細(xì)胞化學(xué)術(shù)ppt課件(編輯修改稿)
2025-05-29 08:11 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 色 沉淀，色深者表示酶多。 對照組無反應(yīng)。 ATPase ATPase ATPase G6Pase G6Pase G6Pase G6Pase 4． 5核苷酸酶的顯示法 （ 5Nucleoyidase） 此酶作用于 5核苷酸 、 水解嘌呤核苷酸或嘧啶核苷酸第五位碳原子的磷酸分子 ，釋放磷酸基 +硝酸鉛 → 磷酸鉛 （ 黑色 ） 。 結(jié)果 5核苷酸酶呈棕黑色 沉淀 ， 色深者表示酶多 。 對照組無反應(yīng) 。 免疫細(xì)胞化學(xué)術(shù) 應(yīng)用抗原與抗體結(jié)合的免疫學(xué)原理 ， 檢測細(xì)胞內(nèi)的多肽 、 蛋白質(zhì)及膜抗原和受體等大分子物質(zhì)的存在與分布 。 其特點(diǎn)是特異性強(qiáng) 、 敏感性高 、 進(jìn)展迅速 ， 應(yīng)用廣泛 。 程 序： ﹙ 1﹚ 抗原 （ 提取動物某些肽類或蛋白質(zhì) ） → 注入另一動物體內(nèi) → 產(chǎn)生抗體 （ Ig） → 血清分離提取抗體 ﹙ 2﹚ 抗體標(biāo)記 抗體 +熒光素 （ 異硫氰酸熒光素 ） → 與相應(yīng)抗原結(jié)合呈 黃綠色熒光 抗體 +辣根過氧化物酶 （ HRP） → 與相應(yīng)抗原結(jié)合呈 棕紅色熒光 方 法： （ 1） 直接法 抗原 —— 抗體直接結(jié)合 簡便 、 迅速 ， 但是敏感性較低 。 （ 2） 間接法 一抗體 （ 作為抗原 ） → 注入物體內(nèi) → 產(chǎn)生第二抗體 常用過氧化物酶 —— 抗過氧化物酶復(fù)合物法 （ PAP法 ） 。 較復(fù)雜 ， 敏感性高 （ 3） 新進(jìn)展 親合素 （ 卵白素 ） —— 生物素法 （ LAB法 ） 橋連親合素 （ 卵白素 ） —— 生物素法 （ BAB法 ） 親合素 —— 生物素 —— 過氧化物酶復(fù)合物法 （ ABC法 ） (市場商品 ) 組織培養(yǎng)術(shù) : 體外研究活細(xì)胞或組織的有價值的手段 無菌條件下，取活組織、活細(xì)胞（或傳代培養(yǎng)的細(xì)胞 株） → 培養(yǎng)液（天然或人工合成），在一定溫度、 O2 、 CO 、 Ph→ 培養(yǎng)（加某種受試因素） → 倒 置顯微鏡下觀察：細(xì)胞活組織的增殖、分化、運(yùn)動、 吞噬等?？蛇B續(xù)錄像觀察。 正常培養(yǎng)細(xì)胞 中藥組細(xì)胞 西藥組細(xì)胞 對照組細(xì)胞 中藥組細(xì)胞 原位雜交術(shù) : 即核酸分子
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