineering, Jimei University, CHINA 59 ★ 單色器 單色器的用途就是把混合光變成單色光，由入射狹縫、準直鏡、色散元件、聚焦元件和出口狹縫組成。常用的色散元件有棱鏡和光柵。 棱鏡 不同波長的光具有不同