種子擴(kuò)大培養(yǎng)ppt課件(編輯修改稿)
2025-05-29 05:41 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 同。 ? 原材料質(zhì)量的波動(dòng)，起它要作用的是其中無(wú)機(jī)離子含量不同，如微量元素 Mg2+ 、 Cu2+ 、 Ba2+能刺激孢子的形成。磷含量太多或太少也會(huì)影響孢子的質(zhì)量。 21 ? 水質(zhì)的影響：地區(qū)不同、季節(jié)變化和水源污染，均可造成水質(zhì)波動(dòng)，影響種子質(zhì)量。 ? 菌種在固體培養(yǎng)基上可呈現(xiàn)多種不同代謝類(lèi)型的菌落，氮源品種越多，出現(xiàn)的菌落類(lèi)型也越多，不利于生產(chǎn)的穩(wěn)定。 22 ? 措施 ? 培養(yǎng)基所用原料要經(jīng)過(guò)發(fā)酵試驗(yàn)合格才可使用 ? 嚴(yán)格控制滅菌后培養(yǎng)基的質(zhì)量 ? 斜面培養(yǎng)基使用前，需在適當(dāng)溫度下放置一定時(shí)間 ? 供生產(chǎn)用的孢子培養(yǎng)基要用比較單一的氮源，作為選種或分離用的培養(yǎng)基則采用較復(fù)雜的有機(jī)氮源 23 2，培養(yǎng)條件 （ 1）溫度 溫度對(duì)多數(shù)品種斜面孢子質(zhì)量有顯著的影響。如土霉素生產(chǎn)菌種在高于 37?C培養(yǎng)時(shí)，孢子接入發(fā)酵罐后出現(xiàn)糖代謝變慢，氨基氮回升提前，菌絲過(guò)早自溶，效價(jià)降低等現(xiàn)象。一般各生產(chǎn)單位都嚴(yán)格控制孢子子斜面的培養(yǎng)溫度。 24 （ 2）濕度 制備斜面孢子培養(yǎng)基的濕度對(duì)孢子的數(shù)量和質(zhì)量有較大的影響。例如土霉素生產(chǎn)菌種龜裂鏈霉菌，孢子制備時(shí)發(fā)現(xiàn)：在北方氣候干燥地區(qū)孢子斜面長(zhǎng)得較快，在含有少量水分的試管斜面培養(yǎng)基下部孢子長(zhǎng)得較好，而斜面上部由于水分迅速蒸發(fā)呈干疤狀，孢子稀少。在氣溫高含濕度大的地區(qū)，斜面孢子長(zhǎng)得慢，主要由于試管下部冷凝水多而不利于孢子的形成。從表中看出相對(duì)濕度在 40%~45%時(shí)孢子數(shù)量最多，且孢子顏色均勻，質(zhì)量較好。 25 3，培養(yǎng)時(shí)間和冷藏時(shí)間 （ 1）培養(yǎng)時(shí)間 ? 一般來(lái)說(shuō)，衰老的孢子不如年輕的孢子，因?yàn)樗ダ系逆咦右言谥鸩竭M(jìn)入發(fā)芽階段，核物質(zhì)趨于分化狀態(tài)。過(guò)于衰老的孢子會(huì)導(dǎo)致生產(chǎn)能力的下降。 ? 措施：孢子培養(yǎng)的時(shí)間應(yīng)該控制在孢子量多、孢子成熟、發(fā)酵產(chǎn)量正常的階段終止培養(yǎng)。 26 （ 2）冷藏時(shí)間 ? 斜面冷藏對(duì)孢子質(zhì)量的影響與孢子成熟程度有關(guān)。如土霉素生產(chǎn)菌種孢子斜面培養(yǎng) 4天左右即于4?C冰箱保存，發(fā)現(xiàn)冷藏 7~8天菌體細(xì)胞開(kāi)始自溶。而培養(yǎng) 5天以后冷藏， 20天未發(fā)現(xiàn)自溶。 ? 冷藏時(shí)間對(duì)孢子的生產(chǎn)能力也有影響。例如在鏈霉素生產(chǎn)中，斜面孢子在 6? C冷藏兩個(gè)月后的發(fā)酵單位比冷藏一個(gè)月降低 18%，冷藏 3個(gè)月后降低 35%。 27 4，接種量 ? 接種量大小影響到培養(yǎng)基中孢子的數(shù)量，進(jìn)而影響菌體的生理狀況。 28 二、影響種子質(zhì)量的因素及控制 ? 孢子的質(zhì)量 ? 培養(yǎng)基 ? 培養(yǎng)條件 ? 種齡 ? 接種量 29 1，培養(yǎng)基 ? 營(yíng)養(yǎng)成分適合種子培養(yǎng)的需要 ? 選擇有利于孢子發(fā)芽和菌體生長(zhǎng)的培養(yǎng)基； ? 營(yíng)養(yǎng)上要易于被菌體直接吸收和利用； ? 營(yíng)養(yǎng)成分要適當(dāng)豐富和完全，氮源和維生素含量要高 ? 營(yíng)養(yǎng)成分要盡可能與發(fā)酵培養(yǎng)基相近。 30 2，培養(yǎng)條件 （ 1）溫度 （ 2）通氣量 在種子罐中培養(yǎng)的種子除保證供給易被利用的培養(yǎng)基外，有足夠的通氣量可以提高種子質(zhì)量。例如，青霉素的生產(chǎn)菌種在制備過(guò)程中將通氣充足和不足兩種情況下得到的種子分別接入發(fā)酵罐內(nèi)，它們的發(fā)酵單位可相差 1倍。但也有例外，例如土霉素生產(chǎn)菌，一級(jí)種子罐的通氣量小對(duì)發(fā)酵有利。 31 3，種齡 ? 種齡：是指種子罐中培養(yǎng)的菌絲體開(kāi)始移入下一級(jí)種子罐或發(fā)酵罐時(shí)的培養(yǎng)時(shí)間。 ? 通常種齡是以處于生命力極旺盛的對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期，菌體量還未達(dá)到最大值時(shí)的培養(yǎng)時(shí)間較為合適。時(shí)間太長(zhǎng)，菌種趨于老化，生產(chǎn)能力下降，菌體自溶；種齡太短，造成發(fā)酵前期生長(zhǎng)緩慢。 ? 不同菌種或同一菌種工藝條件不同，種齡是不一樣的，一般需經(jīng)過(guò)多種實(shí)驗(yàn)來(lái)確定。嗜堿性芽孢桿菌生產(chǎn)堿性蛋白酶，12小時(shí)最好。 32
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